大肠杆菌平板计数数实验如何算总菌数

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-05-11 06:30 标签： 对酵母菌计数
平板菌落计数测定大肠菌群时,平板菌落计数的选择和细菌菌落总数的测定时的选择有什么区别?
平板菌落计数测定大肠菌群时,平板菌落计数的选择和细菌菌落总数的测定时的选择有什么区别?
全部按照10版国家标准进行比较.菌落总数平板法：培养基为PCA；培养条件为,36摄氏度48小时；计数有效范围,30—300CFU/皿；计数方法为,直接计数.大肠菌群平板法：培养基为VRBA；培养条件为,36摄氏度24小时；计数有效范围,15—150CFU/皿；计数方法为,需“证实实验”再计数.
与《平板菌落计数测定大肠菌群时,平板菌落计数的选择和细菌菌落总数的测定时的选择有什么区别?》相关的作业问题
根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=234÷0.1×106=2.34×109．故选：B．
涂布法是先加培养基,待培养基冷却后再加一定体积的菌液（可做适当的稀释）,用涂布棒涂布均匀.倾倒法就是先加一定体积的菌液然后加培养基一起混匀,待冷却后倒置培养,这种方法也叫混菌法.一般来说,用涂布的方法多一点~
所谓菌落,就是指长在固体平板上的.所以菌落计数法和稀释涂布计数法就是一码事,两个名称而已.
只有得到菌落数目在30-300的平板,才说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数
太稀!MD我做组培就是的,最后植物组织全沉琼脂里淹死了,可惜我最后的实验.你把琼脂粉弄多点.
大肠菌群并不完全由菌落形态来判断,不典型的菌落形态但是符合大肠菌群的定义也属于大肠菌群.大肠菌群：在37度环境下,耐受胆盐,发酵乳糖,产酸产气,革兰氏阴性无芽胞杆菌.也就是说,即使长出来的菌落完全没有典型特征,但是符合上述特点,那么它就属于大肠菌群. 再问： 感谢您。但是我又从去氧胆上挑了几个菌落于BGLB，但没有产气
一般10mm左右的平板需要10~15ml的固培,稍厚些可以倒上20ml.那么1000ml可以一般可以倒50块平板以上.平板固培厚度还要看你具体需要了,你想时间放长那可以倒厚点.太薄的平板不要冒险用哦,小心菌长起来之前平板就先干掉!菌落不均匀我帮你分析下,你参考看看吧.①平板底部补平,培养基也不够厚；或者倒培养基的时候有
一个细菌会成为一个菌落,这些小的是原来沾上的一个个细菌生长成的,有可能是接种时飘落的芽孢,或是培养皿中有细菌意外飞出了,反正这些是不可能消除的,实验总会有误差.
显微计数法记的是活的死的都可的菌落稀释涂布平板法只能记活的菌落希望对你有帮助 不懂欢迎追问
只要是菌落就都要计数进去.如果太小了不好判断,就让它再长一会儿,不变大的,仍旧十分细小的,基本上就不是了.
这很正常,一般做蓝白斑挑斑会更精确,不过现在的连接酶成功率很高,不少已经达到90%以上,但仍然存在只转化了质粒而未连接成功目的条带的菌落.所以挑斑时一般要多挑几个,而且选单菌落,可以画圈圈分散开来挑斑.
ABCD、用紫外线照射红色细菌的培养液，几天后出现了一个白色菌落，把这个白色菌落转移培养，长出的菌落全是白色的，这种变异是人工诱变，ABD错误；C错误．故选：C．
琼脂平板就是培养基,可以给细菌提供充足的养分生长,所以当有一个肉眼眼不看的细菌落在琼脂平板上,经过合适的温度和时间就可以繁殖成一个肉眼可见的菌落了,有多少个活着的细菌就可以生长繁殖成相应数量的菌落,这就是活菌计数的原理.
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后面划得细,菌稀少,容易生长,前面菌太密,互相抢夺营养,自然没有后面长的好.
血球计数法适用范围：个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌等.不适用于细菌等个体较小的细胞,因为（1）细菌细胞太小,不易沉降；（2）在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离.优点：快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞缺点：死的活的都要进行计数,因为我们肉眼无法区分.平板活菌计数法适用
图中每二个计数点间隔时间为T=0.04s,左面三段不规则,舍去.现取后6段减速运动为研究对象.用逐差法公式a=[(s6+s5+s4)-(s3+s2+s1)]/(3T)^2=[（7.07+7.68+8.33）-（8.97+9.61+10.25）]*10^-2/0.12^2=-5.77*10^-2/0.12^2=-4m/s
EMB平板中含有乳糖和指示剂,大肠菌群发酵乳糖后变酸,指示剂显红色,因此挑红色的菌落进行复发酵.
在水平的滑面上（非光滑面）先给物体一个初速度V0,然后让物体自己运动直到停下为止,测从开始到停止时所用的时间,在测出物体的重力F,有公式ug=a,就可以算出来了!关键是球物体的加速度.其实测的时间不用是到物体停止时,侧一段时间就可以了!关键就是求那加速度.您所在位置： &
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实验七 平板菌落计数与接种.ppt 22页
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实验七 平板菌落计数与接种
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平板菌落计数与接种 一、目的要求 二、实验原理 三、实验材料 四、实验过程 五、实验任务 六、思考题
一、目的要求 学习平板菌落计数的基本原理和方法
练习微生物接种和培养的基本技术，掌握无菌操作技术
二、实验原理
将待测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已趋向使用菌落形成单位(cfu)，而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。 三、实验材料 样品：取土 试剂和仪器： 无菌水、无菌培养皿、无菌吸管、记号笔、接种环、接种针、酒精灯、标签纸、水浴锅 2人/组：
稀释平板计数用：6只平皿、2根三角玻棒、2支装9ml无菌水的试管、 4根无菌吸管、牛肉膏培养基；
接种用： 2支液体牛肉膏蛋白胨培养基、2支半固体牛肉膏蛋白胨培养基、2支黄豆饼粉固体斜面培养基。
四、实验过程 （一）平板菌落计数
（二）微生物的接种
（一）稀释平板菌落计数 1、 编号与稀释:
每组取无菌平皿6只，一个稀释度做3只。标明10－3 和10－4各3只。 2、制备土壤稀释液：
称取土壤1g，制备10－2 土壤稀释液，再取4只 无菌试管稀释制备10－3
、10－4菌液。 3、倒平皿与平板涂布：
取已熔化的牛肉膏蛋白胨培养基，倒入平皿中，冷却凝固。分别吸取 0.1 ml上述制备的10－3或10－4菌液玻棒涂布，室温静置5－10 min，使菌液吸附进培养基，倒置于37 0C恒温培养24 h。
4、观察细菌菌落形态以及计数菌落：
培养24 h后，取出培养皿数菌落数，算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数，并按下列公式进行计算：
每ml 中菌落形成单位（cfu）＝同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×10
5、计算出每g土壤中细菌的数量：
即用某一培养皿内细菌的菌落数乘以该培养皿接种液的稀释倍数即得。 接种方法：
常用的有斜面接种法、平板接种法、液体接种法、试管深层固体培养基的穿刺接种法。 接种工具：
常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等。 （1）斜面接种法（1支试管/人）
使用黄豆饼粉斜面培养基，用接种环从平皿上挑取放线菌或霉菌单菌落。 左手平托两支试管，拇指按住试管底部。外侧使是菌种试管，内侧是待接的空白斜面。（两支试管的斜面同时向上），右手将棉塞旋松，以便在接种时容易拔出。 右手拿接种环，在火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管的其余部位也过火灭菌。 将两支试管的上端并齐，靠近火焰，用右手小指和掌心将两支试管的棉塞一并夹住拔出，棉塞仍夹在手中，然后让试管口缓缓过火焰。 将已灼烧过的接种环伸入外侧的菌种试管内。先冷却，而后再用环沾取一定量的菌苔，将沾有菌苔的接种环抽出试管。 迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部，轻轻向上划线（直线或曲线）。 接好种的斜面试管口再次过火焰，棉塞底部过火焰后立即塞入试管内。 将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼，使其干燥后，再在外焰中烧红，以免菌苔骤热，使菌体爆溅，造成污染。 放下环后，再将棉塞旋紧，在试管斜面上距试管口2～3cm处贴上标签。 280C恒温培养。 试管拔塞后过火灭菌和取菌 斜面划线法（a）和不同细菌直线接种长出的菌苔形态（b） （2）液体接种法（1支试管/人）
使用牛肉膏蛋白胨液体培养基。
用接种环从平皿上挑取细菌单菌落，接入液体培养基。 放下环后，再将棉塞旋紧，在试管斜面上距试管口2～3cm处贴上标签。 37 0C恒温培养。 （在培养量比较大的情况下，液体接种宜采用移液管接种，同时要求无菌操作。）
（3）穿刺接种（1支试管/人）
使用牛肉膏蛋白胨半固体培养基。用接种针从平皿上挑取细菌单菌落，接入半固体培养基。 用接种针经火焰灭菌后，沾取少量菌种，垂直地穿入试管固体培养基中心至底部，然后沿着原接种线将针拔出，要做到手稳、动作轻巧迅速，最后塞上棉塞。再将接种针上残留的菌体在火焰上烧掉。 在试管斜面上距试管口2～3cm处贴上标签。 37 0C恒温培养。
五、实验任务 1、2人一组:
6只平皿稀释平板计数，做2个稀释度。24 h观察并计数。
做1支斜面接种（接放线菌或霉菌），1支液体接种（接细菌），1支半固体穿刺接种（接细菌
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