两个转录因子预测网站会在叶绿体上互作吗

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病毒功能蛋白与水稻叶绿体蛋白的互作
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论水稻条纹病毒功能蛋白与水稻叶绿体蛋白的互作.pdf66页
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福建农林大学
硕士学位论文
水稻条纹病毒功能蛋白与水稻叶绿体蛋白的互作
姓名:兰汉红
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:吴祖建
座机电话号码
福建农林大学硕士学位论文
近些年,由水稻条纹病毒 Ricevirus,RSV 引起的水稻条纹叶枯病
在许多地区爆发,给农业生产造成了巨大的损失和危害。本文在水稻条纹病毒功
能蛋白筛选水稻eDNA文库的基础上,用酵母双杂交和免疫共沉淀技术从分子
能蛋白SP与水稻叶绿体蛋白SBl6之间的相互作用;以及用荧光定量PCR技术
在mRNA水平检测水稻叶片叶绿体NB2基因在病毒侵染前后的表达量变化;同
时在RSV外壳蛋白CP能够自身互作的基础上,用酵母双杂交技术进一步确定
其自身互作的氨基酸部位。
白SP与水稻叶绿体蛋白SBl6之间的相互作用,提取水稻幼嫩叶片总RNA后,
通过RT-PCR扩增获得水稻叶绿体基因NB2和SBl6全长序列,分别将其连接到
共转化酵母菌AHl09,并涂布不同营养缺陷型选择性培养基平板,检测RSV
体蛋白NB2能与RSVNSvc4发生互作,而与CP、SP不能互作;水稻叶绿体蛋
白SBl6均不与NSvc4、CP及SP互作。
其次,用免疫共沉淀技术在胞内自然生理条件下进一步验证酵母双杂交实验
别扩增获得融合有HA标签的水稻叶绿体NB2、SBl6基因,并插入植物表达载
将重组植物表达载体和带有c.Myc标签的重组植物表达载体pEGAD-NSvc4、
pEGAD.SP分别转化农杆菌EHAl05后,农杆菌处理后以不
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