PCR用的目的基因的检测模板是线性的还是环状...

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... 质粒制备绝对定量 PCR 标准曲线方法的建立 李丽赵成萍李宏李武峰张利环许冬梅王金胜李慧锋 *山西农业大学生命科学学院, 太谷030801 * 通讯作者, LIHUIFENGTOM@YAHOO.COM.CN摘要用质粒制备绝对定量 PCR 标准曲线存在着作为标准品的双链环状质粒分子与待测样品单链 ...
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质粒制备绝对定量PCR 标准曲线方法的建立
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求助一个转化的问题,是不是只有环状的质粒能转化进感受态细胞,并能筛选出来,线性的DNA能转化吗,能筛选出来吗,求解答,谢谢……
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我认为,环状质粒,开环质粒,还有线性DNA都是可以被转化进感受态细胞的,但要想线性DNA被筛选出来,该线性DNA在细胞中要具备容易成环的能力(复制需要)而且应该具备相应抗性,线性DNA转化并被筛选出来的典型例子就是用DpnI 法进行定点突变并筛选
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yanlichong 发表于
我认为,环状质粒,开环质粒,还有线性DNA都是可以被转化进感受态细胞的,但要想线性DNA被筛选出来,该线性 ...
哦,那就是说不是什么线性DNA都能转化筛选出来的,谢谢!
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yanlichong 发表于
我认为,环状质粒,开环质粒,还有线性DNA都是可以被转化进感受态细胞的,但要想线性DNA被筛选出来,该线性 ...
DPNI酶切的是模板质粒,突变后的质粒仍然是环状的啊。。。
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无花果 发表于
DPNI酶切的是模板质粒,突变后的质粒仍然是环状的啊。。。
可以形成环状,但这个环的两条链上都有切口,也很容易形成线性,这个是概率问题
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<font color="#4050313 发表于
哦,那就是说不是什么线性DNA都能转化筛选出来的,谢谢!
是这样子的,要想效率高,最好在转化之前对其进行环化
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yanlichong 发表于
是这样子的,要想效率高,最好在转化之前对其进行环化
我是这样认为的,突变那个还是环状的转进去了,要是线性的能转进去的话,模板质粒也会转进去,这样就起不到筛选的目的的,好像线状DNA能进入细胞的报道还是关于枯草芽孢杆菌的。。。
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无花果 发表于
我是这样认为的,突变那个还是环状的转进去了,要是线性的能转进去的话,模板质粒也会转进去,这样就起不 ...
模板质粒由于存在甲基化已经被DpnI降解了,如果还是环状的话,那就不好筛选了
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