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品牌：孚光精仪/FellesPhotonic
英文名称：micromanipulator
型号规格：MM33
货号：FP-MM
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纤毛虫施氏腹柱虫的超微结构观察和利用激光共聚焦显微对术对纤毛器微管的观察
【摘要】：土壤群落中较小的一个类群是土壤中的原生动物。纤毛虫在原生动物中是较高等的生物。土壤环境有其特殊性,所以生活在土壤中的原生动物一般都是小型的生物,而体型大的纤毛虫则较难找到。对于土壤纤毛虫的研究中国起步较晚,并且关于土壤纤毛虫的研究报道并不多。因此,作者应用扫描电镜术、透射电镜术以及激光共聚焦显微镜术,以一种大型的腹毛目腹柱虫科土壤纤毛虫施氏腹柱虫(Gastrostyla steinii)为材料,对其皮层细胞骨架结构、形态和形态发生以及休眠包囊结构进行了观察和研究,结果如下所示：
1细胞的超微结构观察
(1)营养细胞的观察
扫描电镜术显示：施氏腹柱虫虫体呈长椭圆形,外形较稳定,背面隆起。其皮层纤毛器由额腹横棘毛、左右缘棘毛和背触毛所组成。在其细胞的腹面,口围带发达并呈“?”型,位于细胞左侧,其领部和翻领部由39～48片小膜组成。波动膜含口内膜和口侧膜各1片。额腹横棘毛的数目和分布具有多样性：额棘毛8～10根,前3根较为粗壮分布在口侧膜右前方,1根紧邻口内膜,其余几根定位在口侧膜右侧；腹棘毛数目不定基本上呈单列排布；横棘毛多以“4+1”的形式排列成“√”状。左、右缘棘毛各1列,位于腹部左、右边缘,并在细胞后端相连。在细胞背面,有6列背触毛,其中4列贯穿其纵长,另2列纵贯体前部皮层。一般有3根尾棘毛。观察到在施氏腹柱虫的形态发生中,老口围带全部保留,表明其老的或原来就存在的结构对新微管结构的发生及形成具有定位和物质贡献的作用。
透射电镜显示：纤毛器(口纤毛器和体纤毛器)、表膜及表膜下微管组成了施氏腹柱虫营养细胞的皮层。其非分裂期的细胞表膜是由质膜、内表膜泡及外表膜泡共3层结构组成。口围带是由许多呈片状的小膜所构成的,除了靠近虫体前部的小膜外,每片小膜基本上由3列纤毛组成,大部分小膜含4列基体。有膈结构存在于相邻的小膜间。波动膜内有结构,此结构为网格状样的微管结构；棘毛由很多纤毛聚集而成。纤毛区纤毛杆是典型的“9+2”型二联体微管。在营养细胞的背腹面基部存在大量微管束,可能有支持棘毛及细胞质的作用。细胞质中的线粒体、拟糖原粒含量十分丰富,可能与其在土壤中生活能量的储存有关。
(2)休眠包囊的观察
扫描电镜术显示：施氏腹柱虫的包囊呈圆球形,直径47～55μm,大小约为其营养细胞的1/3左右,且包囊的表面形成很多不规则的向外突出的皱褶。
透射电镜显示：厚厚的包囊壁把施氏腹柱虫的包囊完全包裹住,包囊壁不光滑,形成不规则的皱褶,起到保护包囊的作用。包囊壁很厚可分为三层：外层壁、中层壁和内层壁。包囊内存在的线粒体的内部呈现模糊状。一些淀粉粒仍存在于包囊内部。
2细胞纤毛器微管的激光共聚焦显微观察
在激光共聚焦显微镜下可观察到,经荧光紫杉醇标记后的土壤纤毛虫施氏腹柱虫,其有口围带、波动膜、额腹横棘毛、左右缘棘毛、背触毛等纤毛器微管结构。在额腹横棘毛的基部含有前纵微管束、后纵微管束和横微管束的结构；在左、右缘棘毛的基部含有前纵微管束、后纵微管束、横微管束和基部微管芽的结构。相较于我们了解的别种纤毛虫的同类微管,施氏腹柱虫在适应土壤环境方面有其基本特征。这些特征与水生纤毛虫是有区别的,其棘毛的基部微管组成及定位方式显示出此种土壤纤毛虫的特异性。在其分裂过程中,老的口围带结构保留下来。此现象说明老的或者原来就存在的结构在新的微管结构的发生及其形成过程中有定位及物质贡献作用。而且在新结构分化和成熟期间,老的结构也在经历着行使相应的生理功能及渐渐退化的过程。
【关键词】：
【学位授予单位】：华东师范大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：S154.5【目录】：
摘要6-9Abstract9-15第一章 土壤纤毛虫研究进展15-29 摘要15 1 土壤纤毛虫的研究历史及进展15-16 2 土壤纤毛虫的起源16 3 土壤原生动物的分布16-17 4 原生动物的研究方法17-22
4.1 显微水平的研究方法17-20
4.2 亚显微水平的研究方法20-22 5 总结22-24 参考文献24-29第二章 纤毛虫施氏腹柱虫细胞的扫描及透射电镜观察29-73 摘要29-30 1 材料和方法30-37
1.1 材料30-31
1.1.1 实验材料来源30-31
1.1.2 细胞的培养31
1.2 主要实验试剂及配制方法31-34
1.2.1 扫描电子显微镜制样所需主要试剂及配制方法31-32
1.2.2 透射电子显微镜制样所需主要试剂及配制方法32-34
1.3 主要实验仪器设备34-35
1.3.1 扫描电子显微镜主要实验仪器设备34
1.3.2 透射电子显微镜主要实验仪器设备34-35
1.4 样品制备方法35-37
1.4.1 扫描电子显微镜样品的制备方法35-36
1.4.2 透射电子显微镜样品的制备方法36-37 2 实验结果37-41
2.1 扫描电镜观察结果37-39
2.1.1 营养细胞非分裂期表面形态37-38
2.1.2 分裂期细胞皮层纤毛器的形态发生38-39
2.1.3 休眠包囊的扫描电镜观察39
2.2 透射电镜观察结果39-41
2.2.1 营养细胞的内部结构39-41
2.2.2 休眠包囊的超微结构41 3 讨论41-45
3.1 施氏腹柱虫纤毛器的组成和特征41-42
3.2 施氏腹柱虫纤毛器形成的特点42
3.3 施氏腹柱虫皮层微管骨架的建构特征42-43
3.4 施氏腹柱虫在形成包囊过程中细胞器的分化特征43
3.5 施氏腹柱虫的休眠包囊类型43
3.6 施氏腹柱虫与土壤生活相适应的特征43-45 参考文献45-48 图版说明48-53 图版53-73第三章 纤毛虫施氏腹柱虫细胞纤毛器微管的激光共聚焦显微观察73-92 摘要73 1 材料和方法73-76
1.1 材料74
1.1.1 实验材料来源74
1.1.2 细胞的培养74
1.2 主要实验试剂及配制方法74-75
1.3 主要实验仪器设备75
1.4 标本制备75-76 2 实验结果76-79
2.1 非分裂期细胞纤毛器76
2.2 纤毛器附属微管76-78
2.3 分裂期细胞纤毛器微管胞器的形态发生78-79 3 讨论79-82
3.1 施氏腹柱虫纤毛器微管胞器的组成和建构特征79
3.2 施氏腹柱虫纤毛器基部微管具有与环境相适应的结构79-80
3.3 施氏腹柱虫纤毛器微管胞器的形成与分化特征80-82 参考文献82-84 图版说明84-86 图版86-92附录92-93致谢93
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