电镀蓝白斑筛选 假阳性锌有白斑

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2011-09-30 08:36 标签： 蓝白斑筛选 假阳性
蓝白斑筛选作转化时，出现的全部是白斑，没有一个蓝斑(白斑,蓝白斑筛选,假阳性)
23:32:47&&&来源：&&&评论：&&
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为什么用蓝白斑筛选作转化时，出现的全部是白斑，没有一个蓝斑，根本没有起到筛选的作用。假阳性太高了！请教高手指点。
回复我觉得你该做个对照，一般盒中不是有对照的质粒吗？对照一下你的转化效率再分析。回复正如楼上所说，我觉得有几点要注意：1、首先，你要确定有没有作蓝白筛选的基础，即载体上有没有lacZ基因；2、确定有了后，作实验时应作对照，正如楼上所说，有对照质粒更好，如果没有，可以用以前确定好的有蓝白斑菌株作对照，以便确定是不是的问题，因为X-gal见光分解，注意保存方法；回复筛选试剂好的话，一般的都是片断纯化不干净，导致有个别的小片断插入，出现白斑。（可以直接测序看看）回复多谢！回复菌落PCR筛一下吧，没准全是阳性呢
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45#钢淬火热处理后镀蓝白锌，外露面光亮整洁，盲孔，过孔，内壁有白斑(类似氧化后的
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45#钢淬火热处理后镀蓝白锌，外露面光亮整洁，盲孔，过孔，内壁有白斑(类似氧化后的白锈)， 产品料厚T=1.5mm
请教各位大大协助分析，是何原因造成，是电镀原因，还是热处理原因.
热处理后表面挺干净,电镀是滚镀，是否跟电镀前处理药水有关？或跟电镀中水洗过程有关?请各位有经验的大大帮忙，万分感谢！
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如果没有伤及锌层，可能是清洗水太脏，烘干后粘在上面的脏污。如果伤及锌层，则可能是清洗及烘干不彻底，再加后期储存不当，造成白锈生成；另外你的外观看上去是彩锌，不像是蓝白！
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是蓝白锌。
有伤及锌层，也就是说，热处理不会造成此不良的产生，重点还是要把握好镀锌环节的工艺吗?
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难道没有人碰到类似问题?
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从照片上看，我认为是基体的问题，基体表面有孔隙，盲孔、内壁的除油、酸洗、镀锌和钝化液没有清洗净，造成空隙周围的镀锌层首先腐蚀。
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齿轮箱真麻烦
1、盲孔，过孔内壁清晰（去油、脱脂）不易干净，电镀后易出现灰白斑；
2、盲孔中由于镀液流动性差，不易满足得到镀层金属的补充，也易出现灰白斑。
新手，学习中！
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引用第5楼yxyyyw于 08:32发表的&&:
1、盲孔，过孔内壁清晰（去油、脱脂）不易干净，电镀后易出现灰白斑；
2、盲孔中由于镀液流动性差，不易满足得到镀层金属的补充，也易出现灰白斑。
跟热处理的碳垢(热处理前表面有大量防锈油油污，经过热处理煅烧后产生灰烬，形成碳垢，但用手擦可以擦掉，灰尘一样)有关系吗?
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热处理后表面有氧化皮，镀锌前处理可能没有除干净，而且盲孔内就更难清洗干净了。对于盲孔的产品如果是挂镀，很难镀到位。你可以先试试前处理时间长一些，然后让镀锌厂想办法。如果表面要求不高，可以考虑滚镀。
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引用第7楼wolflyb于 10:40发表的&&:
热处理后表面有氧化皮，镀锌前处理可能没有除干净，而且盲孔内就更难清洗干净了。对于盲孔的产品如果是挂镀，很难镀到位。你可以先试试前处理时间长一些，然后让镀锌厂想办法。如果表面要求不高，可以考虑滚镀。
综合下来，还是热处理前将零件表面清理干净后热处理，再常规电镀，白斑问题解决。
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碱性镀锌材料是45钢锻打件，如何解决电镀后有白斑现象。
三价蓝白钝化+封闭,电镀后48小时内出现白斑现象,我在江苏镇江,
提问者采纳
钝化时间太短，钝化膜太薄，另外钝化前需要出光处理，这样产品会好点
提问者评价
谢谢,这样处理过,不过没太大的效果,
来自团队：
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其他2条回答
你是什么钝化，白斑是什么样的。你在哪里？
说的详细点儿啊，同楼上，另外零件有没有焊接
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出门在外也不愁离问题还有
(共有<span
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&& & &蓝白斑筛选，挑取的白色菌落，放到含Amp的LB液体培养基里面，250转每秒，37度下，都培养了13个小时了，为什么就是不长呢？菌液还是清的呢？谢谢指教！
问题补充:(补充时间: 10:41)
&谢谢这问仁兄，我用白色枪头挑的，枪头直接放到培养基里面，一起培养的。
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提问者： [] [] []
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秀友回答 (9)
会不会是你挑选阳性克隆时，虽然牙签挑取到了，但是你没有转接到培养基中？
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回答者： 一级 一星助者
我也遇到过这个问题，可能跟你的目的基因有关吧。如果基因产物本身有一定毒性，扩大培养时就容易失败。
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回答者： 一级 一星助者
挑了多少克隆？& Amp LB&枪头都换一下试试，一次挑10个摇摇看&
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回答者： 一级 一星助者
注意摇菌时瓶盖不能拧的太紧了,给点气体.
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回答者： 一级 一星助者
以下是我做菌液扩大培养的方法，希望对你能有帮助：
&&& &整个操作都在超净工作台中进行，超净工作台预先紫外灭菌15分钟。将长有蓝白斑的平板及灭过菌的菌液培养管放入超净工作台中，向每个培养管加入3ul的Amp及3ml的LB液体培养基（若LB培养基中已加Amp，则可直接加入管中）。用白枪头挑取白斑后直接打入培养管中，每个样品挑5个斑，尽量挑长在平板中间的、周围有蓝斑生长的的白斑，尽量避免挑的是假阳性。培养管盖盖前用酒精灯撩一下再盖盖。放入培养箱中过夜（大概16h),37度，200转.
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可能转出来的不是目的克隆，假阳性，再转接时就不长了
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回答者： 一级 一星助者
我也碰到相同的问题，不知道楼主后来怎样解决的，还请赐教。
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回答者： 一级 一星助者
楼主好，我现在是和楼主一样的问题，我在含氨苄的LB平板上长的单菌落，为啥挑到含氨苄的LB液体培养基里就不长了呢，固体和液体培养基氨苄的浓度都是50ug/ul,不知道楼主是怎么解决的，热切期待楼主予以指点
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回答者： 一级 一星助者
我也遇到同样的问题 我有几个菌培养不但不长 还死掉了&&有的确长了 &楼主快出来帮我们指点迷津呀！万分感谢》
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