请问各位耳蜗痛如何做组化，要出去盖膜吗，需要脱钙吗，请求详细流程。

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-03-25 15:34 标签： 奥地利耳蜗
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SMADs基因在小鼠内耳听觉器官发育中的信号调控作用.pdf84页
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中国人民解放军军医进修学院;中国人民解放军总医院
硕士学位论文
SMADs基因在小鼠内耳听觉器官发育中的信号调控作用
姓名：宇雅苹
申请学位级别：硕士
专业：耳鼻咽喉科学
指导教师：杨仕明
军医进修学院硕士学位论文
Tmnsfominggrowthfactor-fl转化生长因子-p
骨形态发生蛋白
morphogeneticproteins
Smads受体调节型Smads
Receptor-activated
l-Smads CommonSmads
通用型Smads
Co-Smadsanti-Smads
抑制型Smacks
buffersaline
磷酸盐缓冲液
苏木素．伊红
Hcmatoxylin-eosin
Embryonicday
Innerhaircell
Outerhaircell
oticvesicle
MYo Myosin
Scalamedia
Striavascularis
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全耳蜗基底膜硬铺片法的改进和组化观察
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【原创】大家帮着看看，我的大鼠耳蜗冰冻切片为什么总是有点挤压过的感觉
近期做了很多个SD大鼠耳蜗的冰冻切片。可是很少有完全理想的，总感觉像被挤压牵拉过一样。前庭膜比较弯曲，Corti器也有点皱，有时有血管纹的脱离，尤其以底圈比较严重。以下是我的步骤，大家帮忙分析一下
1。 断头取耳蜗，迅速4%多聚甲醛固定。用针挑破圆窗和卵圆窗，用针尖在蜗顶戳个洞，用滴灌吹多聚甲醛四次。（我的蜗尖的洞总是戳不好，要么用力过度，把耳蜗戳破一大洞，要不不敢戳，戳不出洞）
2。4%多聚甲醛固定过夜
3。在显微镜下修剪去多余的碎肉，剪掉多余的骨质。
3。换EDTA脱钙7-8天
4。15%糖脱水半天
5.30%糖脱水过夜
6。浸胶半天
7。冰冻切片大家帮我分析一下吧。我做了很多个老鼠了。不想再浪费老鼠的生命了相对其他切片来说，冰冻切片效果本来不好，如果觉得标本中的结构有推移可能是刀片不够快了，不知道你是用的磨刀还是一次性的刀片，前者可以放在磨刀机上磨一磨，后者可以更换。前庭膜弯曲是正常的，大概除了火棉胶其他切片多数如此。蜗顶戳洞很简单，持针的手要注意制动的力量，就像我们用凿子不能高持凌空，手指应该有支点，可以随时制动，避免跳凿。可以脱钙之后再修剪标本，去除骨质比较软，容易操作。你可以把片子照片贴上来看看效果，空说意义比较小。谢谢cyberake， 我用的是一次性刀片。感觉前庭膜要不像弧形，要不就皱巴巴的，或者干脆断掉。我觉得脱钙后修剪好像效果不是很好，会不会那时太软了更容易牵扯到。
下面是我的一张图，请指点：
10 10-10（7).jpg (273.5k)为什么你的照片是反相的？可能是你的照片拍得焦距不很清楚，从照片上看效果确实不太好。不知道你的切片多少厚，从照片上看细胞结构非常不清晰，盖膜也不见了。染色也有问题，细胞核都看不清楚了。不知道你有没有作过常规石蜡切片，我想看看你的石蜡切片的效果。我的经验是，从事冰冻或者其他特殊切片之前，最好先做做常规石蜡切片，有了经典的石蜡切片的经验，做其它的就有底了，甚至你可以把标本给病理科让他们代作（一般包埋可能还是要你动手摆放位置的的），如果效果可以，至少你处理标本没有大问题。我已经说过前庭膜除了缓慢脱水的火棉胶之外，都不是直的，这也是为什么研究内淋巴积水时，为了观察膜蜗管的膨胀前庭膜的膨隆研究者喜欢采用费时的火棉胶切片。脱钙之后坚硬的耳蜗变得有些像软骨质地，修剪起来很方便，不会牵扯到需要保留的结构，相反，如果不脱钙，有的时候反而比较脆，容易裂。我的感觉是这样的。关于内耳切片问题，我有过集中的讨论：>你还可以继续检索参考。太谢谢cyberake了。我没做过常规石蜡切片。我们医院做这个不大方便，病理科不是很欢迎研究生到他们那里做切片。真是可怜。
祝cyberake五一快乐哦我发现我做的荧光和你的做出来好像，哈哈，刚打开还以为是自己的图片没关呢！你做的是什么的荧光染色？会不会是前庭膜上没有靶抗原，所以没有染色呢？
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