鸡胚接种成纤维细胞在显微镜下的形态特征是怎样的？ 最好附带图片

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-08-12 13:28 标签： 鸡胚接种
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这个帖子发布于6年零140天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人是新手，要养鸡胚成纤维细胞和vero.鸡胚成纤维细胞是自己采鸡胚自作的，消化用的酶是国产的，用PBS涮洗，血清也是国产的。用胰蛋白酶是0.25%的，平常都放四度保存，我们消化完用两层纱布过滤，在离心。离心后看细胞浓度还行，但是用上培养液培养1d后，根本不贴壁，偶见一两个但是形态也不好。想请教一下高手。培养液是买的高糖DMEM.
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我养的细胞在倒置显微镜下，40倍，总有一些透明的点或者是不规则的类似棒状的东西，而且特别活跃，是不是支原体？
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培养液用低糖的就行，可能是新手吧，做几次就好了
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我养的也是鸡胚成纤维细胞 ，我消化完了，贴壁还行，只是增殖情况不好，不知道是不是鸡胚成纤维有什么特殊地方没，楼主细胞不贴壁可能是消化时间长的事吧
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那要是用国产酶一般消化多长时间？消化到什么程度？我一直把握不好，能不能指教一下。还有低糖和高糖的区别是什么？什么时候应该用高糖的。培养液是老师给买的。
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有人说是细胞浓度太大了，所以不贴壁了。我养了一些日子的成纤维，基本上都不贴壁，细胞都悬浮着，再过一两天细胞就都死了。还有想问一下，你们组织消化完都怎么处理。我们是用四层灭菌纱布过滤，会不会影响效果。
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消化时间是看细胞的状态，每次消化，我都是在镜下一直看着细胞状态，什么时候细胞涨圆，稍微有些飘起来，就终止消化，一般不超过3分钟。细胞密度稍微大些有利于细胞生长，我感觉和贴不贴壁没关系吧。我们用的是组织块贴壁法，不用消化法做原代，你那个我不太了解
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我做VERO的，成纤维不是很了解，但是我觉得你的消化手法确实有点问题，一般1~2分钟应该就可以了。我们Vero的都是2分钟左右。而且用的培养液糖度也不高，普通市售培养基就可以完全贴壁，长的也快。一般增殖时糖分高点，长满克氏瓶后就不怎么用高糖的了。
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