给细菌染色为什么用碱性磷酸酶染色染料？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2014-10-19 02:29 标签： 碱性染料有哪些
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实验三细菌的芽孢染色.ppt12页
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实验三 细菌的芽孢染色及放线菌形态的观察 实验目的 掌握芽孢染色法及芽孢形态 掌握印片染色法及插片观察放线菌的形态 实验原理---芽孢染色
芽孢壁比营养细胞的细胞壁结构复杂而且致密，透性低，着色和脱色较营养细胞难。采用碱性染料并在微火上加热，或延长染色时间，使菌体和芽孢同时染色后，用蒸馏水冲洗，脱去菌体颜色，保留芽孢的颜色。并用另一种对比鲜明的染料使菌体着色。 实验原理---放线菌形态的观察 实验器材 1、材料
枯草芽孢杆菌；吸水链孢霉；紫色直丝链孢霉 2、试剂
孔雀绿染液（5%），复红染液 3、其他
接种环、木夹、刀片等 实验步骤---芽孢染色 （1）制片
（2）孔雀石绿染色 ：加孔雀绿染液覆盖涂片区,再用木夹夹住载玻片，在微火上加热，致蒸汽徐徐冒出，保持1min （3） 冷却 、水洗、吸干
（4） 复红复染1~2min
（5） 水洗、吸干
镜检 实验步骤---印片染色法观察吸水链孢霉 印片→微热固定→石炭酸复红染色 1min→水洗→晾干→镜检
实验步骤---插片法观察紫色直丝链孢霉 用镊子轻轻取出紫色直丝链孢霉平皿中的盖玻片。
将盖玻片直接放在一块干净的载玻片上镜检。
效果如果不理想,可以用印片法观察紫色直丝链孢霉,方法同吸水链孢霉的观察. 实验作业 绘出芽孢杆菌芽孢及菌体形态图;绘出吸水链孢 霉及紫色直丝链孢霉孢子及菌丝的形态。 实验思考题 1．试比较两种观察放线菌方法的优缺点。 2．镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？ * * 印片：用解剖刀取放线菌培养体一块，将菌面朝上放在一载玻片上，另取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（“印”）在后一块载
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导读： 显微镜是观察细菌形态的必备仪器。分为光学显微镜和电子显微镜。光学显微镜有普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等。
显微镜是观察形态的必备仪器。分为光学显微镜和电子显微镜。光学显微镜有普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等。 检验地带网
1.不染色可以观察细菌的动力及运动等活体状况，由于细菌的折光性不强，不能清楚的看到细菌的形态特征和结构。 检验地带网
标本的制作悬滴法、压滴法和毛细管法，后者主要用于厌氧菌的动力观察。用普通光学显微镜、暗视野显微镜或位相差显微镜观察。
2.染色标本的形态检查 检验地带网
细菌的染色可能是由于毛细管现象和染料的渗透作用、染料的溶解和吸收作用使染料进入细胞内，或由于电荷的吸附和结合使细菌着色。也可能与细菌细胞内的化学成分有关。此外细菌的染色性与细菌细胞膜的通透性、细胞结构的完整性，以及培养基的种类、菌龄，染色液的离子强度、pH，染色温度等密切相关。 检验地带网
中常用的染料： 检验地带网
酸性染料& 细菌一般情况下都带负电荷，故酸性染料一般不着色。如刚果红、伊红等。 检验地带网
碱性染料& 细菌一般情况下都带负电荷，因此能与细菌结合，细菌学检查中常用此类染料。如美蓝、结晶紫和碱性复红等。 检验地带网
复合染料& 如姬姆萨染料，是碱性和酸性染料的复合物。
单纯染料& 如苏丹类染料，溶于脂肪溶剂中，不溶于水，化学亲和力低。 检验地带网
3.染色方法
应先制作细菌涂片。方法有单染色法和复合染色法。
（1）革兰染色法& 染液由革兰结晶紫染液、革兰碘液、95%酒精和稀释石炭酸复红（沙黄）组成。革兰阳性菌为紫色，革兰阴性菌呈红色。 检验地带网
影响因素：涂片过厚将使脱色不完全，酒精脱色时间过长将导致过度脱色；染液储存过久由于蒸发而影响浓度，特别是碘液久存或见光而形成碘酸，失去媒染作用；95%酒精如果密封不佳易挥发，失去脱色作用；细菌形态学检查以对数生长期的细菌形态最为典型，菌龄过长易致阴性。 检验地带网
（2）抗酸染色法& 染液由石炭酸复红、3%盐酸酒精和美蓝组成。抗酸菌呈红色，非抗酸菌和细胞呈蓝色。 检验地带网
本法主要用于结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌的检查，每张载玻片上只能涂1份标本，最好使用新玻片，否则必须彻底清洗干净。染色使不得使用染色缸，吸水纸1片1张不得重复使用。脱色时间不得过短。为了防止感染可将标本先进行高压蒸气灭菌，然后进行抗酸染色。 检验地带网
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给细菌染色为什么用碱性染料？
提问者采纳
pH值大约在2—5之间，菌体蛋白质电离后带阴电荷、碱性或弱酸性溶液中，故在中性细菌的等电点较低。因此；而碱性染料电离时染料离子带阳电，带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。所以
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