有谁知道计算机基础实验挂了需不需要去做实验啊？？？_华中农业大学吧_百度贴吧
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有谁知道计算机基础实验挂了需不需要去做实验啊？？？
杜杜补习班开学啦
不是实验挂了补实验，理论挂了补理论么？？
不需要的～～我以为我可以逗你笑你就会喜欢上我，但是我居然输给了让你哭的人
不用因为实验你没办法补选，所以考试的时候去考就行了。
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为兴趣而生，贴吧更懂你。或&&&&&&&实验例&&&&
KOD FX 来自客户的实验例13
以下为来自各位老师的KOD FX使用例，希望能对大家的实验有所帮助。
实验例13：用DGGE法对沿海生息的植物-浮游生物(隐藻cryptophyta)的多样性分析
【基因名】PsbA（光化学体系II反应中心的D1蛋白 ）
特别是以隐藻（Cryptophyta）为目的片段
【样品】海水性过滤膜（Millipore公司的Durapora）过滤的样品
【样品配制方法】
在过滤后的过滤膜里添加溶解液1ml、55℃条件下处理1小时
→去除过滤膜、离心（10,000×g,
10分钟）处理
→上清1~1.5μl作为模板使用
●溶解液组成：20mM
Tris-HCl(pH8.0), 5mM EDTA,
0.3% SDS, Proteinase K
【片段长】约350bp
【引物序列】
Primer F：5'-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGTCCCGCCGCCC
CCGCCCCATGCGTCCTTGGATTTCTGT -3' (60mer)
R：5'-CCARATACCTACAACTGGCCATA-3' (23mer)
【PCR条件】
PCR grade water
2×PCR buffer for KOD
(5pmol/μl）
Primer R (5pmol/μl)
(1.0U/ ml)
　 　 　 　　 　　 　
-----------------------------------------------------------------
【PCR循环】
94℃　2 min
(98℃　10 sec, 55℃　30 sec, 68℃　10 sec)×35cycles
其他公司产品按推荐的条件。
【数据提供】
水产综合研究中心　东北区水产研究所
奥村 裕 老师
【来自老师的评语】
通常用A公司通用型酶（Taq Base）总是不能很顺利地进行PCR，测序时，使用A公司通用型酶 +
B公司粗样品用PCR添加剂反应后再进行TA克隆。由于PCR添加剂粘性很高，用琼脂糖凝胶电泳确认没有问题，但如果PCR产物未经纯化用于DGGE时条带就会出现弥散，改变凝胶浓度、变性剂浓度也无法得到改善。
FX，无需抽提DNA即可进行PCR，且能顺利进行DGGE。看了公司网页上所述，使用ProK、SDS后的样品需要纯化，但不纯化直接PCR也能得到很好的结果。循环数一开始尝试了30个循环，但35个循环更好。此外，开始很担心GC发卡结构的引物能否顺利扩增，最终证明也没有问题，顺利地进行了PCR。您的位置： &
PCR-DGGE技术分析浸矿体系细菌群落结构的实验优化
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仪器名称：JY-TD331变性梯度凝胶电泳_DGGE实验
英文名称：
国产/进口：进口
产地/品牌：JY-TD331变性梯度凝胶电泳_DGGE实验_基因突变检测_DNA变异实验
：JY-TD331变性梯度凝胶电泳_DGGE实验_基因突变检测_DNA变异实验&
参考报价：
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产品类别：
JY-TD331变性梯度凝胶电泳_DGGE实验_基因突变检测_DNA变异实验泳
&凝胶面积(W&L) ： 16&16cm&
&凝胶厚度 ： 1mm&
&梳子齿数 ： 21、35；（选配15、1、2）&
&凝胶板数 ： 双板&
&缓冲液容积 ： 6.5升&
JY-TD331变性梯度凝胶电泳_DGGE实验_基因突变检测_DNA变异实验泳
◇DGGE变性梯度凝胶电泳系统被广泛应用于基因突变检测及相关研究。
◇产品性能指标
&配一体化梯度混合器和原位制胶器；
&缓冲液垂直直板搅拌桨，缓冲液温度均匀度可达到&0.5℃；
&内置微型缓冲液循环泵；
&侧开式安全盖，省时省力，便于加样操作（国际首创）,开盖断电；
&微电脑控制三恒电泳电源；
& （CE安全认证，医疗器械注册证、CMC计量器具制造证）
&最大输出：600V/ 500mA/300W；
&具有过压、过载自动检测及报警功能；
&可同时显示全部设置参数和输出状态；
&采用绝缘阻燃材料注塑成型的模具外壳，工艺先进；
&可储存10个程序，并有自动记忆功能；
&定时范围：1分钟~100小时；
&配保护外套的温度控制探头，防止操作人员因失误损伤探头；
&配缓冲液面高度安全浮动开关，防止缓冲液容量不足时影响实验效果及损伤仪器。
产品信息来源于：
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联系电话：9&
联系人：张秋顺&& QQ：
郑州博邦科贸有限公司是一家以分子生物实验仪器的渠道销售及厂家技术服务与售后为主营业务的科技公司。随着近几年的发展，公司在全省范围内独家代理产品得到不断完善和扩充。突出了分子生物实验，从样品---提取----纯化---检测---分析--- 到耗材供应的一条龙服务。逐渐成为河南地区特色鲜明，主题突出的一家仪器设备及耗材渠道供应商。通过我们自身今后的不断努力，愿博邦能够更好的为广大仪器设备经销商和用户提供更加优质的全方位服务。
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中国生物器材网 电话：021-关于DGGE，请教 - 实验交流 - 生物秀
标题: 关于DGGE，请教
摘要: [关于DGGE，请教] 最近初做DGGE，银染后，图谱如下：（1）点了两个样，每个样两个平行，图中A1,A2 和BI,B2，为何其他泳道也扩散严重，胶制好后过夜室温干燥的。样品量是16微升。缓冲室1*TAE，60度，130V，8 5个小时。(2) A、B样品实质是 同一个样品中提取DNA后， 一个用V3区引物，一个用是 关键词:[引物 条带 变性 条件 扩增]……
最近初做DGGE，银染后，图谱如下：
（1）点了两个样，每个样两个平行，图中A1,A2 和BI,B2，为何其他泳道也扩散严重，胶制好后过夜室温干燥的。样品量是16微升。缓冲室1*TAE，60度，130V，8.5个小时。
(2) A、B样品实质是 同一个样品中提取DNA后， 一个用V3区引物，一个用是是V6-V8区引物。
（3）图谱最上面的弧形，难道是边缘效应？
高手请帮助下，非常感谢！
回复帮你顶一下吧:tiger05:回复是不是胶放置时间太长了？我们一般做好胶后两三个小时就用回复各位大侠给出出主意
变性胶的浓度范围45%--65%，胶的浓度是8%，片段是250bp左右，电泳16小时，电压100V，电流40mA。DGGE的图片上下反掉啦，由于拍得太大，点样孔没有拍出来。各位大虾多给意见。
相信楼主的问题已经解决啦，给小弟我出出主意。万分感谢
各位大侠给出出主意
变性胶的浓度范围45%--65%，胶的浓度是8%，片段是250bp左右，电泳16小时，电压100V，电流40mA。DGGE的图片上下反掉啦，由于拍得太大，点样孔没有拍出来。各位大虾多给意见。
相信楼主 ... 从图上无法看出问题的症结，影响因素太多了。
建议变性胶 的浓度范围做个调整，试试看回复
各位大侠给出出主意
变性胶的浓度范围45%--65%，胶的浓度是8%，片段是250bp左右，电泳16小时，电压100V，电流40mA。DGGE的图片上下反掉啦，由于拍得太大，点样孔没有拍出来。各位大虾多给意见。
相信楼主 ... 你的PCR产物有非特异扩增呀。相信你是使用的338,518R的V3区引物，如果是这样的话，你的DGGE条件是没有大问题的。图做的不好，跟胶做的好坏关系很大。回复
你的PCR产物有非特异扩增呀。相信你是使用的338,518R的V3区引物，如果是这样的话，你的DGGE条件是没有大问题的。图做的不好，跟胶做的好坏关系很大。
我也是这样认为的，因为是第一次做，只是看了很多资料，实际操作以前也没有进行过，我们学校几个会做的也走啦，郁闷呀，看来只有慢慢做啦。
还有什么好的建议给小弟吗？期待中.........回复做DGGE，我也遇到，条带不清晰地问题。
本人研究环境细菌，16s V3区，引物为GC-341F和534R，PCR条带很亮。
DGGE条件为：10%胶浓度，40%-60%，60V，15h，EB染色25min。
之前有几次跑的很不错，但是最近又陷入泥泽，我认为是胶的原因，但一直没找到原因，恳请大虾们伸出援手。
回复北京华美锐公司是一家专门代做DGGE实验的公司
1.技术路线如下﹕
客户提供样本，公司负责从样本中提取DNA，设计与合成检测片段特异性PCR引物， PCR扩增，PCR产物纯化，变性梯度凝胶电泳，PAGE切胶回收，二次PCR扩增，琼脂糖切胶回收，TA克隆测序，信息(bioinformation)(bioinformation)(bioinformation)(bioinformation)学分析对PCR产物进行单向测序后分析所检测信息。
2.我们为您提供的结果
提交结果包括：PCR结果的胶图、PCR产物的变性梯度凝胶电泳分析图、主要电泳条带的序列测定及其序列分析、测序峰图及序列，测序结果分析报告。
有需要代做DGGE实验的朋友请联系
做DGGE，我也遇到，条带不清晰地问题。
本人研究环境细菌，16s V3区，引物为GC-341F和534R，PCR条带很亮。
DGGE条件为：10%胶浓度，40%-60%，60V，15h，EB染色25min。
之前有几次跑的很不错，但是最近又陷入泥 ... 我用的也是这个引物，但是是8%的胶浓度，总是跑不出来好的条带，条带都很少，为什么你用10%的啊，之后跑出来怎么样啊，求赐教，我快被折磨死了:cry::cry::cry::cry:
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