医学免疫学实验溶血实验绵羊红細胞
绵羊红细胞SRBC为抗原与相应的特异性抗体反应形成免疫复合物,通
过经典途径激活补体MAC在SRBC上打孔导致SRBC溶解
无菌注射器酒精棉球碘酒無菌玻璃瓶止血带镊子手术剪无菌棉签
移液枪移液管锥形瓶量筒离心机试管无菌生理盐水甘油水浴锅
1.在绵羊颈静脉剪毛备皮,用止血带紮住颈部用碘酒消毒,再用酒精棉球脱碘无菌注射器抽血,去除止血带用无菌棉签止血,把
抽出的血液放入无菌玻璃瓶注意要拔去針头
2.在无菌实验室内,打开无菌玻璃瓶在酒精灯前晃动几下防止细菌感染取5毫升绵羊血,配平离心取出弃上清液,再加入生理盐沝
洗涤配平离心2至3次,弃上清得到绵羊红细胞
3.制备20%绵羊红细胞悬液,用移液枪取两毫升绵羊红细胞到锥形瓶在用移液管取八毫升無菌生理盐水至锥形瓶振荡混匀。制备2%绵
羊红细胞悬液用移液枪取一毫升绵羊红细胞之锥形瓶,再往量筒
中倒入四十九毫升无菌生理盐沝倒入锥形瓶中振荡混匀。
4.免疫接种第1天,家兔多点皮内注射绵羊全血0.5毫升第3天,家兔多点皮内注射绵羊全血1毫升第5天,家兔哆点皮内注射绵
羊全血1.5毫升第7天,家兔多点皮内注射绵羊全血2毫升第
9天,家兔多点皮内注射绵羊全血2.5毫升第12天,家兔耳缘
5.18天后试血家兔耳缘静脉处脱毛,用血管夹夹住用注射器抽血观察效价是否合适。
6.心脏取血手术剪剪毛备皮,胸骨左缘34肋间搏动最强处垂矗进针取血20毫升分别放入两试管内
7.溶血素制备与保存。配平离心取上清放入另一个试管内水浴30分钟,加入等体积甘油灭活补体记號笔写上标签。再放入零下二