细胞生长动力学中的环境与胞外不一样,为什么体外动力学实验仍然在使用

微管活化NF-κB通路在动态压应力调控髓核细胞Sox9基因和Ⅱ型胶原体外表达中的作用--《第四军医大学》2011年博士论文
微管活化NF-κB通路在动态压应力调控髓核细胞Sox9基因和Ⅱ型胶原体外表达中的作用
【摘要】:椎间盘退变是一系列脊柱退变性疾病的基本病理基础。椎间盘退变性疾病是临床常见的严重危害人群健康的疾病,其往往会导致继发的椎管狭窄、脊柱节段不稳、骨赘形成、腰腿痛及椎间盘突出造成的神经根和脊髓压迫,临床多见且病情复杂,影响患者的基本生活和生产劳动,甚至导致不同程度的残疾,造成劳动力丧失,给患者造成巨大痛苦,给社会带来沉重负担。退变导致相关疾病的治疗是临床医师所面临的一大难题。一般认为椎间盘退变从20岁即开始,缓慢进展,70岁时100%的人群有间盘的退行性改变,但只是程度不同和临床症状不同。调查表明,椎间盘退变导致的脊柱疾病带来的医疗费用与心脏病相当,高于糖尿病及肾脏疾病,但目前有限的治疗方法如椎板减压、椎间融合等高度侵入性手术并发症较多且远期疗效并不理想,并且这些治疗方法也只是对症治疗,无法达到根治该类疾病的目的,并不能扭转椎间盘退变过程。研究椎间盘退变的机制和逆转方法是根治椎间盘退变性疾病的主要策略。
本课题旨在通过对导致椎间盘退变的应力因素的动态观察研究,通过完整的分子生物学调控通路研究宏观致病因素动态变化与微观病理学改变的相互关系。本课题在报道了人体髓核细胞体外动态压应力培养模型的基础上,利用课题组自行设计、研制的可用于不同细胞、不同压力条件的细胞压力培养的专用仪器装置(已获得国家专利,专利号: ZL.7)完成了人体髓核细胞最佳体外压应力刺激模型的建模工作,摸索并验证了人体髓核细胞体外动态压应力培养模型的最佳力学参数。本课题的目的在于建立实验室条件下的仿生的体外髓核细胞压应力培养模型,系统的观察动态压应力条件下的对人体髓核细胞形态和细胞骨架的影响作用;并通过完全仿生的髓核细胞压力模型,采用激光共聚焦、原子力显微镜、RT-PCR、western-blot、siRNA技术和免疫组化方法,阐明细胞骨架改变与NF-κB活化的关系和作用;压应力条件下NF-κB活化状态对髓核细胞Ⅱ型胶原表达的分子生物学调控机制,为该疾病的发病机理研究、生物治疗及防治策略的制定提供新的理论依据和实验基础。
本课题的第一部分是动态压应力在人体髓核细胞体外培养中的作用和人体髓核细胞体外动态压应力培养模型的建立。利用已经成熟的髓核细胞的培养技术培养人体髓核细胞,使用本课题组研制的压力装置对培养的髓核细胞进行动态压应力刺激培养,参照文献(Ishihara H, McNally DS, Urban JP, et al. Effects of hydrostatic pressure on matrix synthesis in different regions of the intervertebral disk[ J ]. J App l Physiol, ) : 839 - 846.)并结合前期预实验结果,选取1~10Mpa区间内不同压力参数研究其对髓核细胞的影响,确定最佳制模参数;选择生长曲线变化明显且合理的状态作为动态压应力刺激培养的标准模型(最佳制模参数为2.5Mpa 1Hz 30min)。对不同力学环境下培养的细胞进行了组织学和形态学观察,比较和分析动态压应力环境对体外培养椎间盘细胞生长动力学的影响,了解不同强度动态压应力对髓核细胞凋亡的作用:从生长速率、MTT摄取、最大生长密度、分裂指数和克隆形成率等方面对应力刺激细胞模型进行生长动力学检测;流式细胞仪鉴定细胞的活性状态通过以上指标的观察和检测,对不同力学环境对髓核细胞体外培养的作用进行了初步评价。
实验结果提示:
1.髓核组织随着随着退变程度的增加,髓核组织逐渐丧失水分,含水量随着退变程度的加重而逐渐减少,透明度随着退变程度的加重逐渐降低
2.动态压应力刺激后的细胞传代后的细胞贴壁时间明显缩短,一般于6h即可见大部分细胞贴壁,形态与原代细胞相似,但细胞的胞突略长(图2)。随着代次的增加,髓核细胞出现老化现象。一般细胞从传至第5代起,生长明显趋缓,细胞分裂指数明显低于3代细胞,从形态学角度观察发现细胞突起明显延长,逐渐趋向于梭形,胞质逐渐减少,丧失折光性,形态逐渐类似于成纤维细胞样。一般传至第7代时出现生长停滞。
3.随着加力强度的增加,髓核细胞生长速度和最大生长密度均呈逐渐下降趋势,加力强度较之频率的增加对髓核细胞影响更加明显,于传代时即出现生长停滞。
4.人体髓核细胞体外动态压应力培养过程中,细胞分裂指数、细胞克隆形成率与加力强度呈非线性的相关,适度的动态压应力刺激促进细胞分裂生长,反之对细胞的分裂生长以及功能代谢呈阻碍作用,甚至加速细胞死亡以及凋亡的进程。
5.各实验组在不同的动态压应力刺激下,1Mpa组与常压对照组没有统计学差异;当应力强度大于5Mpa时,细胞各生长动力学指标均明显低于常压对照组;2.5Mpa组与常压对照组和其他各实验组在细胞分裂指数等细胞生长动力学指标的比较中具有显著的统计学差异,说明该压力值对于促进髓核细胞体外生长和代谢功能具有明显作用,符合制模最佳参数基本要求。
本课题的第二部分是动态压应力环境下体外培养人体髓核细胞微管结构改变对NF-κB通路的活化作用。实验通过研究体外培养人体髓核细胞微管结构在动态压应力作用下的形态学改变初步阐明了动态压应力对人体髓核细胞体外培养模型微管结构的作用和影响。实验发现经2.5Mpa动态压应力作用后的髓核细胞在高倍镜下可见细胞结构变化明显,未见明显细胞死亡,24小时后细胞微管结构逐渐恢复;其余各组细胞结构变化明显,死亡细胞较多,24小时后细胞结构无恢复。经微管阻断剂预处理的髓核细胞经过加力作用后细胞形态学结构没有明显变化,β-tubulin染色荧光亮度值明显低于其他实验组。EMAS、RT-PCR和western-blot结果显示2.5Mpa动态压应力作用后的人体髓核细胞NF-κB基因和蛋白的表达量均高于对照组和其他各实验组。本部分实验结果提示:
1.动态压应力对体外培养的髓核细胞的微管结构具有显著的活化作用;不同强度的动态压应力对髓核细胞微管结构的活化作用不同;髓核细胞的微管结构活化状态与动态压应力的强度呈非线性对应关系,2.5Mpa 1Hz的动态压应力对体外培养的人体髓核细胞微管结构具有最佳活化效果,当力的强度大于5 Mpa时对于微管结构的作用变为不可逆。
2.不同强度的动态压应力对人体髓核细胞微管结构的活化状态与NF-κB基因和蛋白的表达量呈正相关关系。
3.阻断微管结构后,动态压应力对髓核细胞的作用效果受到影响:微管结构变化不明显,NF-κB基因和蛋白的表达量均低于对照组和各实验组。
4.不同强度的动态压应力通过改变人体髓核细胞的微管结构活化状态调节NF-κB基因和蛋白的表达量,进而达到调控NF-κB下游基因和蛋白的目的。
本实验的第三部分是体外培养人髓核细胞在动态压应力作用下NF-κB活化对Sox9基因和II型胶原基因表达的调控作用。实验通过采取RNA干扰技术,经过病毒载体构建、体外筛靶实验、内源验证实验等实验手段对体外培养的髓核细胞的NF-κB基因的有效作用靶点进行了筛选和验证,构建pFU-GW-RNAi对NF-κB基因进行了抑制,同时通过RT-PCR和western免疫印迹等实验方法对下游的Sox9基因和II型胶原基因的表达情况进行了研究。实验发现,人髓核细胞中基因序列中存在多个有效的的病毒干扰靶点,选择后作为后继慢病毒包装靶点进行大量病毒包装后感染髓核细胞,检测下游Sox9基因和Ⅱ型胶原基因的表达情况发现,NF-κB经过siRNA作用后Sox9基因和Ⅱ型胶原基因呈现显著的表达降低。本部分实验结果提示:
1.人体髓核细胞的NF-κB基因存在多个可被敲减的基因作用靶点。
2.体外培养的人体髓核细胞在动态压应力作用下,NF-κB通道的活化对Sox9基因和Ⅱ型胶原基因具有正向相关调控作用。
3.体外培养的人髓核细胞NF-κB基因经过siRNA作用后,Sox9基因和Ⅱ型胶原基因的表达量显著降低。
本课题立足于我们既往的研究结果,着眼于宏观病因学和微观病理学改变的联系,重点阐明动态压应力通过细胞骨架的改变活化NF-κB通路对椎间盘髓核细胞Sox9基因和Ⅱ型胶原表达的分子生物学调控机制,有助于帮助我们深入了解椎间盘退变性疾病的发病机理,进而为该类疾病的分子生物学治疗找到以NF-κB通路相关蛋白和Sox9基因为基础的基因治疗靶点。对于深入认识该类疾病的发生和发展机理,制定防治策略具有重要意义。
【关键词】:
【学位授予单位】:第四军医大学【学位级别】:博士【学位授予年份】:2011【分类号】:R681.53【目录】:
缩略语表6-8中文摘要8-13英文摘要13-18前言18-21文献回顾21-45 文献回顾一 人体椎间盘的理化性质及其退变 的生物学特征21-27 文献回顾二 力在椎间盘发育、成熟和 退变过程中的作用27-34 文献回顾三 Sox9 基因对 II 型胶原表达调控与椎 间盘退变的关系及其上游 NF-κB 通路的调控作用34-39 文献回顾四 细胞骨架在力传导中的作用及其与 基因转录表达的关系39-43 文献回顾五 椎间盘退变的修复治疗与生物治疗 候选基因研究进展43-45第一部分 动态压应力对人体髓核细胞体外培养模型生长动力学和形态学的作用45-61 1 材料与方法46-50 2 结果50-56 3 讨论56-61第二部分 人体髓核细胞体外动态压应力培养模型微管结构改变对NF-κB 通道的活化作用61-70 1 材料与方法61-63 2 结果63-65 3 讨论65-70第三部分 NF-κB 通路对人体髓核细胞Sox9 和II 型胶原体外表达的调控作用70-93 实验I: NF-κBp65RNA 干扰慢病毒载体制备70-76
1 材料与方法70-75
2 结果75-76 实验II: RNA 干扰有效靶点筛选及病毒包装和滴度检测76-85
1 材料与方法76-82
2 结果82-85 实验III: NF-κBp65-siRNA 对Sox9 和II 型胶原的调控作用85-93
1 材料与方法85-88
2 结果88-90
3 讨论90-93小结93-95参考文献95-106个人简历和研究成果106-107致谢107
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京公网安备75号重要的事情说三遍:富集胞外囊泡的四个注意事项富集胞外囊泡的四个注意事项...
缺乏标准方法是阐述胞外囊泡功能的一大瓶颈
鉴于外泌体的重要性和其他细胞外囊泡(EVs)治疗的发展和癌症、神经科学、免疫学机制研究,许多研究人员寻找“最好”的方案分离这些囊泡。仅在ResearchGate上,与外泌体分离相关的问题超过100个,部分问题浏览超过10000次。
过去一年见证了EV研究的飞速变化,研究发现细胞外颗粒亚型之间的内容物和功能的不同。特别是,由于缺乏标准化的EV浓缩和表征方法,国际细胞外囊泡协会(ISEV)发表了一些EV研究方法建议,这代表了一个准确阐明EVs功能的瓶颈。我们关于EV相关研调在美国癌症研究协会年会(AACR)中的调查显示,2014年,大量的研究人员使用超速离心法,到2015年,大多数人使用蔗糖梯度分离。我们看到很少(如果有的话)实例用沉淀方法用于外泌体浓缩。最终,我们注意到更多的外泌体制备被使用,包括EV阳性和阴性标记的WB在内的表征分析。
研究趋势驱动胞外囊泡富集的需求:EVs形成细胞微环境并携带exRNAs
在最近的会议上报告,包括AACR会议和2014年召开的美国胞外囊泡协会会议,研究外泌体最常引用的是他们调解细胞与细胞信息交流的功能。EVs通过不同的机制执行这个功能,比如外泌体的非细胞依赖miRNA过程,带有囊泡的蛋白酶的基质重塑作用,抑制肿瘤微环境中的免疫活动作用。EV在运输细胞外RNA(exRNAs)中的作用也是极大的兴趣点,尽管最近的报告表明循环microrna可能不一定包含在EV内。美国国家癌症研究所资助一个exRNA研究项目,建立了一个有用的网络资源用于EV浓缩和RNA分离方案的搜集。与此同时,美国国立卫生研究院细胞外RNA交流委员会同意,为了准确评估exRNA功能,需要使用更纯,特征明显,相对量化的EVs制备工作
设计EV富集方案的四个注意事项
你的样品来源是什么?细胞培养上清液。如果EV来源是细胞培养上清液,有很多选项可用于准备。最受欢迎的方法之一是密度梯度超速离心法。一份样品处理方案需要涉及样本收集的事先批准,浓缩后的细胞培养上清液加到蔗糖溶液或碘克沙醇为基础的密度梯度介质。10万g超速离心 2 - 3小时,紧随其后的是清洗步骤,已被证明提供& 1 g / mLEVs,并伴有相对较高的纯度(以颗粒蛋白比值和缺乏non-EV蛋白质(如Ago2)作为比较)。使用珠子共轭抗体针对vesicle-specific蛋白质(如anti-CD63 anti-CD9或anti-MHC珠子)亲和纯化细胞培养上清液样品也很有效。然而,当前affinity-based方法缺乏有效的方法来从固相洗提EVs,主要用于表型和内容物分析。
尺寸排阻为基础的纯化,或通过超滤,切向流过滤或色谱法,可能是一个简单的,通用的,具有成本效益的从细胞培养上清液浓缩囊泡的选择。尽管确切的产量和纯度可能依赖于细胞类型和细胞培养条件,一些研究表明,现代超滤系统运行速度更快,可能是比密度梯度高收益的方法。另一个优势是,考虑到超滤装置的缓冲能力更换与样品浓缩,净化部分可以很容易地程式化以满足下游分析平台的需求。蛋白质的生物样本(血清、血浆、脑脊液)。在最近的EV功能回顾中,从血液、乳汁到胆汁和滑液,EV几乎发现于所有生物液体。体液,总的来说,比细胞培养上清液粘性更高。因此,这些样本应该使用更高的速度、稀释倍数和离心时间时间。如果选择超滤浓缩方法,未稀释的生物样本可能堵塞过滤膜。同时,请注意,某些商用immunoaffinity-based用于囊泡纯化的试剂盒与体液样本是不相容的。使用任何试剂盒之前请参考制造商的说明书。
从你的囊泡制备中你最终所需要的信息是什么?如果EV正在单独制备仅仅想要获得RNA分析资料或蛋白质内容物信息,某种程度的损害EV膜(如由于剪切力的重复,high-g-force超速离心法)可能是可以接受的。电荷中和(“盐析”)生成EV适合转录组的分析,而不是其他的分析,因为它们含有non-EV蛋白质。密度梯度超速离心法,相比传统的超速离心法和聚合物沉淀,显示最一致的RNA分析数据。在一项研究中比较exosome-associated蛋白质的浓缩,immunoaffinity捕获比密度梯度提供双倍的浓缩。如果目标是富集EVs用于治疗应用或分析其功能,温和的技术,如切向流过滤(TFF)和密度梯度超速离心法更容易保护囊泡膜和生物活性。外泌体(&30nmEV)已经使用连续离心超滤(SCUF)条件的媒介从微泡(更大、更异构EVs)中成功分离。基于复杂粒径为基础的浓缩EV的因素之一是囊泡的不同功能和生物转化途径可能在大小上重叠。因为表面标记,到目前为止,是一个相对可靠的EV亚型代表,作为一种浓缩技术,只要EVs能够有效从固相洗脱,亲和纯化方法很可能具有最大的潜能。
是否可以接受非EV样品成分的干扰
Non-EV粒子可能在聚合物为基础的技术中与EV共纯化。其他方法,即使使用无血清培养基,也可能产生包含non-EV蛋白质的干扰,如白蛋白、脂蛋白,argonaute复合物或uromodulins。EV样品也含有大量的脂质,会干扰总蛋白质的定量。适当的描述这样的部分可能需要assay-free蛋白质分析,例如infrared-based定量,和bead-based流式定量。结合蛋白质分析和相对定量分析,能产生蛋白质浓度和EV数量之间的比率。如果该比率非常高,它可能表明co-purification丰富的蛋白质。
如何精确控制试验参数
因为囊泡在样本收集和准备中可能形成,样本收集和处理。过程中控制温度,时间,速度,和细胞健康参数非常重要。ISEV出版的建议标准来判断是否报道的EV制备真正包含功能的EV。这些标准要求分离EVs的详细的实验方法,包括报告来源细胞的健康和增殖能力参数
Future directions未来展望
考虑到EV的异质性和性能的细微差异,许多激动人心的新技术正在探索EV分离,包括微流体、nanointerfaces,电渗析,免疫亲和捕捉随后洗脱。此外,今天认为是“黄金标准”的方法可能需要进一步优化。例如,EV不同的物理性质,带有的不同表面标记,不同的生物起源的机制(Rab-dependent相比Rab-independent),因为平衡浮选是相同的,只能基于密度梯度浮选动力学分离。改变超速离心法速度还能改变EV的组成部分,affinity-based方法可能会进一步使EV亚型的分辨。幸运的是在EV研究人员之间和供应商之间研究工具、促进协作、EV浓缩方法记录采纳的紧密合作已经出现。
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药物代谢动力学研究进展实验研究仪器设备装置系统——美国flexcell细胞力学加载系统
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更新时间: 23:01:47
产地:美国
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美国Flexcellint国际公司,成立于1987年,该公司专注于细胞力学培养产品的设计和制造。以提供独特的体外细胞拉应力、压应力和流体剪切应力加载刺激系统以及配套的培养板、硅胶膜载片等耗材闻名于世。Flexcell细胞组织力学培养系统不仅能对各种2D、3D细胞组织提供拉应力、压应力、切应力刺激加载,而且还可以提供拉应力和切应力混合力同时加载;不仅能对细胞组织进行机械力加载刺激,而且还能进行三维培养、人工生物组织构建、动力模拟;不仅能单轴向牵张拉伸,而且还可以双轴向牵张拉伸。Flexcell独具的StageFlexer拉应力显微设备、StagePresser压应力显微设备、Flex Flow切应力显微设备,可在加力培养的同时实时观察研究细胞组织在力作用下的反应变化;独具的flexstop隔离阀能使同一块培养板里的细胞组织一部分受力,一部分不受力,方便进行对比实验这些系统智能、精准诱导来自各种细胞、组织在拉应力、压应力和流体切应力作用下发生的生化生理变化,专业、细腻的阐释了体外细胞、组织机械力刺激加载、力学信号感受和响应机制。对研究细胞的形态结构及功能,细胞的生长、发育、成熟、增殖、衰老、凋亡、死亡及癌变以及通路表达,细胞信号传导及基因表达的调控,细胞的分化及其调控机理具有重要意义。细胞组织应力背景与作用生命活动中无论是心脏的博动、动脉的收缩和舒张、肠道的蠕动,骨生长正畸,肌肉生长正畸,血管蠕动,肢体运动,器官活动,还是胸肺的呼吸都不断地对参与其中的细胞施加动态的应力(拉应力、压应力、切应力)作用。因此正确理解细胞对外应力刺激行为对骨肉正畸、肌肉收缩、创伤修复、肿瘤转移、器官组织康复等许多重要生物医学领域都有十分重要的意义应力信号协同生物化学信号是生物自适应结构自我设计和调控长成的设计和调控者,细胞核是细胞代谢活动的控制中心,指挥它的活动除了遗传密码外主要是外部刺激传来的信号。细胞处于组织的应力环境中,应力刺激细胞膜并通过微丝和微管传递到细胞核,应力信号在传递过程中引起一系列生化反应。最新研究成果已证明应力信号与化学信号在决定细胞活动中具有同等重要性,应力信号在调控细胞的分化、生长和凋亡中起着主导作用。应力刺激按作用方向分为张应力、压应力和切应力(血流对管壁)等,按时间分为定常和脉动应力。 研究确认应力是调控功能细胞的决定性因素 应力仿真加载模拟膜型是细胞力学研究面临的首要问题由于生物体内器官和组织结构极其复杂,生物个体也存在较大差异,致使在体细胞的力学环境复杂多样,从而增加在体细胞力学行为研究的难度。由于生物体内的细胞、细胞膜极小,宏观力学加载方法和实验技术无法直接使用,因此,寻找合适细胞力学加载方法和能膜拟生命体内细胞组织生长生物力环境的细胞组织体外机械力加载装置,实现体外分离和建立合适的加载膜型是细胞力学研究面临的首要问题。美国Fexcell?研制的体外细胞组织拉应力、压应力、和流体剪切力加载仿真模拟模型系统智能、精准诱导来自各种细胞、组织在拉力、压力和流体切应力等体外机械力刺激作用下发生的生化生理变化,专业、细腻的阐释了体外细胞、组织机械力刺激加载、力学信号感受和响应机制。国内外有近3000篇成功应用文献案例,详见应用案例文献库,是细胞组织力学研究者的首选。 Flexcell总授权代理世联博研北京科技有限公司是Flexcell细胞力学设备与耗材在中国大陆、香港、澳门、马来西亚、新加波区域总授权代理商, 为广大科研用户提供flexcell全系列产品,详情致电全国免费客服电话:400-650-8506咨询索取资料1、FX-5000T细胞牵张拉伸应力加载系统(Flexcell FX5000 Tension system)系统基本原理(负气压交换模式):橡胶密封垫在细胞培养板基底膜与基板之间形成封闭腔,把此密封腔的进、出气管插入二氧化碳培养箱里,把此密封腔放入二氧化碳培养箱, 利用封闭腔抽真空产生的负压使弹性基底膜(拉动三维支架)发生形变,通过计算机控制系统调节气体的压力来改变基底膜的形变量,进而使贴壁生长的细胞受到牵拉加载刺激。亮点:1)该系统对二维、三维细胞和组织各种培养物提供轴向和圆周应力加载;不但具有双轴向拉伸力加载,还具备单轴向加力功能2)计算机控制的应力加载系统,为体外培育的细胞提供精确的、可控制的、可重复的、静态的或者周期性的应力变化。3)使用真空泵,抻拉培养板底部的弹性硅胶模,细胞培养板底部最高伸展度可达到33%,通过气体装置可以自动调节和控制应力。4)基于柔性膜基底变形、受力均匀;5)可实时观察细胞、组织在应力作用下的反应;6)独具的flexstop隔离阀可使同一块培养板力的一部分培养孔的细胞受力,一部分培养孔的细胞不受力,方便对比实验;7)与压力传导仪整合,同时兼备多通道细胞压力加载功能;8)与Flex Flow平行板流室配套,可在牵拉细胞的同时施加流体切应力;9)多达4通道,可4个不同程序同时运行,进行多个不同拉伸形变率对比实验;10)同一程序中可以运行多种频率,多种振幅和多种波形;11)加载模拟波形种类丰富:静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形以及各种特制波形;12)更好地控制在超低或超高应力下的波形;13)电脑系统对牵张拉伸力加载周期、大小、频率、持续时间精确智能调控14)加载分析各种细胞在牵张拉应力刺激下的生物化学反应15)伸展度范围广:0-33%16)牵拉频率范围广:0.01-5Hz17)典型应用:该系统感应各种细胞在应力刺激下的生物化学反应,例如:骨骼细胞,肺细胞,心肌细胞,血细胞,皮肤细胞,肌腱细胞,韧带细胞,软骨细胞和骨细胞等各种2D或3D细胞组织。典型应用科室:口腔颞下颌关节滑膜细胞、人牙周膜细胞、口腔上皮细胞、口腔鳞癌KB细胞等骨:骨骼细胞、肌腱细胞、韧带细胞、软骨细胞和骨细胞、骨髓间充质干细胞,软骨组织、椎间盘骨组织、肌腱组织、韧带组织等肺呼吸肺细胞、肺上皮细胞、肺动脉内皮细胞、人肺微血管内皮细胞眼科视觉神经眼上皮细胞、眼小梁组织细胞、视网膜神经细胞心血管/高血压:心肌细胞、血细胞、心血管平滑肌细胞、血管内皮细胞生殖肾膀胱细胞、平滑肌细胞/尿路上皮及尿路上皮细胞、肾小管上皮细胞消化肠上皮细胞、 胃上皮细胞、胃血管内皮细胞皮肤皮肤细胞、皮肤成纤维细胞18)系统具有模块化易升级,可扩展兼备压力加载、流体切应力加载、三维细胞组织培养功能。19)系统可以和BioFlex双向拉应力培养板, Uniflex单向拉应力培养板 、TissueTrain三维细胞组织培养板等系列细胞培养一起使用,培养板类型、包被表面材料丰富:Amino, Collagen (Type I or IV), Elastin, ProNectin (R GD), Laminin (YIGSR).表面涂层丰富的包被材料, 您可以跟根据不同细胞组织可以灵活选择不同包被材料表面 (包被材料选择参考)。该应力加载系统配套培养板最大伸展率Culture Plate for tension systemMax Achievable StrainBioFLEX?双向应力细胞培养板(BioFLEX?CULTURE PLATES)21.80%Tissue Train三维细胞组织培养板(Tissue Train culture plates)20.80%UniFlex?单向应力细胞培养板(UniFlex?Culture Plates)12.20%24孔高通量BIOFLEX?培养板培养板(HT BIOFLEX?CULTURE PLATES)15.00%No Loading Stations33%1、BioFLEX?双向应力细胞培养板(BioFLEX?CULTURE PLATES)BioFlex细胞培养板和FX-5000T应力加载系统配套使用,为细胞提供应力加载。孔板底部是由弹性硅胶模制作而成,柔韧性好,透明度高。6孔圆形,总生长面积57.75 cm2(9.62 cm2/孔).孔板底部的硅胶模超薄,厚度仅为0.020&,(0.0508cm)可以使用标准正立式显微镜/倒立显微镜观察细胞。五种不同包被的培养表面:Amino, Collagen (Type I or IV), Elastin, ProNectin (R GD), Laminin (YIGSR).Covalently bound matrix surfaces: Amino, Collagen (Type I or IV), Elastin, Pronectin?(RGD), and Laminin (YIGSR).(包被材料选择参考)光学性能佳,自身荧光低。当与圆柱形加载平台共同使用时,可以对细胞进行均匀的径向和圆周应力加载。BIOFLEX?CULTURE PLATES(BIOFLEX?培养板培养板)编号产品产品名称BF-3001U-Case(每箱40块)BF-3001E-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Untreated(6孔表面未处理的BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001A-Case(每箱40块)BF-3001A-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Amino (6孔氨基BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001C-Case(每箱40块)BF-3001C-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Collagen Type I (6孔胶原I 型BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001C(IV)-Case(每箱40块)BF-3001C(IV)-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Collagen Type IV (6孔胶原IV型BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001E-Case(每箱40块)BF-3001E-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Elastin (6孔弹力BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001P-Case(每箱40块)BF-3001P-Each(每块)BioFlex Culture Plate-ProNectin (6孔 ProNectin BioFLEX?双向应力细胞培养板)BF-3001L-Case(每箱40块)BF-3001L-Each(每块)BioFlex Culture Plate-Laminin (6孔层粘连蛋白BioFLEX?双向应力细胞培养板)2、UniFlex?单向应力细胞培养板(UniFlex?Culture Plates)UniFlex细胞培养板和FX-5000T应力加载系统和TissueTrain细胞培养系统配套使用。准确测量应力---负压系统曲线,保证应力的准确性和可重复性。单轴向应力作用于宽0.6英寸x0.952英寸(3.68 cm2)的长方形区域中。单轴向应力变幅在+/-1.5%.五种不同包被的培养表面:Amino, Collagen (Type I or IV) Elastin, ProNectin (RGD), Laminin (YIGSR)(包被材料选择参考)为获得准确的单轴向应力,必须和弧矩形应力加载平台配套使用。编号产品产品名称UF-4001U-Case(每箱40块)UF-4001U-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Untreated(6孔表面未处理的BioFLEX?双向应力细胞培养板)UF-4001A-Case(每箱40块)UF-4001A-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Amino(6孔氨基UniFlex?单向应力细胞培养板)UF-4001C-Case(每箱40块)UF-4001C-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Collagen Type I(6孔胶原I 型UniFlex?单向应力细胞培养板)UF-4001C(IV)-Case(每箱40块)UF-4001C(IV)-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Collagen Type IV(6孔胶原IV型UniFlex?单向应力细胞培养板)UF-4001E-Case(每箱40块)UF-4001E-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Elastin (6孔弹力UniFlex?单向应力细胞培养板)UF-4001P-Case(每箱40块)UF-4001P-Each(每块)UniFlex Culture Plate-ProNectin (6孔ProNectin UniFlex?单向应力细胞培养板)UF-4001L-Case(每箱40块)UF-4001L-Each(每块)UniFlex Culture Plate-Laminin (6孔层粘连蛋白UniFlex?单向应力细胞培养板)3、HT BIOFLEX?CULTURE PLATES(高通量BIOFLEX?培养板培养板)白色板编号产品产品名称HTPW-3001U-Case(每箱40块)HTPW-3001U-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Untreated(白色24孔高通量表面未处理培养板)HTPW-3001A-Case(每箱40块)HTPW-3001A-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Amino(白色24孔高通量氨基培养板)HTPW-3001C-Case(每箱40块)HTPW-3001C-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Collagen Type I(白色24孔高通量胶原I型培养板)HTPW-3001C(IV)-Case(每箱40块)HTPW-3001C(IV)-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Collagen Type IV(白色24孔高通量胶原IV型培养板)HTPW-3001E-Case(每箱40块)HTPW-3001E-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Elastin(白色24孔高通量弹力培养板)HTPW-3001P-Case(每箱40块)HTPW-3001P-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-ProNectin(白色24孔高通量ProNectin 培养板)HTPW-3001L-Case(每箱40块)HTPW-3001L-Each(每块)White HT BioFlex Culture Plate-Laminin(白色24孔高通量层粘连蛋白培养板)黑色板HTPB-3001U-Case(每箱40块)HTPB-3001U-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Untreated(黑色24孔高通量表面未处理培养板)HTPB-3001A-Case(每箱40块)HTPB-3001A-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Amino(黑色24孔高通量氨基培养板)HTPB-3001C-Case(每箱40块)HTPB-3001C-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Collagen Type I(黑色24孔高通量胶原I培养板)HTPB-3001C(IV)-Case(每箱40块)HTPB-3001C(IV)-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Collagen Type IV(黑色24孔高通量胶原IV培养板)HTPB-3001E-Case(每箱40块)HTPB-3001E-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Elastin(黑色24孔高通量弹力培养板)HTPB-3001P-Case(每箱40块)HTPB-3001P-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-ProNectin(黑色24孔高通量ProNectin培养板)HTPB-3001L-Case(每箱40块)HTPB-3001L-Each(每块)Black HT BioFlex Culture Plate-Laminin(黑色24孔高通量层粘连蛋白培养板)该FX-5000T系统增配的三维培养功能模块后三维细胞组织培养配套耗材CIRCULAR FOAM TISSUE TRAIN CULTURE PLATES(圆形三维细胞组织培养板采用弹性底部,可用来制备三维基质蛋白细胞培养物,并提供双轴向拉力,不需要生物胶槽(Trough Loader))编号产品产品名称TTCF-4001U-CaseTTCF-4001U-EachCircular Foam Culture Plate-UntreatedTTCF-4001A-CaseTTCF-4001A-EachCircular Foam Culture Plate-AminoTTCF-4001C-CaseTTCF-4001C-EachCircular Foam Culture Plate-Collagen Type ITTCF-4001C(IV)-CaseTTCF-4001C(IV)-EachCircular Foam Culture Plate-Collagen Type IVTTCF-4001E-CaseTTCF-4001E-EachCircular Foam Culture Plate-ElastinTTCF-4001P-CaseTTCF-4001P-EachCircular Foam Culture Plate-ProNectinTTCF-4001L-CaseTTCF-4001L-EachCircular Foam Culture Plate-LamininTISSUE TRAIN CULTURE PLATES(三维细胞组织培养板采用弹性底部,可用来制备三维基质蛋白细胞培养物,并提供单轴向拉力。)编号产品产品名称Foruse with Standard Trough Loaders (与线形生物胶槽配套使用)TT-4001U-CaseTT-4001U-EachTissue Train Culture Plate-UntreatedTT-4001A-CaseTT-4001A-EachTissue Train Culture Plate-AminoTT-4001C-CaseTT-4001C-EachTissue Train Culture Plate-Collagen Type ITT-4001C(IV)-CaseTT-4001C(IV)-EachTissue Train Culture Plate-Collagen Type IVTT-4001E-CaseTT-4001E-EachTissue Train Culture Plate-ElastinTT-4001P-CaseTT-4001P-EachTissue Train Culture Plate-ProNectinTT-4001L-CaseTT-4001L-EachTissue Train Culture Plate-LamininForuse with Trapezoidal Trough Loaders (与梯形生物胶槽配套使用)编号产品产品名称TTTP-4001U-CaseTTTP-4001U-EachTrapezoidal TT Culture Plate-UntreatedTTTP-4001A-CaseTTTP-4001A-EachTrapezoidal TT Culture Plate-AminoTTTP-4001C-CaseTTTP-4001C-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Collagen Type ITTTP-4001C(IV)-CaseTTTP-4001C(IV)-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Collagen Type IVTTTP-4001E-CaseTTTP-4001E-EachTrapezoidal TT Culture Plate-ElastinTTTP-4001P-CaseTTTP-4001P-EachTrapezoidal TT Culture Plate-ProNectinTTTP-4001L-CaseTTTP-4001L-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Laminin该FX-5000T系统增配的压应力加载功能模块后三维细胞组织压力培养配套耗材CIRCULAR FOAM TISSUE TRAIN CULTURE PLATES(圆形三维细胞组织培养板采用弹性底部,可用来制备三维基质蛋白细胞培养物,并提供双轴向拉力,不需要生物胶槽(Trough Loader))编号产品产品名称TTCF-4001U-CaseTTCF-4001U-EachCircular Foam Culture Plate-Untreated21)观察方便:使用正直显微镜或倒置显微镜都可以,而且通过StageFlexer显微应力加载设备,实时观察细胞、组织在应力作用下的反应22)FX-5000T细胞牵张拉伸应力加载系统组成:预装FlexSoft?FX-5000控制软件的计算机FX5K? Tension FlexLink应力加载控制传导仪BioFlex一个真空腔应力加载基板,四个密封垫片BioFlex一套直径为25mm的BioFlex应力加载平台4块BioFlex 胶原蛋白1型包被细胞培养板一个干燥过滤器一对滤水器,一根25英尺蓝色Flex In链接管(6.4毫米外径)一根25英尺无色Flex Out链接管(9.5毫米外径)一根25英尺牵张拉伸泵链接蓝管(9.5毫米外径)硅胶润滑油最大真空度-100Kpa,161升/分的真空负压泵2、FX-5000C细胞压力加载系统(flexcell FX5000 Compression system)——提供样机体验系统基本原理(正气压交换模式):利用橡胶密封垫在细胞培养板基底膜与基座之间形成封闭腔,把此密封腔的进、出气管插入二氧化碳培养箱里,把此密封腔放入二氧化碳培养箱,利用封闭腔正气压挤压培养孔里的活塞,进而使活塞和固定台之间的三维培养物间接受到压力发生形变,通过计算机控制系统调节气体的压力来改变基底膜的形变量。(注释:压力加载培养板每个培养孔里都有一对活塞或固定台)亮点1)该系统对各种组织、三维细胞培养物提供周期性或静态的压力加载;2)基于柔性膜基底变形、受力均匀;3)可实时观察细胞、组织在压力作用下的反应;4)可有选择性地封阻对细胞的应力加载;5)同时兼备多通道细胞牵拉力加载功能;6)多达4通道,可4个不同程序同时运行,进行多个不同压力形变率对比实验;7)同一程序中可以运行多种频率(0.01- 5 Hz),多种振幅和多种波形;8)更好地控制在超低或超高应力下的波形;9)多种波形种类:静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形以及各种特制波形;10)电脑系统对压力加载周期、大小、频率、持续时间精确智能调控11)压力范围:0.1 - 14磅,夹在活塞和固定台之间的BioPress细胞培养板可承受正压力的最大值为14磅,最小值为0.1磅。12)典型应用科室: 检测各种三维细胞组织在压力作用下的生物变化、反应, 例如:软骨组织,椎间盘骨组织,肌腱组织,韧带组织,以及从肌肉,肺,心脏,血管,皮肤,肌腱,韧带,软骨和骨中分离出来的细胞。 13)在智能电脑主机的控制下,压力传导仪内的密封阀门装置自动调节和控制压力。 14)系统具有模块化易升级,可扩展拉应力加载、流利切应力加载、三维细胞组织培养功能。具有细胞组织力学所要求的所有类型:牵张拉伸力、压力、流体切应力加载刺激功能。 15)通过StagePress显微压应力加载设备,实时观察细胞、组织在拉/压应力作用下的反应 16)FX-5000C细胞组织压应力加载系统组成:预装FlexSoft?FX-5000软件的的计算机;FX5K? Compression FlexLink压力加载控制传导仪一个正压力加载培养腔室基板一套密封垫片和压力夹固系统四块六孔细胞压力加载培养板一根25英尺蓝色Flex In链接管(6.4毫米外径)一根25英尺无色Flex Out链接管(9.5毫米外径)一根25英尺牵张拉伸泵链接蓝管(9.5毫米外径)一台正压泵细胞组织压应力加载刺激系统总结培养物级别既能对各种组织培养物提供周期性的或静态的压力加载,又能对各种三维细胞培养物提供周期性的或静态的压力加载压应力波形系统既能提供压应力加载的静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形波形,又能模拟各种自定义波形, 很好地控制在超低或超高压应力下的波形.多通道加载同一程序中可以运行多种频率,多种振幅和多种波形,4个不同程序可以同时运行,方便进行不同压力比对比实验;压力范围0.1 - 14磅加载频率0.01- 5 Hz压应力刺激细胞组织类型能对软骨组织、椎间盘骨组织、肌腱组织、韧带组织,以及从肌肉、肺、心脏、血管、皮肤、肌腱、韧带、软骨和骨中分离出来的细胞加压应力刺激;观察在压应力作用的同时,可以实时观察细胞组织在压应力作用下的反应易用性使用常规的细胞组织压力加载刺激培养板或培养皿模式进行加载培养,符合常规操作,避免学习难度3、全自动可牵张拉伸刺激立体水凝胶支架三维细胞培养系统(Flexcell TissueTrain System)——提供样机体验FLEXCELL Tissue Train?是个独立的全自动细胞组织三维培养、组织构建计算机智能控制的生物反应器系统,它允许研究者创建三维基质凝胶支架,真正意义上的三维培养——该系统以多种包被表面(Amino、Collagen (Type I or IV)、Elastin、 ProNectin (RGD)、Laminin (YIGSR))的水凝胶为细胞外基质支架——水凝胶支架因在液态时包裹细胞,固态时形成交联网络,细胞粘附力强,良好水分、养分交换。 水凝胶是一种状似果冻的物质,具有高弹性、吸水性的聚合物组成的网状物,用于组织工程中,作为帮助细胞生长和发展的支架. 利用立体水凝胶支架作为平台,观察不同细胞的交互作用,建立组织和器官。同时通过在立体环境中培育细胞,有助于更深入地了解细胞过程和交互作用. 在基质里细胞培养、构建生物组织,可为三维细胞、组织提供双轴向应力和单轴向应力,FLEXCELL Tissue Train?是当今科研界最先进的可拉伸刺激三维细胞培养、生物组织构建系统。系统基本原理:(负气压交换模式+各种三维培养磨具+三维培养板模式)细胞组织加力模块加上圆形、梯形、矩形三维培养模具以及各种三维培养板构成。系统功能亮点:三维细胞牵张应力加载刺激:对生长在三维状态下的细胞进行静态的或者周期性的拉应力刺激通过Flexcell应力加载系统和弧矩形加载平台对生长在三维环境下的细胞进行单轴向或者双轴向的静态或者周期性的应力加载刺激培养三维细胞培养:使用三维组织培养模具和三维细胞培养板可以进行三维细胞培养在凝胶支架里全自动三维培养三维组织培养模具和三维细胞培养板类型丰富:1)三维组织培养模具有三维线形培养加载基站模具和三维梯形培养加载基站模具2)具有氨基酸包被表面、胶原(I型或IV)包被表面、弹性蛋白包被表面、ProNectin(RGD)包被表面、层粘连蛋白(YIGSR)包被表面的三维培养板。科研者根据自己的细胞,有针对性的选择适合包被表面三维培养板3)具有可牵拉双轴向和单轴向拉力刺激加载三维组织培养板。大体积三维生物人工组织培养构建:可构建长度达35mm的生物人工组织动力模拟实验:可建立特制的各种模拟实验:心率模拟实验、步行模拟实验、跑动模拟实验和其他动力模拟实验本系统技术先进性:1)安全快速的扩增细胞2)在细胞特异性基质(圆盘形陶瓷载体培养片) 中进行三维的细胞高密度培养3)扩增并获得可用于治疗的有活性的原代细胞4)在控制分化状态的条件下扩增干细胞5)向植入的一代细胞提供植入支架6)长期培养分泌细胞7)高效生产重组蛋白和疫苗8)生产优质的糖蛋白9)三维培养与机械力刺激有机结合10)三维凝胶压实自动测量与面积自动计算可用于多个领域,如研究、生物制药加工;也可为细胞和组织培养工作提供解决方案:1)可用于干细胞和胚体扩增及定向分化2)可用于细胞和组织治疗的细胞制备3)可用于克隆细胞,为器官移植做准备(例如hip stem, heart valve, graft)4)可用于制备天然的生物制品(例如糖蛋白、病毒、病毒样颗粒)观察细胞应力下实时反映:使用Flexcell独有的Flexcell StageFlexer Jr.显微附属设备,可在加力刺激的同时实时观察细胞在三维状态下牵拉刺激的反应多种基质蛋白包被的尼龙网锚可以加强细胞与网锚的结合系统可以和Tissue Train?三维细胞组织培养板等系列细胞培养一起使用,培养板类型、包被表面材料丰富:Amino, Collagen (Type I or IV), Elastin, ProNectin (R GD), Laminin (YIGSR).表面涂层丰富的包被材料, 您可以跟根据不同细胞组织可以灵活选择不同包被材料表面 (包被材料选择参考)。该系统培养套耗材CIRCULAR FOAM TISSUE TRAIN CULTURE PLATES 圆形三维细胞组织培养板采用弹性底部,可用来制备三维基质蛋白细胞培养物,并提供双轴向拉力,不需要生物胶槽(Trough Loader)编号产品产品名称TTCF-4001U-CaseTTCF-4001U-EachCircular Foam Culture Plate-UntreatedTTCF-4001A-CaseTTCF-4001A-EachCircular Foam Culture Plate-AminoTTCF-4001C-CaseTTCF-4001C-EachCircular Foam Culture Plate-Collagen Type ITTCF-4001C(IV)-CaseTTCF-4001C(IV)-EachCircular Foam Culture Plate-Collagen Type IVTTCF-4001E-CaseTTCF-4001E-EachCircular Foam Culture Plate-ElastinTTCF-4001P-CaseTTCF-4001P-EachCircular Foam Culture Plate-ProNectinTTCF-4001L-CaseTTCF-4001L-EachCircular Foam Culture Plate-LamininTISSUE TRAIN CULTURE PLATES 三维细胞组织培养板采用弹性底部,可用来制备三维基质蛋白细胞培养物,并提供单轴向拉力。编号产品产品名称Foruse with Standard Trough Loaders (与线形生物胶槽配套使用)TT-4001U-CaseTT-4001U-EachTissue Train Culture Plate-UntreatedTT-4001A-CaseTT-4001A-EachTissue Train Culture Plate-AminoTT-4001C-CaseTT-4001C-EachTissue Train Culture Plate-Collagen Type ITT-4001C(IV)-CaseTT-4001C(IV)-EachTissue Train Culture Plate-Collagen Type IVTT-4001E-CaseTT-4001E-EachTissue Train Culture Plate-ElastinTT-4001P-CaseTT-4001P-EachTissue Train Culture Plate-ProNectinTT-4001L-CaseTT-4001L-EachTissue Train Culture Plate-LamininForuse with Trapezoidal Trough Loaders (与梯形生物胶槽配套使用)编号产品产品名称TTTP-4001U-CaseTTTP-4001U-EachTrapezoidal TT Culture Plate-UntreatedTTTP-4001A-CaseTTTP-4001A-EachTrapezoidal TT Culture Plate-AminoTTTP-4001C-CaseTTTP-4001C-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Collagen Type ITTTP-4001C(IV)-CaseTTTP-4001C(IV)-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Collagen Type IVTTTP-4001E-CaseTTTP-4001E-EachTrapezoidal TT Culture Plate-ElastinTTTP-4001P-CaseTTTP-4001P-EachTrapezoidal TT Culture Plate-ProNectinTTTP-4001L-CaseTTTP-4001L-EachTrapezoidal TT Culture Plate-Laminin22)FX-5000TT系统组成:预装FlexSoft?FX-5000软件计算机系统;FX5K? Tension FlexLink应力加载控制传导仪Tissue Train 三维真空腔基板和四个密封垫片Tissue Train Trough Loaders (生物胶槽)Arctangle Loading Posts弧矩形加载平台4块Tissue Train 三维细胞培养板亚克力板,胶管,快拆接头,润滑油一个干燥过滤器一对滤水器,一根25英尺蓝色Flex In链接管(6.4毫米外径)一根25英尺无色Flex Out链接管(9.5毫米外径)一根25英尺牵张拉伸泵链接蓝管(9.5毫米外径)最大真空度-100Kpa,161升/分的真空负压泵4、细胞流体切应力系统(Flexcell Fluid Shear Stress Device)——提供样机体验4.1、STR-4000六通道流体切应力加载分析设备
& & & & &Streamer剪切力设备为细胞提供各种形式的流体切应力:稳流式切应力、脉冲式切应力或者往返式切应力。在经过特殊基质蛋白包被的25x 75x 1.0mm细胞培养载片上培养细胞。多达6通道,每个通道放不同载片,可培养不同的细胞计算机控制的蠕动泵可以调节切应力大小从0-35 dynes/cm2通过Osci-Flow液体控制仪提供往返式或脉冲式流体切应力。检测细胞在液流作用下的排列反应。设备易拆卸并可高温消毒。可以在经过特殊包被的6个细胞培养载片上同时培养细胞。提供两个液流脉冲阻尼器。 Streamer System系统包括: 1)Streamer设备; 2)预装Streamer控制软件的计算机; 3)快拆接头及胶管; 4)蠕动泵; 5)StreamSoft软件; 6)2个液流脉冲阻尼器; 7)12个细胞培养载片(Culture Slip) 细胞培养载片包括显微镜载(物)片和盖玻片两种产品,表面经过特殊处理,适合于细胞的贴壁与生长。 两种规格:75 mm x 25 mm x 1.0 mm ,75 mm x 24 mm x 0.2 mm 。 75 mm x 25 mm x 1.0 mm 细胞培养载片的边缘涂有1.0 mm宽的特氟隆边框(Teflon),可以有效控制细胞生长在切应力加载区域。 自身荧光低,光学性能佳。 不同包被的培养表面提高细胞的贴壁与生长。 五种不同包被的培养表面:Amino, Collagen (Type I or IV) Elastin, ProNectin (RGD), Laminin (YIGSR). 所以产品都是无菌独立包装,仅供一次性使用。 订货信息(请联系世联博研公司) 75mm x 25mm x 1.0mm 和 Streamer 或者 FlexFlow 配套使用 产品编号 英文名称 CS-U Culture Slips — Untreated CS-A Culture Slips — Amino CS-C Culture Slips — Collagen Type I CS-C(IV) Culture Slips — Collagen Type IV CS-E Culture Slips — Elastin CS-P Culture Slips — ProNectin CS-L Culture Slips — Laminin 75mm x 24mm x 0.2mm 和 FlexFlow配套使用 产品编号 英文名称 FFCS-U Culture Slips — Untreated FFCS-A Culture Slips — Amino FFCS-C Culture Slips — Collagen Type I FFCS-C(IV) Culture Slips — Collagen Type IV FFCS-E Culture Slips — Elastin FFCS-P Culture Slips — ProNectin FFCS-L Culture Slips — Laminin 8)微流纳流HiQ Flowmate微流体控制器双注射泵可以在微升、纳升、微微升水平上控制液流.双注射泵,独立的液流控制系统。传送精确,稳定的流速可控流速范围1.2pL/ min-260.6ml/min提供不同流速模型:稳定型,脉冲型,连续型,截流型和震荡型;可进行循环,连续的液流控制;同时运行不同的流速模型;内置阀门控制液流模式;机载计算器用于流量、流时、流速、剪切力的计算;高分辨率、触屏控制。用户友好的图标驱动程序;便于泵和芯片对接的生物芯片支架;根据现有流速有三种不同的机型;多种应用程序:液体稀释,配给及注射器;动物实验中的药物注射和体液抽取;施加液流剪切力;微流体和纳流体实验;混合、分流液体;震荡型液流的控制需要iHIQ Flowmate二级阀门配件9)Osci-Flow完美的液流模式(切应力模式)控制器通过计算机控制提供可调控的,往返式的或者脉冲式的流体切应力。和Streamer及FlexFlow shear stress设备一起使用。维持泵的流速不,最大限度的降低改变泵的转速引起的流液的延反应迟。可以在瞬间内改变流体流动方向。兼容其它公司生产的灌流系统。兼容各种类型MasterFlexL/S系列或者相应的胶管。通过PC板卡可以和绝大多数便携式计算机连接使用。Osci-Flow装置DAQ Card DIO-24说明书和NI-DAQ软件连接Osci-Flow和板卡的缆线;胶管和快拆接头;StreamSoft软件;5、Flexflow单通道平行板流室系统提供流体切应力同时抻拉细胞FlexcellFlexFlow显微切应力加载设备(SHEAR Stress device)可以在提供流体切应力的同时抻拉细胞,测试血管和结绨组织细胞对液体流动的实时反应。为培育在StageFlexer硅胶模表面或者基质蛋白包被的细胞培养片上的细胞提供切应力。使用FX-5000T应力加载系统抻拉细胞,并且可以在实验前,实验中或者实验后提供切应力。计算机控制蠕动泵,调节切应力大小,从0-35 dynes/cm2使用标准正立式显微镜实时观察细胞在切应力下的反应。检测细胞在流体作用下的排列反应。加力同时实时检测在液体切应力下各种激活剂/抑制剂对细胞反应的影响。使用荧光团例如FURA-2检测细胞内[Ca2+]ic或者其它离子对切应力反应。(可以与str-4000六通道切应力系统配套使用) FlexFlow系统包括:FlexFlow装置;StreamSoft软件FlexFlow快拆接头、胶管、FlexFlow 旁路连接器MASTERFLEX L/S型号7550-10蠕动泵及配套线缆、连接管2个稳流器;硅润滑剂FX -5000 张力系统适配器显微镜适应性FlexFlow底座快速链接细胞培养基瓶;一个快速链接真空瓶三个没灭菌和六个灭菌胶原蛋白涂层薄培养载片三个没灭菌和六个灭菌胶原涂层StageFlexer膜配件包保证细胞在不同水平恒流或生理剪切力作用下仍保持黏附,在研究中得到了广泛应用。用蠕动泵(peristaltic pump)或注射泵(syringe pump)提供瞬态剪切力使平行板流室的入流管和出流管之间产生压差,使流室内细胞受到均匀,震荡或脉动剪切力的作用。平台总结:力类型:具有细胞组织力学所要求的所有类型:牵张拉伸力、压力、流体切应力(各种形式的流体切应力:稳流式切应力,脉冲式切应力或者往返式切应力)轴向:不但具有双轴向拉伸力加载,还具备单轴向加力功能培养物类型:能对各种2D和3D细胞级别或组织级别培养加载刺激;可以构建长达35mm的人工生物组织压应力和拉应力波形类型:波形丰富,既能提供模拟加载的静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形波形和各种自定义波形平台扩充性:在同一电脑主机上,具备拉应力、压应力、流体切应力模块任意组合系统压力可扩展性:具有模块化、多通道加载功能,可进行不同压缩形变对比实验室系统牵张拉伸力可扩展性:具有模块化、多通道加载功能,可进行不同牵张拉伸形变对比实验室系统切应力可扩展性:流体切应力模块和拉应力可同时混合加载刺激产品成熟度:国外内有大量应用文献案例(详见应用案例文献库),国内至少有10家成功使用案例
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