将蒽酮硫酸法试剂加入到水中会有什么样的反应

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-05-17 10:11 标签： 蒽酮硫酸法
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【求助/交流】蒽酮比色法测定可溶性糖
测定可溶性糖时，在葡糖糖标准液中加入蒽酮试剂后，出现了黄色絮状物质，吸光度多为负值，标线都做不出来，是什么原因造成的？应该怎么解决呢？
葡萄糖标准液中加入硫酸蒽酮后，沸水浴15 min，冰水冷却5 min，之后室温平衡10 min，再测定吸光度值。楼主具体操作是什么？ 这样的事情&&如果方法没错···都是你的试剂纯度不够或者器具不净！ 重新做几次，可能有污物。。。 除了上述同学说的可能外，蒽酮-硫酸溶液的量加的够么？我之前碰到过类似的问题。。。 显色剂变质了 Originally posted by guolala000 at
除了上述同学说的可能外，蒽酮-硫酸溶液的量加的够么？我之前碰到过类似的问题。。。 我是标准液5ml，硫酸蒽酮试剂5ml，这个是由标准液的葡萄糖含量决定的吗？你是怎么解决这个问题的呢？ 试管中水太多了
蒽酮与糖反应的产物是深蓝色的，这种物质再遇到水后就生产黄色絮状物质 重新配置硫酸蒽酮溶液，这个必须现配现用 Originally posted by 马哈鱼 at
我是标准液5ml，硫酸蒽酮试剂5ml，这个是由标准液的葡萄糖含量决定的吗？你是怎么解决这个问题的呢？ 那应该就是这个原因了，因为蒽酮溶于硫酸，不溶于水，我用76%的硫酸配的蒽酮，在葡萄糖液和硫酸蒽酮试剂比例小于1：3（还是1：4，记不清了，后来学生实验用的1：4，好计算）实验可成功，楼主1：1是不行的。葡萄糖浓度配高点，减小体积（控制反应物比例）就好了。 Originally posted by 香菱儿 at
试管中水太多了
蒽酮与糖反应的产物是深蓝色的，这种物质再遇到水后就生产黄色絮状物质 Sample TextSample Text总糖试液中加入蒽酮，煮沸10分钟后，出现深蓝色，实验中有出现这一现象，可是这样如何测得吸光度，请帮忙指导一下 Originally posted by 素素的世界 at
Sample TextSample Text总糖试液中加入蒽酮，煮沸10分钟后，出现深蓝色，实验中有出现这一现象，可是这样如何测得吸光度，请帮忙指导一下 深蓝色就对了，不要煮时间太长啊（比如超过10几分钟），时间太长就发生其他的反应了，产物的吸光度值就变了！ : Originally posted by 香菱儿 at
试管中水太多了
蒽酮与糖反应的产物是深蓝色的，这种物质再遇到水后就生产黄色絮状物质 可是葡萄糖溶液里也有水呀，而且稀释的浓硫酸里也有水呀。。。。 : Originally posted by 香菱儿 at
深蓝色就对了，不要煮时间太长啊（比如超过10几分钟），时间太长就发生其他的反应了，产物的吸光度值就变了！... 我想问一下，要是煮的时间太长，会发生什么其他物质，吸光度值会变大吗？求指教啊，谢谢
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Ⅳ.&Fehling试验&Ⅴ.Benedict试验&Ⅵ.&Barfoed试验
试剂甲：称取34.5g硫酸铜溶于500mL水中。
试剂乙：称取125g NaOH 137g酒石酸钾钠溶于500mL水中，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。临用前，将试剂甲和试剂乙等量混合。
1%葡萄糖溶液；1%蔗糖溶液；1%淀粉溶液。
取试管，编号，各加入Fehlin试剂甲和乙1mL。摇匀后，分别加入4滴待测糖溶液，置沸中加热2 ~ 3min，取出冷却，观察沉淀和颜色变化。
Ⅴ. Benedict试验
Benedict试剂是Fehling试剂的改良。Benedict试剂利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂，其碱性较Fehling试剂弱，灵敏度高，干扰因素少。
Benedict试剂：将170g 柠檬酸钠和100g 无水碳酸钠溶于800mL水中；另将17g硫酸铜溶于100mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅，最后定容至 1000mL。 该试剂可长期使用。
1%葡萄糖溶液；1%蔗糖溶液；1%淀粉溶液。
取试管，编号，分别加入2mL Benedict试剂和4滴待测糖溶液，沸水浴中加热5分钟，取出后冷却，观察各管中的颜色变化。
Ⅵ. Barfoed试验
在酸性溶液中，单糖和还原二糖的还原速度有明显差异。Barfoed试剂为弱酸性。单糖在Barfoed试剂的作用下能将Cu2+还原成砖红色的氧化亚铜，时间约为3分钟，而还原二糖则需20分钟左右。所以，该反应可用于区别单糖和还原二糖。当加热时间过长，非还原性二糖经水解后也能呈现阳性反应。
Barfoed试剂：16.7g 乙酸铜溶于近200mL水中，加1.5mL冰醋酸，定容至250mL即可。
1%葡萄糖溶液；1%蔗糖溶液；1%淀粉溶液。
取试管，编号，分别加入2mL Barfoed试剂和2 ~ 3滴待测糖溶液，煮沸2-3分钟，放置20分钟以上，比较各管的颜色变化。
（1）Molish反应非常灵敏，0.001％葡萄糖和0.0001％蔗糖即能呈现阳性反应。因此，不可在样品中混入纸屑等杂物。当果糖浓度过高时，由于浓硫酸对它的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈紫色，需稀释后再做。
（2）果糖与Seliwanoff试剂反应非常迅速，呈鲜红色，而葡萄糖所需时间较长，且只能产生黄色至淡黄色。戊糖亦与Seliwanoff试剂反应，戊糖经酸脱水生成糠醛，与间苯二酚缩合，生成绿色至蓝色产物。
（3）酮基本身没有还原性，只有在变成烯醇式后，才显示还原作用。
（4）糖的还原作用生成氧化亚铜沉淀的颜色决定于颗粒的大小，Cu2O颗粒的大小又决定于反应速度。反应速度快时，生成的Cu2O颗粒较小，呈黄绿色；反应速度慢时，生成的Cu2O颗粒较大，呈红色。溶液中还原糖的浓度可以从生成沉淀的多少来估计，而不能依据沉淀的颜色来判断。
（5）Barfoed 反应产生的Cu2O沉淀聚集在试管底部，溶液仍为深蓝色。应注意观察试管底部红色的出现。
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易生物VIP企业推荐蒽酮比色法测定食品中的总糖及意义
来源/作者：中国标准物质网　　日期： 9:39:52
(一)食品中总糖的意义
食品中含有多种糖类，食品中的总糖通常是指具有还原性的糖(葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等)和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。作为食品生产中的常规分析项目，总糖反映的是食品中可溶性单糖和低聚糖的总量，总糖的含量对产品的感官质量、组织形态、营养价值、成本等有一定影响，因此许多食品如麦乳精、糕点、果蔬罐头、饮料等的质量指标中都有总糖这一项。
食品中总糖测定方法包括直接滴定法、蒽酮比色法等。
(二)蒽酮比色法
单糖类遇浓硫酸时，脱水生成糠醛衍生物，它与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，当糖的量在20～200mg范围内时，其呈色强度与溶液中糖的含量成正比，故可比色定量。该法是微量法，适合于含微量碳水化合物的样品，具有灵敏度高、试剂用量少等特点。
1．标准曲线的制作
称取1.0000g葡萄糖，用水定容到1000mL，从中吸取lmL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL分别移入100mL容量瓶中，用水定容，即得lOmg／mL、20mg／mL、40mg／mL、60mg／mL、80mg／mL、100mg／ml，葡萄糖系列标准溶液。吸取系列标准溶液和蒸馏水各2mL，分别放入7支具塞比色管中，沿管壁各加入蒽酮试剂10mL，立即摇匀。放入沸水浴中准确加热10min，取出并迅速冷却至室温，在暗处放置10min，用1cm比色杯，以零管调零点，在620nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
2．样液测定
吸取样品溶液(含糖20～80mg／mL)和蒸馏水各2mL，分别放入2支具塞比色管中，其余方法同上，测定吸光值，根据样品溶液的吸光值查标准曲线，得出含糖量。
3．结果计算
X=c*稀倍数*10-4
式中 x――样品总糖(以葡萄糖计)的质量分数，％；
c――从标准曲线查得的糖浓度，mg／mL；
10-4――将mg／mL换算为％的系数。
①10～100mg／mL葡萄糖系列标准溶液。
②0.1％蒽酮溶液：O.1g蒽酮和1.0g硫脲，溶于100mL 72％硫酸中，储存于棕色瓶中，于0～4℃下存放。
5．注意事项
①该法有几种不同的操作步骤，主要差别在于蒽酮试剂中硫酸的含量(66％～95％)、取样液量(1～5ml)、蒽酮试剂用量(5～20mL)、沸水浴中反应时间(6～15min)和显色时间(10～30min)，这几个操作条件之间是有联系的，不能随意改变其中任何一个，以免影响分析结果。
②反应液中硫酸的含量高达60％以上，在此酸度条件下，于沸水浴中加热，样品中的双糖、淀粉等会发生水解，再与蒽酮发生显色反应。因此测定结果是样品溶液中单糖、双糖和淀粉的总量。
③蒽酮试剂不稳定，易被氧化变为褐色。一般蒽酮试剂应现用现配，加入硫脲是作为稳定剂，在冷暗处可保存48h。
④本法要求控制条件严格，防止误差出现，同时要求样品溶液必须清澈透明，加热后不应有蛋白质沉淀，如样品溶液色泽较深，可用活性炭脱色。&#xe602; 下载
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