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凝胶电泳技术.ppt
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3秒自动关闭窗口凝胶电泳技术在分离药用蛋白或DNA上的应用 10:6:17&
&&& 据www.qgyyzs.net小编了解，将某种分子放到特殊的电场中，其将会以一定的速度向某个电极的方向运动。某种分子在电场中的移动的速度称为电泳速率，其与电场强度正比，与分子所携带的净电荷量成正比，与分子大小、极性、介质的粘度系数等分子摩擦系数成反比。也就是说，电场强度越大，电泳分子携带的净电荷越多，迁移的速度也越快，反之就慢。 &&& 在生理条件下，核酸分子磷酸基基团为离子化状态，故dna和rna多核苷酸链为多聚阴离子状态，在电场中会从负极移动向正极。在一定强度的电场中，dna分子的电泳速率是由分子大小和构型决定的。这就是应用凝胶电泳技术分离dna片段的基本的原理。在凝胶电泳中，还常常加入溴化乙锭染色，染色后的核酸分子在紫外光下面发出荧光，肉眼就可以看到大约五十纳克dna所形成的条带。琼脂糖为从龙须菜等海藻中提取的线状糖类高聚物，将其粉末加热融化后冷却可以形成很好的电泳介质，其密度由琼脂糖的浓度决定。琼脂糖凝胶电泳是一种很简便、快捷和常用的分离和纯化核酸的方法。 &&& 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体由催化剂temed在硫酸铵的作用下聚合成的长链，由交联剂n,n’-亚甲双丙烯酯参与交叉形成的凝胶。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离鉴定低分子量的蛋白质、小于1kb的dna片段和ｄｎａ片度分析。其装载样本量大，能够回收高纯度的ｄｎａ。
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常见疾病用药分子量很大（大于60kb）的DNA用那种电泳方法分离?琼脂糖凝胶电泳只能分离60kb以下的dna_百度作业帮
拍照搜题，秒出答案
分子量很大（大于60kb）的DNA用那种电泳方法分离?琼脂糖凝胶电泳只能分离60kb以下的dna
琼脂糖凝胶电泳只能分离60kb以下的dna
脉冲场凝胶电泳大分子DNA(一般长度超过20kb,在某些情况下,超过40kb)在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时,将会改变无规卷曲的构象,沿电场方向伸直,与电场平行从而才能通过凝胶.此时,大分子通过凝胶的方式相同,迁移率无差别(也称“极限迁移率”),不能分离.脉冲场凝胶电泳技术解决了这一难题,它应用于分离纯化大小在10～2000kb 之间的DNA 片段.这种电泳是在两个不同方向的电场周期性交替进行的,DNA分子在交替变换方向的电场中作出反应所需的时间显著地依赖于分子大小,DNA 越大,这种构象改变需要的时间越长,重新定向的时间也越长,于是在每个脉冲时间内可用于新方向泳动的时间越少,因而在凝胶中移动越慢.反之,较小的DNA 移动较快,于是不同大小的分子被成功分离.在许多实用的PFGE 方法中,倒转电场凝胶电泳是最简单最常用的方法(FIGE).通过把一个在不同电场方向有不同脉冲方式的脉冲电场加在样品上,倒转电场凝胶电泳(FIGE)设备能把大小范围在10～2000kb 的DNA 片段分开.FIGE也可通过重新确定一个对准完全固定好角度的电场,这样会进一步扩展其分离极限达到10Mb.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。(1)从图中可见,该基因突变是由于____引起的。正常基因该区域上有3个酶切位点,突变基因上只有2个酶切位点,酶切后,凝胶电泳分离酶切片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱,正常基因显示____条,突变基因显示____条。(2)DNA或RNA分子探针要用____等标记。利用核酸分子杂交原理,根据图中突变基因的核苷酸序列(—ACGTGTT—),写出用作探针的核糖核苷酸序列____。(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱ1~Ⅱ4中需要停止妊娠的是____,Ⅱ4的基因型为____。(4)正常人群中镰刀型细胞贫血症基因携带者占1/10 000,Ⅰ2若与一正常女性再婚,生出患病儿子的概率为____。-乐乐题库
& 基因重组与基因突变知识点 & “单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期...”习题详情
234位同学学习过此题，做题成功率79.9%
单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。(1)从图中可见,该基因突变是由于&&&&引起的。正常基因该区域上有3个酶切位点,突变基因上只有2个酶切位点,酶切后,凝胶电泳分离酶切片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱,正常基因显示&&&&条,突变基因显示&&&&条。&(2)DNA或RNA分子探针要用&&&&等标记。利用核酸分子杂交原理,根据图中突变基因的核苷酸序列(—ACGTGTT—),写出用作探针的核糖核苷酸序列&&&&。(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱ1~Ⅱ4中需要停止妊娠的是&&&&,Ⅱ4的基因型为&&&&。(4)正常人群中镰刀型细胞贫血症基因携带者占1/10 000,Ⅰ2若与一正常女性再婚,生出患病儿子的概率为&&&&。(1)碱基对改变(或A变成T) 2 1(2)放射性同位素(或荧光分子) —UGCACAA—(3)Ⅱ2(或Ⅱ2) BB (4)1/80 000&
本题难度：一般
题型：解答题&|&来源：2014-高三生物一轮总复习备课资源包：专题12生物的进化
分析与解答
习题“单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病...”的分析与解答如下所示：
(1)由图可知,正常基因B的序列为—ACGAGTT—,突变基因b的序列为—ACGTGTT—,因此该基因突变是由于碱基A变成T引起的。据图可知,正常基因B显示2条带谱,突变基因b显示1条带谱。(2)探针应用放射性同位素或荧光分子等标记,以便于检测。探针应与待测基因序列互补,若选用RNA,其序列应为—UGCACAA—。(3)据图可知,Ⅱ1~Ⅱ4的基因型依次为BB、bb、Bb、BB,因此需要停止妊娠的是Ⅱ2。(4)Ⅰ2的基因型为Bb,与一正常女性再婚(B),生出患病儿子(bbXY)的概率为1/10 000×1/4×1/2="1/80" 000。
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单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出...
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经过分析，习题“单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病...”主要考察你对“基因重组与基因突变”“染色体变异与育种”
等考点的理解。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
基因重组与基因突变
染色体变异与育种
与“单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病,已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病...”相似的题目：
在一个种群中发现两种突变性状，其中一种性状无论繁殖几代都不变，而另一突变性状繁殖到第三代又有37.5%的性状恢复到原有性状，以上突变分别属于&&&&隐性突变和显性突变显性突变和隐性突变人工诱变和染色体变异都是显性突变或者都是隐性突变
豌豆的株高与赤霉素合成有关，其性状是由一对等位基因（T、t）控制的，等位基因（T、t）的遗传信息的结构只相差1个核苷酸。隐性基因t产生的酶的活性相当于正常酶的1/20。下列叙述中正确的是基因通过控制相关酶的合成直接控制豌豆的株高TT和tt杂交产生的F1植株具有的酶活性将是正常植株的1/20用赤霉素处理基因型为tt的植株，不能使它生长为高植株控制豌豆株高的基因突变起因于一对核苷酸的缺失
下图是利用玉米（2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图。下列分析错误的是A．基因重组发生在图中②过程，线粒体、高尔基体、核糖体等细胞器参与了③过程 B．该实验中涉及到的原理包括细胞的全能性、染色体变异、细胞增殖等C．植株A、B为二倍体，发育起点不同，植株C属于单倍体，其发育起点为配子D．获得植株B的育种方式优点是明显缩短育种年限，植株B纯合的概率为25%
“单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期...”的最新评论
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聚丙烯酰胺凝胶电泳分离14bp DNA
请教大家：用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离14bp和28bp的两段DNA链需要多大浓度的胶啊
聚丙烯酰胺凝胶是蛋白胶吧？DNA用的是琼脂糖凝胶！ 具体不是很清楚，建议用20%试试看。Good luck！ : Originally posted by Sthunder at
具体不是很清楚，建议用20%试试看。Good luck！ 电压建议多大呢 我分离14bp的使用18%的胶&&电压用80V的.... 我觉得片段很小不能高电压，最好在70V左右 : Originally posted by liulanhua at
电压建议多大呢... 电压还要看你使用胶的大小了，如果是16X20的话跑60-70V就好！Good luck！ : Originally posted by RUI1990 at
聚丙烯酰胺凝胶是蛋白胶吧？DNA用的是琼脂糖凝胶！ 去看看dna怎么测序的 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳（T=6%，C=3.3%，凝胶规格为82mm×64mm×0.75mm）。电极缓冲液为1×TBE。将加有1/5体积上样缓冲液的酶切产物电泳，220 v 电压，电泳2－3h。 : Originally posted by susan小水 at
6%聚丙烯酰胺凝胶电泳（T=6%，C=3.3%，凝胶规格为82mm×64mm×0.75mm）。电极缓冲液为1×TBE。将加有1/5体积上样缓冲液的酶切产物电泳，220 v 电压，电泳2－3h。 这个浓度能分离那么小的片段吗 供参考&&是我自己找的资料&&我没做过&&不好意思 : Originally posted by 牧炀 at
我分离14bp的使用18%的胶&&电压用80V的.... 请问大约需要跑多长时间啊 : Originally posted by liulanhua at
请问大约需要跑多长时间啊... 我跑了大概一个小时12分钟，看的是溴酚蓝跑到玻璃板最底下了停的
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