什么是比移值,如何测定?代表了什么,为什么可以用它来进行定性鉴定

酮体的生成与定性实验中,为什么要选用新鲜肝脏? 15%三氯醋酸起什么作用?详细一点,急啊!!!_百度知道
酮体的生成与定性实验中,为什么要选用新鲜肝脏? 15%三氯醋酸起什么作用?详细一点,急啊!!!
选用新鲜肝脏:因为肝脏是生成酮体的主要器官。15%三氯醋酸的主要作用应该是蛋白变性剂,沉淀蛋白
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第四章色层分析法2.ppt 46页
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4.5薄层层析法及其实验技术4.5.1技术参数4.5.2理论基础4.5.3薄层层析固定相选择原则4.5.4薄层层析展开剂选择原则4.5.5薄层层析的实验技术4.5.6应用技术提纲10-60min塔板数高0.01ug薄层层析法特点4.5.1技术参数1)比移值Rf在薄层层析分离中,原点距展开剂前缘的距离为12cm,原点距展开斑点A.B的距离各为6cm.8cm。A.B两斑点的比移值各为多少?RfA=6/12=0.50RfB=8/12=0.67一对斑点层析时移动距离的差值与两个斑点底宽和的比值的2倍。2)分离度Rs3)分离数SNa为Rf=1及Rf=0两种组分斑点中心距离W1/20为Rf=0的组分斑点宽度的1/2W1/21为Rf=1组分斑点宽度的1/2什么是相对比移值(Rf),他如何测定?代表了什么?为什么可以利用它来进行定性鉴定?思考题展开剂在薄层中的流速与展开剂的表面张力γ、黏度η及吸附剂的种类,粒度,均匀度等因素有关,即和层析系统(包括固定相和流动相两方面)有关,但也和展开距离有关。4.5.2理论基础溶剂在薄层中的流速问题L2=kt,V=dL/dt=k/2L1、在薄层层析过程中为什么不讨论平均塔板高度与展开剂流速间的关系,而是讨论与展开距离间的关系?2、设用一定的层析系统进行薄层层析分离时,展开剂前缘移动5cm需要5min。如果展开剂前缘移动10cm层析可以结束,需要多少时间?在展开剂前缘离原点5cm和10cm处,展开剂前缘的上升速度分别为多少?思考题何种层析(吸附、分配、亲和、凝胶)被分离组分性质(极性、离子、分子大小等)吸附剂吸附性能强弱4.5.3薄层层析固定相选择原则选择原则固定相性质被分离物质酸碱性活性分离机制硅胶酸性有吸附/分配几乎所有物质氧化铝碱性有吸附碱性物质(生物碱)和固醇类硅藻土中性无分配糖类、药物氢氧化钙碱性弱吸附类胡萝卜素、维生素E类磷酸钙弱碱性有吸附类胡萝卜素、维生素E类硫酸钙酸性弱吸附脂肪酸、甘油酸纤维素粉中性无分配染料、氨基酸离子交换剂酸或碱离子交换核酸类及其衍生物葡聚糖凝胶中性排阻作用蛋白质、核酸常用固定相吸附层析展开剂对被分离组分有一定的溶解度展开剂对被分离组分有适当的亲和力展开剂极性一般比被分离物质的极性略小分配层析展开剂选择各组分溶解度相差大的溶剂4.5.4薄层层析展开剂选择原则制备薄层板:干板---软板,湿板---硬板定性定量时薄层厚度为0.2-0.3mm制备薄层的厚度要求约为0.5-2mm4.5.5薄层层析的实验技术活化形式:硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、硅胶HF360粘合剂(煅石膏:牢度差,不能用于分离无机物;羧甲基纤维素:牢度好,不能用腐蚀性显色剂;淀粉:不能用于分离有机物)硅胶特殊薄层混合薄层:两种不同吸附剂酸碱薄层:稀酸或稀碱代替水络合薄层:加入络合剂涂布固定液的薄层:具有浓缩区的薄层:不同粒度高效薄层:极细均匀的吸附剂1、层析用硅胶,有硅胶G、硅胶H、硅胶GF254、硅胶HF360等等不同标号,这些分别表示什么?应用这些硅胶时应分别注意些什么?2、聚酰胺薄层的作用机理是什么?3、试比较软板和硬板的优缺点。4、简述混合薄层、酸碱薄层、络合薄层、涂布固定液的薄层、具有浓缩区的薄层、高效薄层的分离原理。思考题点样:溶解试样的溶剂,点液集中,点量精确,点样量适当展开:极性增强顺序:石油醚&环己烷&二硫化碳&四氯化碳&三氯乙烯&苯&甲苯&二氯甲烷&氯仿&乙醚&乙酸乙酯&乙酸甲酯&丙酮&正丙醇&乙醇&甲醇&吡啶&酸三角图形法微量圆环技术原则:先用单一溶剂,再用混合溶剂在硅胶薄层上分离生物碱:单一溶剂:环己烷、苯、氯仿混合溶剂:苯-氯仿(9:1,1:1)环己烷-氯仿-二乙胺(5:4:1)苯-乙酸乙酯-二乙胺(7:2:1)苯-正庚烷-氯仿-二乙胺(60:50:10:0.2)二乙胺:改变极性,调整酸碱度,增大试样的溶解度聚酰胺薄层展开剂洗脱能力的大小顺序:水&乙醇&甲醇&丙酮&稀氢氧化铵(钠)溶液&甲酰胺&二甲基甲酰胺在聚酰胺薄层上用混合展开剂:水-乙醇(1:1)水-甲醇(1:1)水-乙醇-乙酰基丙酮(4:2:1)水-乙醇-丁酮-乙酰基丙酮(13:3:3:1)水-乙醇-乙酸-二甲基丙酰胺(6:4:2:1)二甲基甲酰胺-苯(3:97)数值分析方法用56种展开剂分离22种磺胺类药物时,可较快地找到最佳系统组合展开方式上行展开下行展开径向展开多次展开连续展开双向展开程序控制多次展开法氯仿-甲醇(95:5)为展开剂分离麦角生物碱氯仿:极性较弱,沸点较低边缘效应思考题1、怎样选择薄层层析的展开剂?应该怎样来考虑?2、新发展的薄层技术有哪些?3、用Al2O3薄层层析分离并测
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