四、审议通过了《2015年度财务工作报告》，并提请年度股东大会审议。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 五、审议通过了《2015年度利润分配预案》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 经审计，2015年度公司本体（母公司口径）实现净利润206，010，.cn）。

　　 七、审议通过了《2015年度内部控制评价报告》，同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 中喜会计师事务所(特殊普通合伙)就此出具了《内部控制审计报告》。具体内容详见上海证券交易所网站（.cn）。

　　 八、审议通过了《2015年度独立董事述职报告》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。具体内容详见上海证券交易所网站（.cn）。

　　 九、审议通过了《关于2015年度各项资产处置损失的议案》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 2015年度公司固定资产损失.cn）。

　　 二十一、审议通过了《董事会薪酬与考核委员会2015年度工作报告》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 二十二、审议通过了《董事会战略委员会2015年度工作报告》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 二十三、审议通过了《董事会提名委员会2015年度工作报告》。同意票15票，反对票0票，弃权票0票。

　　 唐山三友化工股份有限公司董事会

　　 证券代码：600409证券简称：三友化工公告编号：临号

　　 唐山三友化工股份有限公司

　　 关于日常关联交易2016年预计及

　　 2015年完成情况的公告

　　 本公司董事会及全体董事保证本公告内容不存在任何虚假记载、误导性陈述或者重大遗漏，并对其内容的真实性、准确性和完整性承担个别及连带责任。

　　 ● 该事项尚需提交年度股东大会审议。

　　 ● 日常关联交易对上市公司的影响：该关联交易属日常关联交易，遵循了公开、公平、公正的原则，保障了公司正常的生产经营，对公司持续经营不会产生不利影响。

　　 一、日常关联交易基本情况

　　 （一）日常关联交易履行的审议程序

　　 2016年3月29日，公司召开六届六次董事会审议通过了《关于日常关联交易2016年预计及2015年完成情况的议案》，关联董事么志义先生、王春生先生、李建渊先生、于得友先生、毕经喜先生、曾宪果先生、李瑞新先生、王兵先生回避了本议案表决。同意票7票，反对票0票，弃权票0票。

　　 独立董事就该事项发表了事前认可意见及独立意见。

　　 该事项尚需提交年度股东大会审议通过，与该事项有利害关系的关联股东将放弃在股东大会上对相关议案的投票权。

　　 （二）2015年度日常关联交易的预计和执行情况

　　 单位：人民币万元

　　 2015年实际发生金额与预计金额差异较大的原因：

　　 1、公司向唐山三友碱业（集团）有限公司采购电的金额比计划减少5012.55万元，主要是通过唐山三友碱业（集团）有限公司向供电局购买的网电电价较预计降低0.06元/度所致。

　　 2、公司向唐山三友碱业（集团）有限公司采购蒸汽金额减少2030.36万元，主要是公司通过技改技措使纯碱吨碱耗汽量减少和公司自供汽量有所增加所致。

　　 （三）2016年度日常关联交易预计金额和类别

　　 单位：人民币万元

　　 2016年预计金额与2015年实际发生金额差异较大的原因：

　　 注1：2016年热电公司拟对1、2#机进行技术改造，预计停机各为2个月，公司自身发电量有所减少。为进一步减少关联交易，公司通过与当地供电局沟通，拟将网购电端口由碱业集团改成公司，致使公司向碱业集团采购电量有所减少。

　　 注2：2016年2月，热电公司热电联产项目投产，自供蒸汽增加，外采减少。

　　 注3：公司热电联产项目正式投产后碱业集团热电分厂锅炉将停炉，受采煤合同延续因素影响再加铁路车皮计划无法调整，碱业集团将未使用的前期外采原煤按市场价销售给公司。

　　 注4：碱业集团热电分厂锅炉停炉后，向公司采购蒸汽用于自身发电。

　　 二、关联方介绍和关联关系

　　 (一)唐山三友集团有限公司

　　 注册资本：242，625万元

　　 法定代表人：么志义

　　 注册地址：河北省唐山市南堡开发区

　　 经营范围：工业投资，在国家法律、法规政策允许范围内进行资产管理

　　 与公司的关联关系：为公司母公司的控股股东。

　　 截止2015年底，未经审计的资产总额2，231，240.13万元，净资产702，336.48万元；2015年度实现净利润35，495.99万元。

　　 (二)唐山三友碱业(集团)有限公司

　　 注册资本：159，265万元

　　 法定代表人：于得友

　　 注册地址：河北省唐山市南堡开发区

　　 经营范围：火力发电；蒸汽、热水生产和供应；普通货运；住宿；大型餐馆；酒、卷烟、日用品零售；会议服务；房屋出租。

　　 与公司的关联关系：本公司母公司。

　　 截止2015年底，未经审计的资产总额2，315，648.89万元，净资产787，904.95万元；2015年度实现主营业务收入1，388，614.19万元，净利润42，406.67万元。

　　 (三)唐山三友实业有限责任公司

　　 注册资本：260万元

　　 法定代表人：刘亦庆

　　 注册地址：河北省唐山市南堡开发区

　　 经营范围：食用碱的销售，人行便道砖、粉煤灰三免砖、塑料填充母料生产、销售等业务。

　　 与公司的关联关系：同受母公司控制，为《股票上市规则》10.1.3第二项规定的情形。

　　 截止2015年底，未经审计的资产总额2，241.77万元，净资产296.19万元；2015年度实现主营业务收入5，521.40万元，净利润239.46万元。

　　 (四)河北长芦大清河盐化集团有限公司

　　 注册资本：8，209.27万元

　　 法定代表人：李瑞新

　　 注册地址：河北省乐亭县大清河

　　 经营范围：主要从事原盐、加碘精制盐、盐化工业品的生产。

　　 与公司的关联关系：同受母公司控制，为《股票上市规则》10.1.3第二项规定的情形。

　　 截止2015年底，未经审计的资产总额34，319.42万元，净资产627.78万元；2015年度实现主营业务收入743.38万元，净利润771.69万元。

　　 (五)唐山三友集团东光浆粕有限责任公司

　　 注册资本：17，000万元

　　 法定代表人：刘立德

　　 注册地址：河北省东光县城北工业开发区

　　 经营范围：主要从事化纤浆粕、造纸浆粕、竹浆粕、竹纤维、机械加工、纸制品、纤维素、精制棉等产品的生产和销售。

　　 与公司的关联关系：同受母公司控制，为《股票上市规则》10.1.3第二项规定的情形。

　　 截止2015年底，未经审计的资产总额53，886.99万元，净资产6，694.69万元；2015年度实现主营业务收入41，426.63万元，净利润-3，270.17万元。

　　 三、关联交易主要内容和定价政策

　　 2008年，公司与唐山三友碱业（集团）有限公司分别签订了水、电、蒸汽关联交易原则协议，公司根据价格调整情况适时签订了补充协议。

　　 2015年，公司与唐山三友集团有限公司签订了《办公楼租赁协议书》，按照协议规定，本公司将1号综合办公楼租赁给唐山三友集团有限公司作为办公使用，租金为310.00万元/年。

2011年7月，公司控股子公司唐山三友盐化有限公司与河北长芦大清河盐化集团有限公司签订《合作协议》，按照协议规定大清河盐化为三友盐化提供原盐生产经营所需要的土地使用权及地上建筑物、构筑物，并向三友盐化提供与原盐生产相关的配套服务；三友盐化按每生产1吨原盐提取8.44元的费用，作为大清河盐化的合作收益。2015年8月24日，公司六届四次董事会审议通过了《关于调整原盐生产合作经营费用的议案》，自2015年1月1日起，三友盐化由每生产1吨原盐支付8.44元的合作经营费调整到5.06元。

　　 四、关联交易对上市公司的影响

　　 上述关联交易均是在正常的生产经营和购销活动过程中产生的，预计此类交易短期内仍将持续发生，上述关联交易定价政策和定价依据公平、公正，交易公允，信息披露充分，没有损害公司及中小投资者的利益，也不会对公司的独立性构成影响。

　　 五、独立董事及董事会审计委员会的意见

　　 公司预计的2016年度日常关联交易是基于公司正常生产经营的需要所发生的，是必要的、有利的。上述关联交易协议的签订遵循了一般商业原则，交易定价公允、合理，充分体现了公平、自愿、等价、有偿的交易原则。关联交易的表决程序符合《公司法》等法律、法规及《公司章程》的规定，不存在损害公司及公司股东利益的情形。

　　 1、六届六次董事会会议决议；

　　 2、独立董事事前认可意见和独立意见；

　　 3、董事会审计委员会的意见。

　　 唐山三友化工股份有限公司董事会

　　 证券代码：600409证券简称：三友化工公告编号：临号

　　 唐山三友化工股份有限公司

　　 关于2016年度为子公司提供担保的公告

　　 本公司董事会及全体董事保证本公告内容不存在任何虚假记载、误导性陈述或者重大遗漏，并对其内容的真实性、准确性和完整性承担个别及连带责任。

　　 ● 被担保人名称：唐山三友氯碱有限责任公司、唐山三友热电有限责任公司、唐山三友硅业有限责任公司、唐山三友集团兴达化纤有限公司、青海五彩碱业有限公司、唐山三友集团香港国际贸易有限公司、港裕（上海）国际贸易有限公司、唐山三友物流有限公司。

　　 ● 2016年拟为子公司提供新增担保21.60亿元人民币。

　　 ● 截至2015年12月31日，公司为子公司提供担保余额为25.89亿元，占公司2015年底经审计净资产的38%。

　　 ● 除对子公司担保外，公司无对外担保。

　　 ● 公司无逾期对外担保。

　　 一、担保情况概述

　　 为支持子公司发展，保证项目顺利实施，根据子公司生产经营及项目建设资金的需求，2016年公司计划在已有的为子公司担保额度基础上，拟为子公司银行借款提供新增担保21.60亿元。

　　 2016年拟为子公司新增担保明细如下：

　　 单位：人民币万元

　　 注：上述事项已经公司六届六次董事会审议通过，尚需提交年度股东大会审议批准。

　　 二、被担保人基本情况

　　 公司名称：唐山三友氯碱有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：刘宝东

　　 注册资本：69，964.04万元

　　 主营业务：烧碱、聚氯乙烯树脂等产品的生产与销售

　　 本公司持股比例：95.07%

　　 财务状况：截止2015年底，资产总额277，951.08万元，净资产149，433.56 万元，资产负债率46.24%。

　　 公司名称：唐山三友硅业有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：李建渊

　　 注册资本：50，969.33万元

　　 主营业务：混合甲基环硅氧烷及其下游产品的生产和销售

　　 本公司持股比例：95.29%，其余股份由氯碱公司持有。

　　 财务状况：截止2015年底，资产总额194，939.92万元，净资产63，623.46万元，资产负债率67.36%。

　　 公司名称：唐山三友热电有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：马连明

　　 注册资本：23，893.80万元

　　 主营业务：火力发电、热力生产

　　 本公司持股比例：100%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产167，186.28万元；净资产77，059.94万元，资产负债率53.91%。

　　 公司名称：唐山三友集团兴达化纤有限公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：陈学江

　　 主营业务：粘胶短纤的生产和销售

　　 本公司持股比例：100%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产555，370.62万元；净资产208，774.12万元，资产负债率62.41%。

　　 （五）青海五彩碱业

　　 公司名称：青海五彩碱业有限公司

　　 注册地：青海省海西州

　　 法定代表人：张建敏

　　 注册资本：74，500.00万元

　　 主营业务：纯碱的生产与销售

　　 本公司持股比例：51%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产326，504.84万元；净资产68，627.59万元，资产负债率78.98%。

　　 公司名称：唐山三友集团香港国际贸易有限公司

　　 注册地：中国香港

　　 法定代表人：郑晓晨（执行董事）

　　 注册资本：2，472.00万元（人民币）

　　 主营业务：进出口贸易，如技术、设备进出口业务，海外投资、并购、设厂等相关投资

　　 本公司持股比例：100%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产121，103.79万元；净资产-1，416.09万元，资产负债率101.17%。

　　 公司名称：港裕（上海）国际贸易有限公司

　　 注册地：上海自由贸易试验区

　　 法定代表人：郑晓晨

　　 注册资本：100 万美元

　　 主营业务： 国内外贸易及代理

　　 本公司持股比例：通过控股子公司唐山三友集团香港国际贸易有限公司间接持股 100%。

　　 财务状况：截止2015年底，总资产788.37 万元；净资产632.08万元，资产负债率19.83%。

　　 公司名称：唐山三友物流有限公司

　　 注册地： 唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：黄银龙

　　 注册资本：6，600.00万元

　　 主营业务：货物运输、国内、国际货运代理

　　 本公司持股比例：100%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产16，294.85 万元；净资产9，601.06万元，资产负债率41.08%。

　　 经公司董事会认真审议，认为被担保方均为公司的全资及控股子公司，均具有足够偿还债务的能力，公司能控制其经营和财务，不存在担保风险，也不会损害公司及全体股东的利益，同意为其提供担保。

　　 四、独立董事意见

　　 我们认为，公司对外担保严格遵守了有关法律、法规和《公司章程》的有关规定，担保的程序合法、有效，并及时履行了相关的信息披露义务，没有损害公司、公司股东尤其是中小股股东的利益。

　　 五、对外担保累计金额及逾期担保的累计金额

　　 截至2015年12月31日，公司为子公司提供担保余额25.89亿元，占公司2015年底经审计净资产的38%。除对子公司担保外，公司无对外担保，无逾期担保。

　　 六、备查文件目录

　　 1、六届六次董事会决议；

　　 2、独立董事的独立意见。

　　 唐山三友化工股份有限公司董事会

　　 证券代码：600409证券简称：三友化工公告编号：临号

　　 唐山三友化工股份有限公司

　　 关于2016年度为子公司提供委托贷款的公告

　　 本公司董事会及全体董事保证本公告内容不存在任何虚假记载、误导性陈述或者重大遗漏，并对其内容的真实性、准确性和完整性承担个别及连带责任。

　　 ● 委托贷款对象：唐山三友远达纤维有限公司、唐山三友热电有限责任公司、唐山三友硅业有限责任公司、唐山三友矿山有限公司、唐山三友物流有限公司、青海五彩碱业有限公司、唐山三友集团兴达化纤有限公司、唐山三友氯碱有限责任公司

　　 ● 委托贷款金额：总额不超过5.75亿元人民币

　　 ● 委托贷款期限：一年

　　 ● 贷款利率：不低于同期中国人民银行公布的基准贷款利率

　　 一、委托贷款概述

为有效支持子公司发展，保证子公司生产经营资金需求，提高公司资金使用效率，降低融资成本，2016年度公司拟以自有资金向全资及控股子公司提供总额不超过5.75亿元人民币的委托贷款，包含到期续贷及新增金额，委托贷款利率不低于同期中国人民银行公布的基准贷款利率，期限一年。并授权公司管理层办理委托贷款相关手续，包括但不限于确定向各子公司提供委托贷款的额度、利率以及选择委托贷款银行、签订有关协议等。2016年度拟为子公司提供委托贷款明细如下：

　　 单位：人民币万元

　　 上述事项已经公司六届六次董事会审议通过，尚需提交股东大会审议批准。

　　 上述委托贷款不构成关联交易。

　　 二、借款方基本情况

　　 （一）公司名称：唐山三友远达纤维有限公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：陈学江

　　 注册资本：120，000万元

　　 主营业务：粘胶短纤的生产和销售

　　 本公司持股比例：间接持股100%

　　 （二）公司名称：唐山三友热电有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：马连明

　　 注册资本：23，893.80万元

　　 主营业务：火力发电、热力生产

　　 本公司持股比例：100%

　　 （三）公司名称：唐山三友硅业有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：李建渊

　　 注册资本：50，969.33万元

　　 主营业务：混合甲基环硅氧烷及其下游产品的生产和销售

　　 本公司持股比例：95.29%，其余股份由氯碱公司持有。

　　 （四）公司名称：唐山三友矿山有限公司

　　 注册地：河北省唐山市古冶区赵各庄西

　　 法定代表人：周金柱

　　 注册资本：13，969万元

　　 主营业务：矿石产品的生产和销售

　　 本公司持股比例：100.00%

　　 财务状况：截止2015年底，资产总额54，132.57万元，净资产25，449.75万元。2015年营业收入25，214.74万元，净利润314.20万元。

　　 （五）公司名称：唐山三友物流有限公司

　　 注册地： 唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：黄银龙

　　 注册资本：6，600万元

　　 主营业务：货物运输、国内、国际货运代理

　　 本公司持股比例：100%

　　 财务状况：截止2015年底，总资产16，294.85万元；净资产9，601.06万元。2015年营业收入29，763.43万元，净利润1199.54万元。

　　 （六）公司名称：青海五彩碱业有限公司

　　 注册地：青海省海西州

　　 法定代表人：张建敏

　　 注册资本：74，500.00万元

　　 主营业务：纯碱的生产与销售

　　 本公司持股比例：51%

　　 （七）公司名称：唐山三友氯碱有限责任公司

　　 注册地：唐山市南堡开发区

　　 法定代表人：刘宝东

　　 注册资本：69，964.04万元

　　 主营业务：烧碱、聚氯乙烯树脂等产品的生产与销售

　　 本公司持股比例：95.07%

　　 三、委托贷款的资金来源

　　 全部为公司自有资金。

　　 四、委托贷款对公司的影响

　　 公司利用自有资金为子公司提供委托贷款，有利于提高公司资金使用效率，降低融资成本，同时可以有效支持子公司发展，保证子公司生产经营等资金需求，不会影响公司正常的经营运转，不会损害公司及其他股东的利益。

　　 五、上市公司累计对外提供委托贷款金额及逾期金额

　　 截止2015年底，公司为子公司提供的委托贷款余额为11.35亿元，除此之外，无对外提供委托贷款，不存在委托贷款逾期情形。

　　 唐山三友化工股份有限公司董事会

　　 证券代码：600409证券简称：三友化工公告编号：临号

　　 唐山三友化工股份有限公司

　　 六届六次监事会决议公告

　　 本公司监事会及全体监事保证本公告内容不存在任何虚假记载、误导性陈述或者重大遗漏，并对其内容的真实性、准确性和完整性承担个别及连带责任。

　　 唐山三友化工股份有限公司召开六届六次监事会的会议通知已于2016年3月18日向全体监事以电子邮件、专人送达的形式发出，本次会议于2016年3月29日在公司所在地会议室以现场会议的方式召开。应出席监事7人，亲自出席监事7人，会议符合《公司法》、《公司章程》的有关规定，合法有效。

　　 经与会监事认真审议，通过了以下各项议案：

　　 一、审议通过了《2015年年度报告全文及摘要》。同意票7票，反对票0票，弃权票0票。

　　 1、公司2015年年度报告编制和审议程序符合法律、法规、《公司章程》和公司内部管理制度的各项规定；

　　 2、2015年年度报告的内容和格式符合中国证监会和上海证券交易所的各项规定，所包含的信息全面真实地反映了公司本年度的经营成果和财务状况等事项；

　　 3、在提出本意见前，未发现参与2015年年度报告编制和审议的人员有违反保密规定的行为。

　　 该报告尚需提交年度股东大会审议。

　　 二、审议通过了《2015年度内部控制评价报告》。同意票7票，反对票0票，弃权票0票。

　　 监事会认为，《2015年度内部控制评价报告》真实、客观地反映了公司内部控制的实际情况。公司现有的内部控制制度符合财政部、中国证监会和上海证券交易所相关法律法规的要求，不存在重大、重要缺陷，符合当前公司生产经营实际情况，有效提升了公司管理水平和风险防范能力，合理保证了公司经营管理合法合规、资产安全、财务报告及相关信息真实完整。

　　 三、审议通过了《关于2015年度各项资产处置损失的议案》。同意票7票，反对票0票，弃权票0票。

　　 监事会认为，公司对2015年度各项资产损失的处置，符合公司实际情况，符合《企业会计制度》、相关《企业会计准则》及其它有关规定，程序合法，依据充分。

　　 四、审议通过了《2015年度监事会工作报告》，同意票7票，反对票0票，弃权票0票。

　　 该议案尚需提交年度股东大会审议。

　　 五、审议通过了《关于在公司领薪的监事考核情况的议案》。监事周金柱先生、史岭珠先生、钱晓明先生、董维成先生、刘宝东先生、张兆云先生回避表决。同意票1票，反对票0票，弃权票0票。

　　 该议案尚需提交年度股东大会审议。

　　 唐山三友化工股份有限公司

　　 公司代码：600409公司简称：三友化工

　　 唐山三友化工股份有限公司

1.本发明涉及微生物及发酵工程技术领域，尤其是一种发酵生产腺嘌呤的方法。

2.腺嘌呤又称6-氨基嘌呤，是脱氧核糖核酸(dna)和核糖核酸(rna)中的一种碱基，缩写为a。在脱氧核糖核酸中，它与胸腺嘧啶(t)配对。在核糖核酸中，它与尿嘧啶(u)配对。旧称维生素b4。腺嘌呤在生物化学上也具有许多不同的功用。于细胞呼吸中，是以富有能量的腺苷三磷酸(atp)，以及辅因子chemicalbook烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)、黄素腺嘌呤二核苷酸(fad)等形式发生作用；在蛋白质生物合成过程里作为dna与rna的组成物。目前腺嘌呤的生产方法是通过酶解腺苷生产腺嘌呤，利用此方法生产腺嘌呤会产生大量的d-核糖，对后期腺嘌呤的提取造成极大的困难。

3.本发明所要解决的技术问题在于提供一种发酵生产腺嘌呤的方法。
4.为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：
5.一种发酵生产腺嘌呤的方法，分别培养腺苷水解酶工程菌bl21-adh与腺苷枯草芽孢杆生产菌xgl，并用超声对bl21-adh发酵液进行超声处理，最后在枯草芽孢杆菌xgl发酵至中后期时混合经超声处理的bl21-adh培养液，使枯草芽孢杆菌xgl发酵生产的腺苷转化为腺嘌呤，并分别在混合培养之后分两阶段分别进行两次膜透析操作，使透析液排出、浓缩菌体回流至罐中继续发酵，并分别在其透析后补加60％枯草芽孢杆菌xgl发酵培养基，使其继续发酵生产。
6.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述bl21-adh培养4h时添加诱导剂iptg，之后培养至10h时进行超声处理。
7.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述枯草芽孢杆菌xgl的具体培养步骤如下：
8.(1)菌种活化：将枯草芽孢杆菌xgl从甘油保菌管中接入斜面培养基中进行活化培养(活化两代)，温度维持在34℃；
9.(2)种子培养：将无菌水(200ml左右)于超净台火焰附近倒入茄形瓶中，使用接种环将菌落刮至无菌水中并打散制备菌悬液，在发酵罐火圈旁将菌悬液接种入发酵种子培养罐中，培养过程ph维持在6.7-7.0，温度维持在34℃，溶氧维持在35-50％；
10.(3)发酵培养：按20％的接种量将种子液接种至发酵培养基中进行发酵培养，发酵初期ph维持在6.7-7.0，发酵中后期(菌体od生长缓慢)发酵ph维持在6.4-6.7，温度维持在34℃，溶氧维持在30％-50％，培养过程中通过流加80％(m/v)葡萄糖溶液维持发酵过程；
11.(4)营养物流加：发酵培养10h开始以0.3g/l/h的速率流加营养物(流加用量300ml，发酵过程中使用蠕动泵匀速流加，流加速率0.3g/l/h)，流加营养物的成分为：v
12.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述斜面培养基成分及含量为：葡萄糖2g/l，牛肉膏10g/l，氯化钠2.5g/l，蛋白胨10g/l，酵母粉2g/l，琼脂粉25g/l，黄嘌呤50mg/l，组氨酸50mg/l；所述种子培养基为：葡萄糖30g/l，酵母粉8g/l，mgso4·
7h2o 0.6mg/l，消泡剂1g/l，各成分称量固体后溶解于1l水中，在4℃保存。
13.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述消泡剂为有机硅类消泡剂(defoamer消泡剂)。
14.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，当枯草芽孢杆菌xgl培养至10h时开始流加营养物(流加用量300ml，发酵过程中使用蠕动泵匀速流加，流加速率0.3g/l/h)。
15.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述bl21-adh的具体培养步骤如下：
16.(1)菌种活化：将bl21-adh从甘油保菌管中接入斜面培养基中进行活化培养(活化两代)，温度维持在37℃；
17.(2)菌体培养：将无菌水(200ml左右)于超净台火焰附近倒入上述茄形瓶中，使用接种环将菌落刮至无菌水中并打散制备菌悬液，在发酵罐火圈旁将菌悬液接种入发酵种子培养罐中，培养过程ph维持在6.7-7.0，温度维持在37℃，溶氧维持在35-50％，培养过程中通过流加80％(m/v)葡萄糖溶液维持发酵过程；
18.(3)诱导剂添加：在菌体量培养至4h时添加诱导剂iptg，诱导腺苷水解酶的表达，iptg按0.1mmol/l添加；
19.(4)bl21-adh发酵液超声处理：选用功率为300w，频率为25khz的超声棒对菌体进行处理。
20.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述步骤(4)中超声处理的工作方式为：工作7min，间歇3s，期间温度控制在4℃，并将处理完的菌液于4℃罐中保存，直至整体发酵结束。
21.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述斜面培养基成分为：葡萄糖2g/l，牛肉膏10g/l，氯化钠2.5g/l，蛋白胨10g/l，酵母粉2g/l，琼脂粉25g/l；所述菌体培养的培养基成分为：葡萄糖30g/l，酵母粉8g/l，蛋白胨4g/l，(nh4)2so
22.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，混和透析发酵培养的步骤及条件为；对枯草芽孢杆菌xgl进行发酵培养后进行三次混合操作，之后再进行两次透析操作，混和培养发酵期间ph维持在6.7-7.0(通过流加氨水进行ph调节)，溶氧维持在40％-60％，温度维持在36℃。
23.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述三次bl21-adh的混合时间分别选择为枯草芽孢杆菌xgl发酵生产的30h、50h、70h；35h、55h、75h；或40h、60h、80h。进一步优选为35、55、75h。
24.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述两次膜透析时间分别选择为枯草芽孢杆菌发酵35h、55h；40h、60h；45h、65h；50h、70h。进一步优选为枯草芽孢杆菌发酵45h、65h。
25.优选的，上述发酵生产腺嘌呤的方法，所述三次的混合比例(枯草芽孢杆菌xgl发酵体系的百分比比例)分别选择为：10％、5％、3％；15％、10％、5％；或20％、15％、10％。进一步优选为15％、10％、5％。
27.本发明所述发酵生产腺嘌呤的方法，通过营养物流加提高了枯草芽孢杆菌xgl发酵中后期的菌种活力以及其腺苷生产能力，通过对bl21-adh的诱导培养使其生产高活力的腺苷水解酶，在经超声处理之后的bl21-adh菌液保留了腺苷水解酶的活性，温度降至4℃，能极大地保存腺苷水解酶现有的活性，最后将其以不同的比例混合至不同发酵时间的枯草芽孢杆菌xgl中；在后期的混合培养过程中，高活力的腺苷水解酶以枯草芽孢杆菌xgl发酵生产的腺苷为原料，并且破碎的菌体能作为营养丰富的营养物，使发酵后期的菌体发酵生产潜能得到进一步提高；腺苷经腺苷水解酶分解生成腺嘌呤和d-核糖，d-核糖作为重要的五碳单糖，能被直接菌体利用，降低了糖的消耗，并且d-核糖还是核糖核酸(rna)、atp的重要组成物质，能在一定程度上提高菌体的活力；并且在发酵的一定时间对发酵液进行透析处理，并补充一定量的新鲜培养液，使菌体的生长环境得到了净化，解除了终产物对菌体的反馈抑制，更有利于菌体的生长及产物的生成。
28.上述方法采用混菌发酵法生产腺嘌呤能使腺苷酶解之后产生的d-核糖被菌体重新利用，既降低了混菌之后糖的消耗，同时也降低了腺嘌呤后期的提取难度，同时经超声处理的bl21-adh菌体培养液不但能保留其腺苷水解酶的活性，而且超声破碎之后的菌液营养丰富，还能进一步的提高发酵后期枯草芽孢杆菌xgl的菌体活力，同时通过透析发酵的方法，对后期菌液进行透析，净化菌体的生存环境同时解除终产物对菌体的反馈抑制。
29.下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。
31.一种发酵生产腺嘌呤的方法，具体步骤如下：
32.一、枯草芽孢杆菌xgl培养
33.(1)菌种活化：将枯草芽孢杆菌xgl从甘油保菌管中接入斜面培养基中进行活化培养(活化两代)，温度维持在34℃；所述斜面培养基成分及含量为：葡萄糖2g/l，牛肉膏10g/l，氯化钠2.5g/l，蛋白胨10g/l，酵母粉2g/l，琼脂粉25g/l，黄嘌呤50mg/l，组氨酸50mg/l；
34.(2)种子培养(2l)：将200ml左右无菌水于超净台火焰附近倒入上述茄形瓶中，使用接种环将菌落刮至无菌水中并打散制备菌悬液，在发酵罐火圈旁将菌悬液接种入发酵种子培养罐中，培养过程ph维持在6.7-7.0左右，温度维持在34℃，溶氧维持在35-50％之间；所述种子培养基为：葡萄糖30g/l，酵母粉8g/l，mgso4·
35.(3)发酵培养(3l)：按20％的接种量将种子液接种至发酵培养基中进行发酵培养，发酵初期ph维持在6.7-7.0，发酵中后期(菌体od生长缓慢)发酵ph维持在6.4-6.7，温度维持在34℃，溶氧维持在30-50％之间，所述发酵培养基成分为：葡萄糖30g/l，味精12g/l，酵母粉10g/l，kh2po4·
36.(4)营养物流加(300ml)：发酵培养10h开始以0.3g/l/h的速率流加营养物，所述流加营养物的成分为：vb1、vb3、vb5、vb
38.(1)菌种活化：将bl21-adh从甘油保菌管中接入斜面培养基中进行活化培养(活化两代)，温度维持在37℃左右；所述斜面培养基成分为：葡萄糖2g/l，牛肉膏10g/l，氯化钠2.5g/l，蛋白胨10g/l，酵母粉2g/l，琼脂粉25g/l。
39.(2)菌体诱导培养(2l)：用200ml将茄形瓶中的菌体进行重悬，并接进种子罐子，培养过程ph维持在6.7-7.0，温度维持在37℃，溶氧维持在35-50％之间。所述菌体培养的培养基成分为：葡萄糖30g/l，酵母粉8g/l，蛋白胨4g/l，(nh4)2so
40.(3)诱导剂添加：在菌体培养至4h时添加诱导剂iptg，诱导腺苷水解酶的表达，iptg按0.1mmol/l添加。
41.(4)发酵液超声处理：bl21-adh发酵液超声处理：选用功率为300w，频率为25khz的超声棒对菌体进行处理，特别的，工其作方式为：工作7min，间歇3s，期间温度控制在4℃，并将处理完的菌液于4℃罐中保存备用，直至整体发酵结束。
42.三、混合发酵培养
43.枯草芽孢杆菌xgl发酵培养至一定时间时混合一定量的经超声处理的bl21-adh菌体培养液，本次实验选择枯草芽孢杆菌发酵至30h、50h和70h时进行三次混合操作，三次混合比例分别按枯草芽孢杆菌xgl发酵体系的10％、5％、3％的比例进行混合操作，并分别在发酵培养至35h、55h时，进行两次透析操作，混和培养发酵期间ph维持在6.4-6.6(通过流加氨水进行ph调节)，溶氧维持在40％-60％，温度维持在36℃。
44.发酵85h放罐时，总腺苷量为146g；总腺嘌呤产量为41g；总d-核糖产量为0g。
46.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间分别选择为35h、55h和75h；
47.发酵85h放罐时，总腺苷量为132g：总腺嘌呤产量为47g：总d-核糖产量为0g。
49.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间
50.发酵85h放罐时，总腺苷量为138g：总腺嘌呤产量为45g：总d-核糖产量为0g。
52.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间分别选择为35h、55h和75h，三次混合操作的混合比例分别选择为枯草芽孢杆菌发酵体系的15％、10％、5％；
53.发酵85h放罐时，总腺苷量为56g：总腺嘌呤产量为86g：总d-核糖产量为0g。
55.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间分别选择为35h、55h、75h，三次混合操作的混合比例分别选择为枯草芽孢杆菌发酵体系的20％、15％、10％；
56.发酵85h放罐时，总腺苷量为57g：总腺嘌呤产量为85g：总d-核糖产量为0g。
58.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间分别选择为35h、55h和75h，三次混合操作的混合比例分别选择为枯草芽孢杆菌发酵体系的15％、10％、5％，发酵透析操作分别选择为枯草芽孢杆菌发酵培养至45h、65h时；
59.发酵85h放罐时，总腺苷量为0g：总腺嘌呤产量为110g：总d-核糖产量为0g。
61.一种发酵生产腺嘌呤的方法，参照实施例1，不同之处在于：三次混合操作的时间分别选择为35h、55h和75h，三次混合操作的混合比例分别选择为枯草芽孢杆菌发酵体系的15％、10％、5％，发酵透析操作分别选择为枯草芽孢杆菌发酵培养至50h、70h时；
62.发酵85h放罐时，总腺苷量为107g；总腺嘌呤产量为0g；总d-核糖产量为0g。
64.腺嘌呤的产量、腺苷的积累、副产物d-核糖的积累与混合的时间及混合的比例有关，具体数据如表1所示；
65.表1实施例结果汇总
综上所述，混合时间、混合比例以及透析时间的选择对腺嘌呤的产量和腺苷的剩余影响较大；结果显示，混合比例的选择对副产物腺苷转化至关重要，混合量过少，腺苷不能充分的转化，之后的膜透析操作会使腺苷与已转化的腺嘌呤同时离开发酵体系，造成整
体腺苷的积累，过多又会造成腺苷水解酶活性的浪费，同时产量也不能得到充分提升；透析是在前两次混合操作之后一定时间内进行的，透析时间过早，腺苷不能充分转化，会在透析过程中离开发酵体系造成腺苷的积累；混菌时间也会对腺嘌呤产量造成一定的影响，混合时间过早，腺苷产量较少，虽然也能生成腺嘌呤，但腺嘌呤生成较少，实用价值较小。
由上述实施例的结果可知，本发明提供的腺嘌呤发酵方法，减少了腺苷的提取过程，减少了糖的消耗，提高了发酵中后期菌体的活力和利用率，减少了副产物d-核糖的产生，提高了发酵产物的总产量，较现有的酶催化法生产工艺，具有污染小、操作简单、转化率高等优点。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，本发明菌株的构建步骤不分先后顺序，本技术领域技术人员以本发明的方法或以本方法为基础进行的菌种改造等改进和润饰均视为本发明的保护范围。