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高效液相色谱法测定芹菜中芹菜素含量蜂胶检测技术进展-免费论文
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蜂胶检测技术进展
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２０１１食品安全技术与标准国际研讨会暨ＡＯＡＣ中国区会议论文集 蜂胶检测技术进展 张睿 陈磊水 （江苏出入境检验检疫局，南京２１０００１） 摘要：本文对近年来蜂胶中含有的主要活性物质，如黄酮类化合物、酚酸类化合物、萜烯类化合物，以及重金属、 农兽药残留的检测技术进行了比较详细的综述。&&&& 关键词：蜂胶；黄酮：酚酸；萜烯；残留检测 ｌ 引言 蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂（树胶），混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具 有芳香气味的胶状固体物。&&&& 近代研究证明，蜂胶所含有的丰富而独特的生物活性物质，使其具有抗菌、消炎、止痒、抗氧化、增强 免疫、降血糖、降血脂、抗肿瘤等多种功能，对人体有着广泛的医疗、保健作用，现已成为各国科学研究的 热点，并成为新兴的保健品倍受推崇。&&&& 蜂胶的成分极其复杂，已知成分有数百种之多，主要包括黄酮类化合物、有机酸、酯、醛、醇类化合物 以及烯、烃、萜类化合物等。&&&&其中，对于黄酮类、酚酸类和萜烯类化合物的检测技术目前有较多的报道，而 且这些化合物对于蜂胶的抗菌、消炎、抗氧化等生理活性起主要作用，所以本文将主要对蜂胶中这几类化合 物的检测技术进行详细综述。&&&&此外，本文也将对蜂胶中的重金属和农兽药残留检测技术进行简单综述。&&&& ２黄酮类化合物的检测 黄酮类化合物是蜂胶的主要活性成分，也是目前蜂胶研究中报道最多的化合物。&&&&蜂胶的国家标准【ｌ】和农 业行业标准【２，３ｊ均对蜂胶中的总黄酮含帚进行了规定。&&&&对于总黄酮的检测，主要可以分为两种方法：一是采用 紫外分光光度计在黄酮类化合物的最大紫外吸收波长处检测吸光度，并以芦丁为对照品，计算总黄酮含量； 二是采用高效液相色谱法尽可能的分离黄酮单体，以各黄酮单体的含量之和代表总黄酮含量。&&&& 采用紫外分光光度计的检测方法又可以分为Ａ１３＋－ＮａＯＨ显色法和聚酰胺吸附法。&&&& ＧＢ／Ｔ ２０５７４．２００６ｔ４１规定的蜂胶中总黄酮含量测定方法是Ａ１３十－ＮａＯＨ显色法。&&&&该方法的检测原理是：黄酮类化合物在弱碱性条件下，能与Ａｌ”结合生成有色物质，可在４１５ｎｍ波长附近产生最大吸收。&&&&在一定浓度范 围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量呈正比。&&&&以芦丁为标准品，配置不同浓度的标准溶液，绘制标准曲线， ’ 即可定量测定黄酮类化合物的含量。&&&& ＧＢ／Ｔ ２４２８３．２００９Ｌ１ｊ规定的蜂胶中总黄酮含晕测定方法是聚酰胺吸附法。&&&&基本操作为：称取一定量的试样，加乙醇定容至１００ｍｌ，摇匀后，超声２０ｍｉｎ，放置一段时间，取上清液１．０ｍｌ于蒸发皿中，加ｌｇ聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱，先用２０ｍｌ苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至２５ｍｌ，于波长３６０ｒｉｍ测定其吸光值。&&&& ＮＹ ５１３６．２００２ｔ２】和ＮＹ厂ｒ ６２９．２００２ｔ３】规定的蜂胶中总黄酮含量的测定方法是高效液相色谱法。&&&&检测原理为：蜂胶中常见的黄酮是高良姜素、槲皮素、芦丁、杨梅酮、莰菲醇、芹菜素、松属素和柯因（白杨素）。&&&&这８种黄酮在紫外波长２７０ｎｍ处均有吸收，并且因为分子结构中含有的羟基数量不同因而极性不同，在反向Ｃ１８柱上的保留时间不同。&&&&通过优化色谱条件使这８种黄酮达到完全分离后，就可以分别进行定量。&&&&以８种黄酮含量之和表示蜂胶中的总黄酮含量。&&&&ＧＢ／Ｔ １９４２７．２００３１５〕除规定了上述８种黄酮的高效液相色谱检测方法?Ｅ?ｍａｉｌ：ｃｏｆｆｅｅｃａｔｅｈｅｎ＠１６３．ｃｏｒｎ 一８３― ２０１１食品安全技术与标准国际研讨会暨ＡＯＡＣ中国区会议论文集外，还规定了液相色谱．串联质谱检测方法，定量更加准确。&&&& 除检测标准外，采用高效液相色谱法对蜂胶中黄酮类化合物进行检测的文献报道也很多。&&&&王小平等１６－－８１采用高效液相色谱法分别对不同产地蜂胶中的高良姜素、白杨素和槲皮素的含量进行了检测。&&&&曹炜等【９Ｊ采用高效液相色谱法对蜂胶中的白杨素和高良姜素同时进行了检测。&&&&王东等【ｌ ｏ】采用高效液相色谱法对不同产地蜂胶中的柯因、槲皮素和洋芹素（芹菜素）的含量进行了测定。&&&&杨理等…】采用高效液相色谱法同时测定了蜂胶中芦丁和槲皮素的含量。&&&& 由于目前蜂胶中总黄酮的测定方法标准不一，测定数据与实际含量可能有较大的偏差，余兰平等【１ ２】对上述几种检测方法进行了比较。&&&& 通过多次实验，余兰平等【Ｉ ２】发现：Ａ１３＋－ＮａＯＨ显色法有一定的局限性。&&&&因为在几大类黄酮中，有几类黄酮会显色（如黄烷醇类或具有糖结构的黄酮），而另外几类黄酮不会显色（如部分多羟基黄酮）。&&&&这几种不显色的黄酮占蜂胶总黄酮的很大一部分，从峰面积来看约占５０％左右。&&&&所以利用这种方法测出来的值肯定与实际值有较大的偏差。&&&& 对于聚酰胺吸附法，余兰平等【１２１发现：用到的洗脱液苯虽然是非极性物质，但是它同样能够洗脱某些弱极性的物质。&&&&而蜂胶中的柯因、高良姜素、松属素恰恰是弱极性的黄酮。&&&&余兰平等Ｉｌ ２Ｊ将洗脱后的苯液蒸干，然后用甲醇溶解，依照ＧＢ／Ｔ １９４２７．２００３的方法测定，发现蜂胶中的柯因、高良姜素、松属素三种黄酮类物质均能被苯淋洗掉，这可能会导致检测结果偏低。&&&& 对于高效液相色谱法，余兰平【１２ｌ等经过多次实验发现：８种黄酮的峰面积之和是总峰面积之和的６５．７５％。&&&&于是，余兰平等【１２】大致确定，蜂胶中总黄酮的含量为八种黄酮的和再乘一个系数，该系数在１．３３．１．５３之间。&&&&但是由于蜂胶的成分复杂，不同产地、不同时间的蜂胶成分和含量均有差异。&&&&因此，这种计算方法还有待于通过大量的测定多组数据进行求证。&&&& 余兰平等【１２】最后得出结论：蜂胶总黄酮的测定最好采用高效液相色谱法检测其中的某几种黄酮类物质，再以它们的总和乘以一个相应的系数更能反映蜂胶中总黄酮的真实含量。&&&& 此外，对于目前我国蜂胶的国家标准和行业标准中规定的总黄酮检测方法，也有学者提出异议。&&&&南壶等【１３】采用高效液相色谱法对蜂胶、杨树叶及杨树芽中水杨苷和芦丁的含鼍进行了检测。&&&&结果发现，在ｌＯ个蜂胶样品中均没有检测出这两种糖苷。&&&&通过文献调研，作者发现在几乎所有（仅１个例外）的蜂胶化学成分研究的文献中，均没有从蜂胶中分离得到苷类化合物的报道。&&&&因此作者提出，在蜂胶中可能不含有苷类物质。&&&&作者的实验结果也支持了上述观点。&&&&此外，作者提到，有文献报道从蜜蜂咽下腺和蜂蜜中均分离得到糖苷酶。&&&&综合分析上述情况，作者认为，在蜜蜂采集加工蜂胶的过程中，胶源植物中的苷类物质被其分泌的糖苷酶水解成了苷元。&&&&因此，作者认为：在我国蜂胶的国家标准和行业标准中，对蜂胶中黄酮类物质的测定，采用了比色法和高效液相色谱法，都以芦丁（槲皮素．３．芸香糖苷）作为标准物质的方法值得商榷。&&&&３酚酸类化合物的检测 ‘ 酚酸类化合物是蜂胶中的另一类重要活性物质，广泛存在于植物界中，在保护植物免受紫外线损伤、病虫害侵袭等方面起非常重要的作用。&&&&近年来，随着对酚酸类化合物药理功能研究的不断深入，发现酚酸类化合物具有抗癌、抗氧化、预防心脑血管疾病等方面的功能Ｉｌ ４｜。&&&&特别是咖啡酸苯乙酯（ＣＡＰＥ）和阿替匹林Ｃ的抗肿瘤活性，已得到国内外学者的广泛关注〔１５，１６】。&&&&因此，并不能仅仅通过黄酮含量的高低来判断蜂胶质量的好坏，酚酸类物质的含量也应该进行检测。&&&& 目前，蜂胶中酚酸类物质的检测标准较少。&&&&ＧＢ／Ｔ ２３１９６．２００８【ｌ ７Ｊ只规定了蜂胶中阿魏酸的含量测定方法。&&&&检测原理为：蜂胶中的阿魏酸经甲醇超声提取、沉淀、离心，再用０．４５ｐｍ滤膜过滤后得澄清液，经反相色谱柱分离后，用液相色谱．紫外检测器测定，外标法定量，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。&&&& 相对于检测标准，蜂胶中酚酸类物质的检测方法文献较多，并且多采用高效液相色谱法。&&&&符军放【１４】采用高效液相色谱法同时测定了不同来源蜂胶中咖啡酸、Ｐ．香豆酸、阿魏酸和肉桂酸的含量。&&&&李熠掣１８】采用超高 ――８４。&&&&。&&&& ２０１１食品安全技术与标准国际研讨会暨ＡＯＡＣ中国区会议论文集效液相色谱法对蜂胶中阿魏酸和咖啡酸苯乙酯的含量进行了检测。&&&&陈滨等【１９１采用高效液相色谱法同时测定了 中国蜂胶水提物中肉桂酸、Ｐ一香豆酸、阿魏酸、没食予酸、儿茶素、表儿茶素、ａ．儿茶素、咖啡酸、３，４．二甲氧基肉桂酸的含量。&&&&索志荣掣ｚｏ】采用高效液相色谱法同时测定了蜂胶浸膏中咖啡酸、ｐ．香豆酸、反式阿魏酸和肉桂酸的含量。&&&&孟霞等【２ｌＪ采用高效液相色谱法同时测定了蜂胶液中苯甲酸、咖啡酸、阿魏酸、香草酸、肉桂酸和绿原酸的含量。&&&&于世锋等【ＺＺＪ采用高效液相色谱法同时测定了蜂胶中咖啡酸、ｐ．香豆酸、肉桂酸和阿魏酸的含量。&&&&韩利文等【２３Ｊ采用高效液相色谱法对蜂胶中阿替匹林ｃ的含量进行了检测。&&&&４萜烯类化合物的检测 蜂胶是一种具有芳香气味的胶状固体物。&&&&这种特殊的芳香气味来源于蜂胶中的挥发性成分。&&&&而萜烯类化合物正是蜂胶中挥发性成分的主要组成部分。&&&&蜂胶中的萜烯类化合物主要为单萜与倍半菇，少数为二萜。&&&&萜烯类化合物与黄酮类化合物一样，也具有很强的生理活性，其主要作用是：免疫调节、降血糖、降血压、抗肿瘤、杀菌消炎、镇痛、解热、祛痰、止咳、活血化瘀和局部麻醉等。&&&&其中，杀菌、消炎、止痛和抑制肿瘤的作用更为显掣２４１。&&&&目前，对于蜂胶中萜烯类化合物的研究主要集中在生物活性方面，对于检测方法的研究相对较少。&&&& 王小平等〔２５１采用气相色谱．质谱联用技术分析比较了河南产蜂胶和山东产蜂胶乙醚提取物的化学成分。&&&&河南产蜂胶中检出挥发性成分５８个，山东产蜂胶中检出挥发性成分４２个。&&&&其中，两地均含有的相同成分仅有２５种，并且相对百分含量也有显著差异。&&&&作者认为，产地可显著影响蜂胶中挥发性成分的种类及含量。&&&& 李雅萍等１２６ｊ比较了固相微萃取（ＳＰＭＥ）及溶剂（乙醇、乙酸乙脂）提取法对蜂胶挥发性成分的提取效率。&&&&用ＧＣ毛细管柱对化合物进行分离，归一化法测其相对含量，气相色谱．质谱联用法进行测定。&&&&结果表明，ＳＰＭＥ技术对蜂胶中萜烯类物质有简单快速，提取效率高、溶剂消耗低及一定的浓缩富集作用等优点，是一种有效的蜂胶挥发性萜烯类物质富集方法。&&&& 付宇新等【２７】以内蒙古蜂胶为实验材料，比较了传统水蒸气蒸馏法（ＨＤ）、同时蒸馏萃取法（ＳＤＥ）和动态顶空进样（ＤＨｓ）对挥发性成分的提取效率，以气相色谱一质谱法检测。&&&&结果发现，从ＨＤ所得样品中检测出了１２种化合物，从ＳＤＥ法所得样品中检测出了４０种化合物，从ＤＨＳ法所得样品中检测出了７０种化合物。&&&&作者认为，ＤＨＳ与ＳＰＭＥ的方法原理相似，无需有机溶剂，操作简单、快速，所需样品量少，集萃取、浓缩、采样于一体，能够尽可能减少被分析挥发性成分的损失，并方便地与气相色谱．质谱联用。&&&&因此能得到更多的挥发成分，也能检测到一些痕量挥发性物质。&&&&５重金属残留检测 蜂胶中的重金属残留主要是铅。&&&&ＧＢ／Ｔ ２３８７０．２００９〔２８】规定了蜂胶中铅的测定方法为微波消解．石墨炉原子吸收分光光度法。&&&&方法原理为：试样中加入硝酸和过氧化氢，经过微波消解后，测定其在２８３．３ｒｉｍ处的吸光度。&&&&测定结果与标准系列比较定量。&&&&鲁丹１２９〕在微波消解的基础上，通过优化基体改进剂及石墨炉升温程序，建立了塞曼扣背景石墨炉原子吸收法用于测定蜂胶及其制品中的铅，并和国家标准方法进行了比较，取得了令人满意的结果。&&&&陈新萍【３０】也建立了一种蜂胶乙醇提取物中铅的含量测定方法。&&&&该方法首先利用乙醇溶液可以有效降低铅污染的特性，即采用乙醇溶液提取蜂胶中活性物质，然后采用浓硝酸与高氯酸混合液并加入基体改进剂消解蜂胶乙醇提取物试样，最后通过石墨炉原子吸收光谱法测定蜂胶乙醇提取物中铅含量。&&&&６抗生素残留检测 蜂胶中残留的抗生素一般来源于养蜂过程中用于蜂群细菌性疾病的预防和治疗时使用的抗生素药物。&&&&由于蜂胶的成分复杂，特别是带有天然抗菌物质，不能直接用杯碟法进行检测。&&&&在比较早期的文献中，有学者报道【３¨，先用乙醚及三氯甲烷对蜂胶样品进行处理，再经ＸＡＤ．２树脂处理，基本可以将蜂胶中的非抗生素抗菌物质预先除去，然后再用杯碟法测定蜂胶中的四环素族抗生素。&&&&该方法的最低检出量达到ｏ．ｏｓｇｇ／ｇ。&&&&近 一８５― ２０１ｌ食品安全技术与标准国际研讨会暨ＡＯＡＣ中国区会议论文集年来，由于高端精密检测仪器的普及，液相色谱串联质谱方法作为确证方法已经被权威的监督检验机构运用。&&&&由于其在灵敏度、准确度、检测效率上的独特优势，目前己成为优越的残留检测方法之一。&&&&周萍等‘３２１利用高效液相色谱．串联质谱技术对蜂胶中的氯霉素残留进行了检测。&&&&该方法采用１０％高氯酸提取，用１Ｍ ＮａＯＨ调节ｐＨ－１０．５，并用乙酸乙酯进行反萃取，从而净化样品，不再经过固相萃取，大大节约了检测成本，样品前处理方法简单快捷，加快了检测速度。&&&&本方法检测限为Ｏ．１Ｉ．ｔｇ／ｋｇ，与杯碟法相比，检测灵敏度大大提高。&&&&７农药残留检测 蜂胶中的农药残留检测文献很少，已查到的只有对用于防治蜂螨的拟除虫菊酯类杀螨剂残留检测的文献报道。&&&&倪蕾等【３３】以二氯甲烷为提取溶剂，用Ｆｌｏｒｉｓｌ固相萃取柱净化，采用ＧＣ．ＥＣＤ测定，峰面积定量，来检测蜂胶中氟胺氰菊酯的残留量。&&&&该方法操作简单，氟胺氰菊酯的回收率及精密度较高。&&&&最低检出限为０．００１－４）．００５ｍｇ／ｋｇ。&&&&王祥云等【３４Ｊ以石油醚为溶剂提取样品，凝胶渗透色谱法净化样品，气相色谱法测定氟胺氰菊酯和氟氯苯氰菊酯残留。&&&&氟胺氰菊酯和氟氯苯氰菊酯的回收率均在６９．０％－－－９６．４％，相对标准偏差均在１．２７％～７．６９％，检测限均为０．０５ｍｇ／ｋｇ。&&&&８ 总结 综上所述，目前国内外对于蜂胶检测技术的研究，主要集中在黄酮类化合物的检测方面。&&&&对于蜂胶中的其他重要活性物质，如酚酸类和萜烯类，相关研究报道不多，并且检测方法大致相似，创新性不强。&&&&至于蜂胶中有害物质的残留检测，相关文献报道更少。&&&&这可能是由于蜂胶基质太复杂，而且不同产地、来源的蜂胶差异性太大，无法制订可以被广泛认可的质量标准造成的。&&&&Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｌ Ｐｒｏｐｏｌｉｓ（蜂胶）．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆＣｈｉｎａ（中华人民共和国国家标准）ＧＢ／Ｔ ２４２８３．２００９２ Ｐｒｏｐｏｌｉｓ（蜂胶）．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆＣｈｉｎａ（中华人民共和国农业行业标准）ＮＹ ５１３６．２００２３ Ｐｒｏｐｏｌｉｓ（蜂胶）．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆＣｈｉｎａ（中华人民共和国农业行业标准）＾『Ｙ厂ｒ６２９．２００２４ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｐｒｏｐｏｌｉｓ Ｃｏｉｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ（蜂胶中总黄酮含繁的测定方法分光光度比色法）． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓＲｅｐｕｂｌｉｃｏｆＣｈｉｎａ（中华人民共和国国家标准）ＧＢ／Ｔ２０５７４―２００６５ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｔｉｎ，ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ，ａｐｉｇｅｎｉｎ，ｐｉｎｏｅｅｍｂｒｉｎ，ｃｈｒｙｓｉｎ，ｇａｌａｎｇｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｏｐｏｌｉｓ ＬＣ．ＭＳ．ＭＳ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ＬＣ．ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ（蜂胶中芦丁、杨梅酮、槲皮素、莰菲醇、芹菜素、松属素、苛因、 高良姜素含量的测定方法液相色谱．串联质谱检测法和液相色谱．紫外检测法）．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（中华人民共和围国家标准）ＧＢ／Ｔ １９４２７．２００３６ ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ．Ｐｉｎｇ（王小平），ＬＩＮ Ｌｉ（林励），ＣＨＥＮ Ｚｈｅｎ．Ｌｉｎ（陈振霖），ＭＡ Ｙａｎ―Ｙａｈ（马艳艳），ＰＡＮ Ｊｉａｎ－Ｇｕｏ（潘建国）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，（中药材），２００７，３０（５）：５６０～５６２７ ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ－Ｐｉｎｇ（王小平），ＢＡＩ Ｊｉ―Ｑｉｎｇ（白吉庆），ＬＩＮ Ｌｉ（林励），ＰＡＮ Ｊｉａｎ－Ｇｕｏ（潘建国），ＬＵ Ｚｈａｎ－Ｌｉｅ（卢占列）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（四川中医），２００９，２７（５）：５５～５６ Ｓｉｃｈｕａｎ８ ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ?Ｐｉｎｇ（王小平），ＬＩＮ Ｌｉ（林励），ＢＡＩ Ｊｉ―Ｑｉｎｇ（自吉庆）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＹｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ （云南中医学院学报），２００９，３２（３）：３０－３２９ ＣＡＯ ｗ西（曹炜）’ＦＵ Ｊｕｎ．Ｆａｎｇ（符军放），ＳＵＯ Ｚｈｉ．Ｒｏｎｇ（索志荣），ＺＨＥＮＧ Ｊｉａｎ―Ｂｉｎ（郑建斌），ＳＯＮＧ Ｊｉ．Ｒｏｎｇ（宋纪荣），ＷＥＩ Ｙａ．Ｈｕｉ（尉皿辉）．Ｃｈｉｎ．Ｚ Ｐｈａｒｍ．，４ｈａｌ．（药物分析杂志），２００７，２７（４）：５２２－５２４ １０ ＷＡＮＧ Ｄｏｎｇ（王东），ＹＡＮＧ Ｌｉｎ－Ｓｈａ（杨林莎）．Ｌｉｓｈｉｚｈｅｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（时珍国医国药），２００６，１７（１２）： ２５０１－２５０２ｌｌ ＹＡＮＧＬｉ（杨理），ＹＡＮ Ｑｉｎｇ－Ｈｕａ（闰清华），ＤＥＮＧ Ｙｕｅ―Ｅ（邓月娥），ＮＩＵ Ｌｉ－Ｙｕａｎ（牛立元），ＺＨＡＮＧ Ｙａｎ（张焱），ＺＨＡＯ Ｙｉ－Ｎａｎ （赵怡楠）．Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙ（食品ｊ：业科技），２０１０，５：３０１～３０３ １２ Ｙｕ Ｌ锄一Ｐｉｎｇ（余兰平），ＹＡＮ Ｄｅ―Ｚｈｏｎｇ（严德忠），ＳＨＥＮＧ Ｗｅｎ－Ｓｈｅｎｇ（盛文胜）．Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆＢｅｅｋｅｅｐｉｎｇ（养蜂科技）’２００５，５： ５―８１３ ＮＡＮ Ｙａｏ（南矗），ＺＨＯＵ Ｌｉ．Ｄｏｎｇ（周立东）．Ｗｏｒｍ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／Ｍｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ（世界科学技术．中医药现代化），２００８，ｌＯ（６）：５９－－６ｌ １４ ＦＵ Ｊｕｎ．Ｆａｎｇ（符军放）’Ｍａｓｔｅｒ Ｔｈｅｓｉｓ ｏｆＮｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（西北大学硕士学位论文），２∞６ １５ ＬＩ Ｙａ．Ｊｉｎｇ（李雅品），ＦＥＮＧ Ｌｅｉ（冯磊）’ＨＵ Ｆｕ．Ｌｉａｎｇ（胡福良）．Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｍｅｄｉｃｉｎｅ（国外医学中医中药分册）’２００５，２７（４）：１９９～２１ｌ １６ ＸＵＡＮ Ｈｏｎｇ－Ｚｈｕａｎ（玄红专），ＨＵ Ｆｕ―Ｌｉａｎｇ（胡福良），ＧＵ Ｍｅｉ－Ｅｒ（顾美ＪＬ）．Ｆｏｏｄ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（食品研究与开发）， 一８６― ２０１ｌ食品安全技术与标准国际研讨会暨ＡＯＡＣ中国区会议论文集 ２００６，２７（５）：１４一ｌ ５ １７ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｐｒｏｐｏｌｉｓ ＨＰＬＣ．ｕＶ ｍｅｔｈｏｄ（蜂胶中阿魏酸含量的测定方法液相色谱．紫外检测法）． Ｓｔａｎｄａｒｄｓｏｆｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓＲｅｐｕｂｌｉｃｏｆＣｈｉｎａ（中华人民共和围陶家标准）ＧＢ／Ｔ２３１９６．２００８ Ｎａｔｉｏｎａｌ １８ ＬＩ Ｙｉ（李熠）’ＺＨＡＯ Ｊｉｎｇ（赵静），ＸＵＥ Ｘｉａｏ－Ｆｅｎｇ（薛晓锋），ＺＨＯＵ Ｊｉｎ－Ｈｕｉ（周金慧）．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（色谱）， ２００７，２５（６）：８５７－８６０ １９ ＣＨＥＮ Ｂｉｎ（陈滨），ＬＵＯ Ｌｉ．Ｐｉｎｇ（罗丽萍），ＬＩ Ｙａｈ（丽艳），ＸＵ Ｙｕａｎ－Ｊｕｎ（徐元君），ＦＵ Ｙｕ．Ｘｉｎ（付宇新），ＧＡＯ Ｙｉｎ．Ｙｕ（高荫榆）． ｏｆＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（分析化学）’２００９，３７（１２）：１７８６－－１７９０ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ２０ ＳＵＯ Ｚｈｉ．Ｒｏｎｇ（索志荣），ＣＡＯ Ｗｅｉ（曾炜），ＱＩＮ Ｈａｌ．Ｙａｈ（秦海燕）．ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ（食品科学），２００８，２９（８）：４９６－４９８２１ ＭＥＮＧ Ｘｉａ（孟霞），ＰＥＮＧ Ｊｉｎｇ－Ｄｏｎｇ（彭敬东），ＬＩＵ Ｓｈａｏ―Ｐｕ（刘绍璞）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（西南大学学报），２００８， ３０（９）：６６－７０２２ Ｙｕ ｓｈｉ．Ｆｅｎｇ（于世锋），Ｆｕ Ｊｕｎ－Ｆａｎｇ（符军放），ＣＨＥＮ Ｗｅｉ―Ｊｕｎ（陈卫军），ＷＡＮＧ Ｂｉ―Ｎｉ（王毕妮），ＣＡＯ Ｗｅｉ（曹炜）．Ａｐｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（中国蜂业），２００７，５８（９）：８―１０２３ ＨＡＮ Ｌｉ．Ｗｅｎ（韩利文），ＬＩＵ Ｋｅ―Ｃｈｕｎ（刘可春），ＷＡＮＧ Ｓｉ－Ｆｅｎｇ（王思锋），ＷＡＮＧ Ｘｕｅ（王雪），ＨＯＵ Ｈａｉ－Ｒｏｎｇ（侯海荣）．Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ（中国药事），２００８，２２（４）：３１２－３１４２４ ＢＯＷｅｎ．Ｆｅｉ（薄文飞）．ＭａｓｔｅｒＴｈｅｓｉｓｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙ（山东轻工业学院硕士学位论文），２００９２５ ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ．Ｐｉｎｇ（王小平），ＬＩＮ Ｌｉ（林励）’ＸＩＡＯ Ｆｅｎｇ－Ｘｉａ（肖风霞）．Ｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（华西药学 杂志），２００９，２４（４）：３８３―３８５２６ ＬＩ Ｙａ－Ｐｉｎｇ（李雅萍），ＨＥ Ｌｉ．Ｐｉｎｇ（贺丽苹），ＣＨＥＮ Ｙｕ－Ｆｅｎ（陈玉芬），ＬＵ Ｚｈａｎ－Ｌｉｅ（卢占列），ＺＨＥＮＧ Ｙａｏ－Ｌｏｎｇ（郑尧隆），ＰＡＮ Ｊｉａｎ．Ｇｕｏ（潘建国），ＬＩＮ Ｌｉ（林励）．Ｍｏｄｅｒｎ ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（现代食品科技），２００７，２３（７）：７８－８０２７ ＦＵ Ｙｕ－Ｘｉｎ（付宇新），ＸＵ Ｙｕａｎ－Ｊｕｎ（徐元君），ＣＨＥＮ Ｂｉｎ（陈滨），ＬＩ Ｙａｈ（丽艳），ＬＵＯ Ｌｉ?Ｐｉｎｇ（罗丽萍）．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（分析化学）’２００９，３７（５）：７４５―７４８２８ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｂ ｉｎ ｐｒｏｐｏｌｉｓ Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ―ｇｒａｐｈｉｔｅ ｆ－ＵｌＴｌａｅｅ ａｔｏｍｉｃ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ（蜂胶中铅的测定微 波消解．石墨炉原子吸收分光光度法）．Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’Ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（中华人民共和国国家标准）ＧＢ／Ｔ ２３８７０－２００９２９ ＬＵＤａｎ（鲁丹）．Ｃｈｉｎ．ｚ Ｐｈａｒｍ．Ａｎａｌ．（药物分析杂志）’２００９，２９（５）：８５２～８５４３０ ＣＨＥＮ Ｘｉｎ．Ｐｉｎｇ（陈新萍）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＴａｒｉｍ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（塔里木大学学报），２０１０，２２（４）：４３－４６３１ ＹＵＡＮ Ｊｕｎ（袁军），ＬＩＵ Ｙｕ－Ｐｉｎｇ（刘玉萍）’ＣＨＥＮ Ｇｎａｎｇ－Ｑｕａｎ（陈广全），ＺＨＡＮＧ Ｈｕｉ?Ｙｕａｎ（张惠嫒）．Ｍｏｄｅｒｎ ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（现代商检科技），１９９８，８（３）：２１－２３３２ ＺＨＯＵ Ｐｉｎｇ（周萍），ＨＵ Ｆｕ－Ｌｉａｎｇ（胡福良），ＸＵ Ｑｕａｎ．Ｈｕａ（徐权华），ＷＡＮＧ Ｌｉ－Ｈｕａ（王立华）．Ａｐｉｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆＣｈｉｎａ（中国蜂业）， ２０１０，６ｌ（９）：４２－４４３３ ＮＩ Ｌｅｉ（倪蕾），ＬＩＮ Ｇｕｏ―Ｂｉｎ（林国斌），ＬＩＮ Ｘｉａｎｇ－Ｙａｎｇ（林向阳）’ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ（张宏）．Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆＦａｒｍ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ（农产品加工?学刊），２００９，１２：２４－２６３４ ＷＡＮＧ Ｘｉａｎｇ－Ｙｕｎ（王祥云），ＺＨＡＮＧ Ｈｕ（章虎），ＬＵＯ Ｚｈｉ―Ｑｉａｎｇ（罗志强），ＬＩ Ｗｅｎ－Ｄａｎ（李文丹），ＷＵ Ｌｉ?Ｑｉｎ（吴俐勤）．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｎｈｕｉ Ａｇｒｉ．Ｓｄ．（安徽农业科学），２００９，３７（２２）：１０３６１－１０３６２ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｐｒｏｐｏｌｉｓ ＺＨＡＮＧ Ｒｕｉ，ＣＨＥＮ Ｌｅｉ’ （ｄｉａｎｇｓｕ Ｅｎｔｒｙ．Ｅｘｉｔ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ｂｕｒｅａｕ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００００ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｏｐｏｌｉｓ（ｉ．ｅ．ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｐｈｅｎｏｌ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｔｅｒｐｅｎｅｓ），ｈｅａｖｙ ｍｅｔａｌ，ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ａｎｄ ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｌｙ ｒｅｖｉｅｗｅｄ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｐｒｏｐｏｌｉｓ；ｆｉａｖｏｎｏｉｄｓ；ｐｈｅｎｏｌ ａｃｉｄｓ；ｔｅｒｐｅｎｅｓ；ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ 一８７―.
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