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神经干细胞移植的效果怎么样？
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标题: 如何做细胞爬片(细胞爬片)
摘要: [如何做细胞爬片(细胞爬片)] 如何做细胞爬片，能再一个瓶子里得到十几张片吗？而且片子如何选用？如何消毒？能给我提供个具体的实验过程吗？救救我啊！！！ 关键词:[细胞爬片]……
如何做细胞爬片，能再一个瓶子里得到十几张片吗？而且片子如何选用？如何消毒？能给我提供个具体的实验过程吗？救救我啊！！！
回复用盖玻片就行了，可以用鼠尾胶原贴在培养瓶底，不过一瓶要十几张似乎是多了一点。消毒就和普通玻璃消毒一样，放在饭盒里蒸气高温高压消毒。等细胞爬到一定密度后取出。该作什么作什么。回复和设备l 细胞悬浮液；l 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿；l 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于75%乙醇中的盖玻片；l 含血清培养基（通常为 RMPI 1640,含10% 小牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素）；l 超净工作台；l CO2孵箱；l 盖片镊；操作步骤：1． 用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；2． 将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；3． 在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；4． 将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；5． 将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。实验要点及说明1． 本方法适用于贴壁，而不适用于悬浮，悬浮细胞可使用滴片法；2． 所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；3． 盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；4． 如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；5． 如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。回复谢谢饺子：），谢谢奔之流，你们真是太可爱了！我打算去试试，但我老板要求我一瓶细胞要有十张片，我在想这些盖玻片是否可以再捭开两半，那样在六孔板内就可以得到12张片啦，可是六孔板里，我该种哪个浓度合适呢？还有更多详细的资料吗？急切期盼你们的帮助！！！流前辈，再次忠心感谢你的回复，你所说的滴片法，我曾经试过，可是我觉得滴片有两个缺陷：一是密度不太均匀，二是液体要等很久才能干，期间细胞回自溶吗？流前辈，能否为我再指点指点迷津啊！！！！回复谢谢饺子：），谢谢奔之流，你们真是太可爱了！我打算去试试，但我老板要求我一瓶细胞要有十张片，我在想这些盖玻片是否可以再捭开两半，那样在六孔板内就可以得到12张片啦，可是六孔板里，我该种哪个浓度合适呢？还有更多详细的资料吗？急切期盼你们的帮助！！！流前辈，再次忠心感谢你的回复，你所说的滴片法，我曾经试过，可是我觉得滴片有两个缺陷：一是密度不太均匀，二是液体要等很久才能干，期间细胞回自溶吗？流前辈，能否为我再指点指点迷津啊！！！！回复可以掰开来用啊！没问题的。滴片法是有这些缺点，你可以用甩片机甩片啊，这样细胞密度比较均匀。回复看你想做什么，免组？其实爬片没那么复杂，还有你为什么要把盖薄片捭开两半，是在节约盖薄片，还是六孔板？其实爬片中六孔板是可以复用的（原因看下面便知）我的经验是：1.复用六孔板95%or75％浸泡过夜后，再在紫外上照1/2h以上2.盖薄片处理与相同3.将盖薄片放入孔内4.滴加细胞悬浮液于盖薄片上，注意量不要太多，再好不要满出盖薄片（4-5drop）5.孵箱孵育4-5h（还可以据情况调整）后，小心从六孔板侧壁缓缓加入培养液（约1ml），细胞基本贴壁后就可以取出。至于浓度，你可以根据你的需要确定，想盖薄片上细胞多一点，就浓一点，还有滴片法当然弄一点好，细胞密度大，图开后可保证足够的量，液体可以烤或吹回复可以掰开来用啊！没问题的。滴片法是有这些缺点，你可以用甩片机甩片啊，这样细胞密度比较均匀。饺子，怎么掰？那是玻璃，很脆的，是培养前掰还是培养后拿出时分开？唉，我这里的甩片机就是甩的不均匀我才郁闷的，细胞都压在圆圈的边上，中间稀稀拉拉的，甩了两个星期，自己染色看，都不满意。也不知是什么原因，从10的5次方的浓度到10的4次方的都试过了！：（回复看你想做什么，免组？其实爬片没那么复杂，还有你为什么要把盖薄片捭开两半，是在节约盖薄片，还是六孔板？其实爬片中六孔板是可以复用的（原因看下面便知）我的经验是：1.复用六孔板95%or75％浸泡过夜后，再在紫外上照1/2h以上2.盖薄片处理与相同3.将盖薄片放入孔内4.滴加细胞悬浮液于盖薄片上，注意量不要太多，再好不要满出盖薄片（4-5drop）5.孵箱孵育4-5h（还可以据情况调整）后，小心从六孔板侧壁缓缓加入培养液（约1ml），细胞基本贴壁后就可以取出。至于浓度，你可以根据你的需要确定，想盖薄片上细胞多一点，就浓一点，还有滴片法当然弄一点好，细胞密度大，图开后可保证足够的量，液体可以烤或吹我曾试过滴片，如果滴让它自然沉淀，它还是比较均匀的，但是自然干的时间太长了，那样细胞会自溶吗？摊开，我有摊得不均匀。烤片？行吗？细胞还没固定，这么高温可以吗？回复我不是说用高温“烤”。滴片后，小心涂开，我想不会对“均匀”影响较大。再说涂开了，也只有一薄层液体，要干快一点，吹风机就可以了。我这样试过回复还有，要是贴壁细胞，还是爬片的好！回复我不是说用高温“烤”。滴片后，小心涂开，我想不会对“均匀”影响较大。再说涂开了，也只有一薄层液体，要干快一点，吹风机就可以了。我这样试过谢谢你，那你一般滴片用多少体积？5ul还是更多？我用50ul滴，没摊开，很久才干，可能把细胞浓度调高点，少点体积，涂开会好点，是吗？回复我不是说用高温“烤”。滴片后，小心涂开，我想不会对“均匀”影响较大。再说涂开了，也只有一薄层液体，要干快一点，吹风机就可以了。我这样试过谢谢你，那你一般滴片用多少体积？5ul还是更多？我用50ul滴，没摊开，很久才干，可能把细胞浓度调高点，少点体积，涂开会好点，是吗？但我一直不敢用吹风机吹。回复50ul-100ul都可以注意吹风机不要老是近距离的吹回复WHB公司供应（无菌，贴壁处理，拆开即用）24孔板专用的细胞爬片（防脱玻片）：/infosupply/8445630.htm12孔板专用的细胞爬片（防脱玻片）：/infosupply/8445628.htm6 孔板专用的细胞爬片（防脱玻片）：/infosupply/8445629.htm0回复MARKE
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作者：Beyond
来源：生物谷
关键词：杜克大学,造血干细胞,生长因子
日 讯 /BIOON/ --近日，杜克大学医学院的研究人员发现一种蛋白质在造血干细胞和它们居住的“巢穴”之间的相互交流过程中发挥重要作用，这一蛋白质可能是一个长期促使造血干细胞生长的因子。
该蛋白质被称为多人多效生长因子，该因子由骨髓血管中的细胞产生。杜克大学的研究人员在小鼠动物模型中开展研究，发现该蛋白有助于移植的造血干细胞定位于骨髓，之后生成成熟的红细胞和白血细胞。这一发现发表在10月18日的Cell Reports杂志上，该研究发现可能会导致新的治疗方法来加快接受化疗或骨髓和脐血移植患者的恢复。
首席研究员药理学和癌症生物学John Chute医学博士说：我们的假设是类似于促红细胞生成素刺激红细胞前体的方式，人多效生长因子有可能促进造血干细胞的生长。许多患者受益于促红细胞生成素（EPO）的发现，EPO刺激机体产生成熟的红血细胞，促红细胞生成素常用于治疗患者。同样地，粒细胞集落刺激因子是白血细胞的生长因子，主要用于纠正低白血细胞计数，后者主要是由癌症化疗或放射治疗导致的。
在新的研究中，Heather Himburg研究员发现，骨髓中血管内壁细胞产生人多效生长因子，它作为定位装置，可吸引和保留干细胞。然后，研究人员证明遗传工程小鼠缺少编码人多效生长因子的基因，干细胞数量减少，他们骨髓中的血细胞一旦被用尽就很难产生新的血细胞。
当研究人员用抗人多效生长因子的抗体处理正常小鼠后，发现现有的造血干细胞可从骨髓中释放并进入血流。这些研究发现提出了两种可能的治疗用途。人多效生长因子治疗帮助病人在化疗或骨髓移植后更迅速地重新生成自己的造血细胞。抗人多效生长因子抗体可能动员外周血干细胞从骨髓中释放并进入血流。研究人员正计划进一步研究，以了解人多效生长因子如何与其他生长因子相互作用来调节血液中的干细胞的功能。（生物谷：）
Pleiotrophin Regulates the Retention and Self-Renewal of Hematopoietic Stem Cells in the Bone Marrow Vascular Niche
Heather A. Himburg, Jeffrey R. Harris, Takahiro Ito, Pamela Daher, J. Lauren Russell, Mamle Quarmyne, Phuong L. Doan, Katherine Helms, Mai Nakamura, Emma Fixsen, Gonzalo Herradon, Tannishtha Reya, Nelson J. Chao, Sheila Harroch, John P. ChuteSee Affiliations
The mechanisms through which the bone marrow (BM) microenvironment regulates hematopoietic stem cell (HSC) fate remain incompletely understood. We examined the role of the heparin-binding growth factor pleiotrophin (PTN) in regulating HSC function in the niche. PTN/ mice displayed significantly decreased BM HSC content and impaired hematopoietic regeneration following myelosuppression. Conversely, mice lacking protein tyrosine phosphatase receptor zeta, which is inactivated by PTN, displayed significantly increased BM HSC content. Transplant studies revealed that PTN action was not HSC autonomous, but rather was mediated by the BM microenvironment. Interestingly, PTN was differentially expressed and secreted by BM sinusoidal endothelial cells within the vascular niche. Furthermore, systemic administration of anti-PTN antibody in mice substantially impaired both the homing of hematopoietic progenitor cells to the niche and the retention of BM HSCs in the niche. PTN is a secreted component of the BM vascular niche that regulates HSC self-renewal and retention in vivo.
(责任编辑：yan.mao)
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中国的市场的确存在很大的隐患，干细胞行业是个专业性要求较高的行业
个体化医疗是未来医学研究与应用的趋势，而个体化治疗的关键在基于生物分子标志物的诊疗策略
中国疫苗市场的巨大潜力，吸引了世界排名最领先的跨国疫苗制造巨头前来淘金。声明：本文由入驻搜狐公众平台的作者撰写，除搜狐官方账号外，观点仅代表作者本人，不代表搜狐立场。
　　前几天，湘雅医学院王维教授和莫朝晖教授主导的猪胰岛细胞移植治疗1型糖尿病，让人们看到了动物器官移植和治愈1型糖尿病的希望。
　　但是猪胰岛毕竟不是自身组织，对我们人体免疫系统来说依然是外来入侵，所以接受这种治疗方法的患者不得不接受免疫抑制和免疫刺激的治疗。
　　而人体自身干细胞移植则完全排除了这个担忧。
　　那干细胞治疗的效果究竟如何呢？
　　发表在PLoS One.杂志上的一篇文章，详细的统计了到目前为止所有的干细胞治疗糖尿病的实验和治疗。
　　干细胞疗法对糖尿病来说是一种很有前途的治疗方法。
　　本文统计了和干细胞治疗有关的临床试验结果，来确定干细胞治疗糖尿病的功效。我们的目标是客观的评估和总结干细胞疗法对不同类型的1型糖尿病和2型糖尿病的安全性和效率的临床证据。
　　统计结果显示:
　　我们汇集22个合格满足入选标准的临床试验的数据,共有524名患者。但是治疗的效果随着糖尿病类型和注入细胞种类的不同而有显著差异。
　　所有接受CD34+造血干细胞(HSC)注入的1型糖尿病患者，58.9%脱离了胰岛素治疗，时间长达16个月,而那些接受负脐带血干细胞注入的病人的结果都失败了。
　　和骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)相比，注入脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗1型糖尿病出现了非常有益的结果。
　　干细胞治疗在糖尿病诊断早期进行比后期干预更有效。
　　在接受干细胞治疗的2型糖尿病和2型糖尿病人中，只有21.72%的不良反应，且没有死亡报告。
　　所有不良反应者,79.5%被诊断为糖尿病酮症酸中毒。
　　所以干细胞移植疗法对糖尿病患者来说，是一种安全有效的治疗选择。
　　在这些实验中,治疗结果最好的是用CD34 +造血干细胞治疗1型糖尿病,而效果最差的治疗结果是采用脐带血治疗1型糖尿病。
　　而糖尿病酮症酸中毒是干细胞疗法的最大不良反应。
　　---参考文献---
　　PLoS One. 2016 Apr 13;11(4):e0151938. doi: 10.1371/journal.pone.0151938. eCollection 2016.
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不标题，不胡夸，很靠谱的糖尿病内容。湖北孝感学院学生田强主动为白血病捐献造血干细胞
病童候诊痛苦躺地无人让，悲！
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　　中广网北京8月18日消息（记者蒋琦 左艾甫 湖北台王斯擎 孝感台孙亚莉 李梅） 据中国之声《新闻和报纸摘要》报道，湖北孝感学院学生田强主动为白血病捐献造血干细胞，用行动诠释一名90后青年学子的责任和担当。11-08-18新闻和报纸摘要全文>>>　　“晟哥你好，我是田强，我想问一下东东小朋友现在的病情怎么样？”……从北京回来后，田强被学院安排休假，但他的心一直牵挂着上海的东东，在东东身上，流淌着他捐献的造血干细胞。当得知东东目前已经转入普通病房，田强笑了。 　　在孝感学院的一次献血活动中，田强成为中华骨髓库的一名志愿者。今年四月，田强接到通知，他和上海市一名十二岁的白血病患者东东配型成功。田强隐姓埋名，去北京捐献骨髓：“相当于是做一件善事嘛，能够献出自己一份爱心，能够帮助一下是一下，我个人觉得是一件小事。” 　　7月8号，田强在北京进行了第一次捐髓；第二天，当他得知还缺0.5个单位的造血干细胞，毫不犹豫地再次躺在了病床上。孝感学院和老家巴东县政府发给了他近两万元的营养补助费，一向俭朴的田强全部转给了骨髓受捐助方和贫困学生。田强的行动得到了学院和社会的赞扬和支持，也得到了家人的理解，孝感学院党委书记肖波：“捐髓，平凡当中呈现了一种崇高，充分展现了 90 后大学生的时代风采。”　　（中央人民广播电台推出新闻线索爆料平台、新闻热线，登录平台或拨打热线电话，即可将您手中的新闻线索第一时间反馈。我们将第一时间派出记者调查事件、报道事实、揭开真相。）
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