好的孕酮低单抗应具备什么条件

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醋酸甲羟孕酮单克隆抗体制备及ELISA检测方法的建立
发布时间:
【题 名】醋酸甲羟孕酮单克隆抗体制备及ELISA检测方法的建立
【作 者】韩雪清[1] 杨泽晓[2] 张彦明[3] 林祥梅[1] 刘建[1] 梅琳[1]
【机 构】[1]中国检验检疫科学研究院,北京]四川农业大学动物医学院,四川雅安]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100
【刊 名】《西北农业学报》 2009年第18卷第1期,173-179页
【关键词】醋酸甲羟孕酮 单克隆抗体 ELISA
【文 摘】建立饲料和食品中醋酸甲羟孕酮(MPA)残留快速、灵敏的检测方法。分别以碳二亚胺法、混合酸酐法合成MPA的人工抗原MPA-BSA、MPA-OVA为免疫原和包被原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗MPA单克隆抗体(McAb),在Protein G Sepharose 4 Fast Flow纯化McAb基础上通过对ELISA反应条件的优化建立了MPA检测的间接竞争ELISA方法,并对MPA标品添加试样进行了初步应用。结果获得1株能稳定分泌抗MPA McAb的杂交瘤细胞株M68F9H9,分泌McAb腹水效价为1∶1×10^7,属于IgG1亚类,MPA半数抑制浓度(IC50)为5.0 ng/mL,具有良好特异性;以纯化McAb为基础建立的间接竞争ELISA,MPA最低检测限为0.16 ng/mL,线性检测范围为0.1-80 ng/mL;除与甲羟孕酮、甲地孕酮、盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和己烯雌酚交叉反应率分别为100%、25%、〈0.01%、〈0.01%和〈0.01%;MPA添加试样应用检测结果与进口试剂盒检测结果相符。
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(本文共计3页)
       
         
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