吃猪肉感染的寄生虫病--《中国农村医学》1986年01期
吃猪肉感染的寄生虫病
【摘要】：正 吃猪肉的习惯和方法不当,可以引起人体旋毛虫,猪带绦虫、弓形虫等的感染。这些寄生虫能导致人体严重疾患,影响健康,甚至危及生命。故在肉品检验中已将旋毛虫、猪带绦虫的幼虫——猪囊尾蚴列为重要项目进行检验。近年来对弓形虫的危害也在我国引起了注意。
【作者单位】：
【关键词】：
【正文快照】：
吃猪肉的习惯和方法不当,可以引起人体旋毛虫、猪带绦虫、弓形虫等的感染。这些寄生虫能导致人体严重疾患,影响健康.甚至危及生命。故在肉品检脸中已将旋毛虫、猪带绦虫的幼虫—猪囊尾坳列为重要项目进行检验。近年来对弓形虫的危害也在我国引起了注意。旋毛虫 旋毛虫主要寄生
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京公网安备75号抗肿瘤效果截然不同的两种昆虫抗菌肽--《国际医学寄生虫病杂志》2006年05期
抗肿瘤效果截然不同的两种昆虫抗菌肽
【摘要】：目的观测家蝇幼虫抗菌肽与美洲大蠊若虫抗菌肽对肿瘤细胞109(人食管癌细胞株)、K562(人髓样白血病细胞株)的作用。方法通过针刺感染大肠杆菌诱导这两种昆虫产生抗菌肽,再经研磨、离心、层析等步骤提取抗菌肽,然后作用于109和K562肿瘤细胞,用流式细胞仪检测有效杀伤率。结果家蝇幼虫抗菌肽对109的有效杀伤率M1为91．0%(对照50．9%),对K562的有效杀伤率M1为95．5%(对照71．3%)；而美洲大蠊若虫抗菌肽对109的有效杀伤率M1为12．6%(对照57．9%),对K562的有效杀伤率M1仅为3．3%(对照68．5%)。家蝇幼虫抗菌肽对两种肿瘤细胞都有较明显的杀伤效果；美洲大蠊若虫抗菌
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R730.5【正文快照】：
昆虫抗菌肤是昆虫体内产生的由基因编码的一类具有广谱抗菌活性的小分子蛋白，存在于昆虫血淋巴中[‘〕。它们的抗菌谱广，并有抗病毒、真菌、肿瘤细胞的生物活性，不产生耐药性川，对正常人体细胞无伤害仁3〕。近年来，对昆虫抗菌肤的研究成为生命科学领域研究的热点。有关
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京公网安备75号家蚕幼虫期和蛹期发育相关蛋白质组的研究--《苏州大学》2009年硕士论文
家蚕幼虫期和蛹期发育相关蛋白质组的研究
【摘要】：
家蚕是重要的鳞翅目模式昆虫,开展家蚕发育相关蛋白质组的研究,对于揭示昆虫性别发育调控机制及其应用有着重要价值。本文以家蚕血液和脂肪体为材料,利用1DE-LC-MS,2DE,MALDI-TOF-MS等技术对不同发育时期的雌、雄蚕蛋白质进行研究,以期找到与家蚕发育相关的特异蛋白质,解明家蚕性别发育的调控机理。本研究取得了以下结果:
1.以家蚕蚁蚕为材料,探讨了适用于家蚕蛋白质组高通量分析的一维电泳-液相色谱-质谱(1DE-LC-MS)技术。结果显示,1DE-LC-MS技术在家蚕蛋白质组高通量解析、蛋白质混合样品的分离、特异蛋白质组分检测与鉴定及差异蛋白质组研究中都显示独特的应用价值。同时,采用1DE-LC-MS技术构建了基于质谱分析的蚁蚕蛋白质组数据库,结果鉴定了171个无冗余蛋白质组分,分别属于121种蛋白质或亚基,有36种蛋白质或亚基在家蚕及昆虫的基因与蛋白质数据库中尚未被报道,其中与细胞骨架和蛋白质代谢相关的组分最多,达64种。
2.分别从家蚕5龄幼虫期和蛹期不同发育阶段提取雌、雄蚕血液总蛋白质,采用1DE-LC-MS技术进行分离与鉴定。结果表明,在家蚕血液蛋白质含量与种类方面检测到了与性别及发育相关的差异性表达;质谱分析及数据库检索结果共获得了96个相匹配的候选蛋白质,剔除冗余部分后鉴定了其中的27个蛋白质组分,分别属于13种蛋白质或亚基;雌、雄蚕之间的差异组分主要出现在分子质量70-100 kD之间,其中芳基贮存蛋白、卵黄蛋白原、抗胰凝乳蛋白酶因子为雌特异性表达组分;30K蛋白家族是家蚕血液中高丰度表达的蛋白组分。
3.分别以家蚕5龄幼虫期和蛹期不同发育阶段雌、雄蚕的脂肪体为材料,优化了适用于脂肪体蛋白质组研究的IPG-IEF/SDS-PAGE技术,并结合Image Master 2DPlatinum 5.0软件对2DE图谱进行了比较分析。结果在雌、雄蚕脂肪体中检测到了表达差异在2倍以上的蛋白质组分56个,其中5龄幼虫期28个,吐丝结束化蛹前期12个,蛹期16个。同时还检测到雌、雄特异性表达蛋白组分11个,其中,5龄幼虫期5个,吐丝结束化蛹前期4个,蛹期2个。
4.选择表达量相差3倍以上的14个和特异表达的11个凝胶斑点进行胶内酶切-质谱分析,结果鉴定获得了12个蛋白质。其中,与性别发育相关的有8个,2个在雄性中上调表达,分别为肌动蛋白和调宁蛋白;3个在雌性中特异表达,分别为细胞质力蛋白轻链、NADH的75kD亚基和激活蛋白激酶C受体;2个在雄性中特异表达,分别为次黄嘌呤核苷酸环水解酶和原肌球蛋白。与变态发育相关的有4个,2个在蛹期上调表达,均为家蚕30K蛋白;1个在蛹期特异表达,为胰凝乳蛋白酶抑制剂。
5.详细分析了所鉴定的蛋白质后,发现在不同发育时期的雌、雄蚕之间存在一种重要的差异表达蛋白质—活化蛋白激酶C受体(receptor for activated protein kinaseC,RACK)。应用生物信息学方法对家蚕RACK蛋白的基因Bmrack进行了电子克隆,获得了长为1224bp的重组序列,基因编码区为960bp,编码319个氨基酸,分子量为36kD,等电点为8.07,且聚类分析表明RACK蛋白的氨基酸序列在鳞翅目昆虫中非常保守。应用分子生物学实验技术,从家蚕基因组DNA中,PCR克隆了Bmrack基因,序列总长为2122bp,含有4个内含子和5个外显子,通过家蚕全基因组WGS比对,结果与5条序列一致性为99%,且修复了其中8个GAP。
【关键词】：
【学位授予单位】：苏州大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2009【分类号】：S881【目录】：
中文摘要4-6
Abstract6-10
第一章 文献综述12-28
1.1 昆虫发育相关蛋白质的研究概况12-17
1.1.1 贮存蛋白12-13
1.1.2 滞育关联蛋白13-14
1.1.3 热激蛋白14-15
1.1.4 卵黄原蛋白15
1.1.5 载脂蛋白15-16
1.1.6 蛋白酶抑制剂16-17
1.1.7 表皮蛋白17
1.2 家蚕发育相关蛋白质的研究概况17-20
1.3 家蚕性别发育及分子调控机制的研究概况20-23
1.3.1 果蝇及其他昆虫性别决定的分子机制20-21
1.3.2 与果蝇性别决定基因同源的家蚕基因21-22
1.3.3 性别调控级联末端性别分化基因22
1.3.4 家蚕性别调控研究应用与展望22-23
1.4 家蚕发育相关蛋白质组的研究概况23-28
1.4.1 蛋白质组学的概念及技术手段23-25
1.4.2 家蚕蛋白质组学的研究概况25-28
第二章 家蚕蛋白质组高通量分析技术及其应用的研究28-37
2.1 材料与方法28-29
2.1.1 家蚕蚁蚕蛋白质样品的提取28
2.1.2 SDS-PAGE及凝胶样品切取28-29
2.1.3 蛋白质的胶内酶切处理29
2.1.4 串联质谱分析及蛋白质的鉴定29
2.2 结果与分析29-35
2.2.1 家蚕蚁蚕总蛋白质的SDS-PAGE及MS分析29-30
2.2.2 不同检索程序的鉴定结果30-31
2.2.3 不同检索数据库的鉴定结果31
2.2.4 家蚕蚁蚕蛋白质组分的鉴定与分类31-35
2.2.5 家蚕蚁蚕蛋白质组的特征分析35
2.3 讨论35-37
第三章 家蚕性别相关血液蛋白质组的研究37-48
3.1 材料与方法37-39
3.1.1 实验材料37-38
3.1.2 家蚕5龄幼虫和蛹期血液蛋白质的提取与定量分析38
3.1.3 家蚕5龄幼虫和蛹期血液蛋白质的SDS-PAGE38
3.1.4 家蚕5龄幼虫和蛹期血液蛋白质的胶内酶切与质谱分析38
3.1.5 家蚕幼虫血液蛋白质的双向电泳分析38-39
3.2 结果与分析39-46
3.2.1 家蚕5龄幼虫与蛹期血液蛋白质含量的动态变化39-40
3.2.2 家蚕5龄幼虫血液蛋白质SDS-PAGE分析40-41
3.2.3 家蚕蛹期血液蛋白质的SDS-PAGE分析41
3.2.4 家蚕性别与发育相关血液蛋白质的1DE-LC-MS分析41-44
3.2.5 家蚕幼虫和蛹变态期高丰度表达蛋白质的1DE-LC-MS分析44-46
3.2.6 雌、雄幼虫5龄第5天血液蛋白质的2DE分析46
3.3 讨论46-48
第四章 家蚕脂肪体发育相关蛋白质组的研究48-70
4.1 材料与方法48-49
4.1.1 实验材料48-49
4.1.2 家蚕脂肪体蛋白质样品的制备49
4.1.3 家蚕脂肪体蛋白质的双向电泳49
4.1.4 蛋白质双向电泳图谱分析49
4.1.5 蛋白点的胶内酶解与质谱鉴定49
4.2 结果与分析49-69
4.2.1 家蚕脂肪体蛋白质双向电泳技术的优化49-52
4.2.2 雌、雄蚕脂肪体蛋白质差异表达的2DE分析52-58
4.2.3 家蚕不同发育时期脂肪体蛋白质差异表达的2DE分析58-65
4.2.4 雌、雄蚕不同发育时期脂肪体差异蛋白质的质谱分析与鉴定65-69
4.3 讨论69-70
第五章 家蚕Bmrack基因的克隆及序列分析70-83
5.1 家蚕Bmrack基因的电子克隆70-71
5.1.1 材料与方法70-71
5.1.2 结果与分析71
5.2 家蚕Bmrack基因的克隆及序列分析71-82
5.2.1 材料与方法71-73
5.2.2 结果与分析73-82
5.3 讨论82-83
参考文献85-96
攻读硕士学位期间发表的论文96-97
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