尿素酶试验 -
尿素酶（Urease）试验
　　有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适pH为7.0。
　　试验方法：18~24h待试菌培养物大量接种于基管中，摇均，于36&1℃培养10，60和120min，分别观察结果。或涂布并穿刺接种于，不要到达底部，留底部作变色对照。培养2，4和24h分别观察结果，如阴性应继续培养至4天，作最终判定，变为粉红色为阳性。快速尿素酶试验　　临床上用以测定胃部（通常为胃窦、胃体）活检组织中的尿素酶的定性试验。是诊断消化道幽门螺杆菌感染的重要诊断指标。需要在胃镜下取胃粘膜组织后进行，是侵入性检测幽门螺杆菌的首选方法，具有操作简便、费用低的优点。　
　　1984年科学家发现幽门螺杆菌一个重要特征是能够产生释放大量的尿素酶，其尿素酶的酶活性是目前已知细菌所产尿素酶活性中最高的。尿素酶对幽门螺杆菌自身具有保护作用，它能水解尿素，生成氨气和二氧化碳，氨气能在幽门螺杆菌体周围形成保护性“氨云”，中和胃酸，是局部的pH升高，便于细菌定植致病。根据这一原理，Marshall等人设计了快速尿素酶试验用于诊断幽门螺杆菌感染。　检验试剂中含尿素、pH指示剂、防腐剂和缓冲剂，可制成试液、琼脂和纸片等。活检取样通常在胃窦，为提高敏感性亦可在胃体夹取一块组织，标本放置于世纪后观察颜色变化，判断结果，时间在30分钟至24小时之间，视试剂性能而定。pH指示剂在酸性条件下，酚红呈黄褐色，若试剂颜色由黄褐色变成红色或紫红色，判为阳性，若不变则判为阴性。此法特别适合在基层单位开展，准确定达90%以上，是目前临床上最常用的诊断方法。
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判断题尿素酶试验原理是有些细菌能产生尿酶分解尿素产生氨，使培养基呈碱性，从而通过酚红指示剂变为红色。 参考答案对
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Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验诊断幽门螺杆菌感染的应用价值
作者：李炳琳　朱瑞龙　曹福娟　沈伟忠
【关键词】& 幽门螺杆菌
&&& 【摘要】& 目的& 本文回顾分析Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验对Hp诊断的意义。方法& 对571例胃镜受检患者用快速尿素酶试验作Hp检测，对391例胃镜受检患者用14C-尿素呼吸试验作Hp检测，以组织学检查结果作为“金标准”对照。结果& 显示Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验的敏感性分别为91.5%、95.3%；特异性分别为87.7%、91.0%；阳性预测值分别为96.8%、94.1%；阴性预测值分别为95.3%、92.8%。结论& Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验均为Hp诊断的常用方法，两者敏感性的比较差异无显著性（P＞0.05），而特异性的比较差异有显著性（P＜0. 05）。
　　【关键词】& 幽门螺杆菌；Hp快速尿素酶试验；14C-尿素呼吸试验
&&& 随着幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）及其相关疾病的研究进展，对幽门螺杆菌的检测手段也在不断发展，我们回顾分析571例Hp快速尿素酶试验及391例14C-尿素呼吸试验，两组均以组织学检查结果作为“金标准”对照。探讨两种检查方法在诊断Hp感染的应用价值。
　　1& 材料与方法
　　1.1& 对象& A组，为因消化系症状而行胃镜检查者571例，男318例，女253例；年龄为16～82岁。胃镜检查时取胃窦活检标本3份，1份用于Hp快速尿素酶试验，另2份送组织学检查。B组，为因消化系症状而行胃镜检查者391例，男223例，女168例；年龄为15～86岁。胃镜检查取胃窦活检标本2份送组织学检查。胃镜检查前1h作14C-尿素呼吸试验。
　　1.2& 方法
　　1.2.1& 组织学检查-Hp感染诊断“金标准”& 胃窦活检标本用10%甲醛溶液固定后，常规病理切片，用Giemsa染色，组织学检查阳性，定为Hp阳性。
　　1.2.2& Hp快速尿素酶试验（Hp RUT）& 快速尿素酶试剂由上海惠泰医疗科技公司提供，取活检标本一块放入试剂盒中，观察30′，试剂变红色，定为Hp阳性。
　　1.2.3& 14C-尿素呼吸试验（14C-UBT）& 试剂及液烁仪均由深圳市中核海得威生物科技有限公司提供，受检者在服尿素｛14C｝胶囊1粒，静坐25min，受试者通过导管向CO2集气瓶吹气(约1～3min)，气体样品收集完毕，向样品瓶内加入稀释闪烁液4.5ml，加盖密封，在液闪仪上做样品碳14C放射性测定2min，按公式计算结果。阳性判断值：14C-UBT≥100dpm/mmol CO2时，可判定受试者为Hp阳性。
　　1.3& 统计学方法& 采用t检验。
　　2& 结果
　　2.1& 快速尿素酶试验结果与组织学诊断Hp感染结果比较& Hp RUT诊断Hp感染的敏感性为96.5%（组织学诊断阳性318例中，Hp RUT阳性307例）；特异性为87.7%（组织学诊断阴性253例中，Hp RUT阴性222例）；阳性预测值为91.8%（Hp RUT阳性338例中，组织学诊断阳性307例）；阴性预测值为95.3%（Hp RUT阴性233例中，组织学诊断阴性222例）。
　　2.2& 14C-尿素呼吸试验结果与组织学诊断Hp感染结果比较& 14C -UBT诊断Hp感染的敏感性为95.3%（组织学诊断阳性236例中，14C -UBT阳性225例）；特异性为91.0%（组织学诊断阴性155例中，14C -UBT阴性141例）；阳性预测值为94.1%（14C -UBT阳性239例中，组织学诊断阳性225例）；阴性预测值为92.8%（14C -UBT阴性152例中，“组织学诊断”阴性141例）。
　　2.3& Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验敏感性、特异性比较& 见表1。
　　表1& Hp快速尿素酶试验及14C-尿素呼吸试验　略
　　3& 讨论
　　幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种定植于人体胃黏膜，并引起不同胃十二指肠疾病的革兰阴性细菌。幽门螺杆菌感染可引起慢性胃炎、胃十二指肠溃疡，研究结果表明，Hp(+)患者胃窦部炎症活动性显著重于Hp(-)患者［1］。业已证实幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎的主要病因，也是两种疑为癌前病变萎缩性胃炎、肠上皮化生的重要病因和促进因素［2］。众多回顾性与前瞻性的流行病学研究显示，幽门螺杆菌感染与胃癌发生相关。幽门螺杆菌于1994年被世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)列为人类Ⅰ类致癌原［1］。
　　幽门螺杆菌感染的诊断方法较多，胃活检组织培养法是公认的金标准，但由于培养条件与技术要求高，限制了该方法在临床与科研中的应用［3］。常用胃镜下活检，组织切片观察Hp作为诊断的组织学诊断，认为其特异性高达100%，敏感性稍低。近十余年在非侵入检测幽门螺杆菌感染方面有较多的方法，例：血清学检查用ELISA方法检测抗体、14C-尿素呼吸试验，聚合酶链反应试验(PCR)，粪便抗原试验等。
　　基于胃镜活检的诊断方法中快速尿素酶试验可在短时间内得到结果，此项检测方法快速经济，文献报道敏感性为93%～97%，特异性可达98%［3］，但在使用铋剂、抗生素后易致假阴性［1］。本文资料示Hp快速尿素酶试验特异性较低，低于文献报道。
　　14C-尿素呼吸试验是一项无创伤性检测方法，以其简便易行、准确性高、重复性好的优点［4］，在监测抗Hp治疗后Hp复发或再感染上具有极其重要的临床应用价值，但在使用铋剂、抗生素后易致假阴性［1］。本文资料中14C-尿素呼吸试验的敏感性及特异性均低于文献报道。
　　我们对Hp快速尿素酶试验、14C-尿素呼吸试验两项监测方法作了比较，敏感性两者比较差异无显著性（P＞0.05），而特异性两者比较差异有显著性（P＜0.05)。
　　已明确根除幽门螺杆菌能明显改善急性和慢性活动性胃黏膜的炎症，恢复胃分泌功能，并促进受损细胞凋亡［5］，因此，幽门螺杆菌感染治疗后的检测显得十分重要，非侵入性的检查―14C-尿素呼吸试验也许有较大的应用空间。
　　【参考文献】
　　1& 刘文忠.幽门螺杆菌感染的诊断方法，幽门螺杆菌研究进展.上海：上海科学技术文献出版社，8，329-344.
　　2& Fontham EJ,Ruiz b,Perez a,et al.Determinants of heucobacter pylori infection and chronic gostritis.Am J Gastroenterol,4-1101.
　　3& Hyde DK，Lee J，Buckley M，et al. Evaluation of antral biopsies used in the rapid urease test for Helicobacter pylori culture.& Eur J Clin Microbiol Infect Dis，-75.
　　4& van de Wouw BA，deBoer WA，Hemsen HW，et al. Usefulness of the 14& C-urea breath teat as a semi-quantitative monitoring instrument after therapy for Helicobacter pylori infection. Scand J Gastroenterol,-117.
　　5& Savarino V,Mela GS,Zentilin P,et al.Histological and functional recovery in patients with multifocal atrophic after eradication of Helicobacter pylori infection.Ital J Gaotroenterol Hepatol,-8.
　　作者单位： 201908& 上海，上海市宝山区罗店医院内科
　　(编辑：秋& 实)
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