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【讨论】请讨论下，MSC成骨诱导分化的鉴定那种方法较好？
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这个帖子发布于5年零87天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
现在成骨细胞诱导分化的鉴定的方法较多，有茜素红、ALP、Von Kossa等等，想和大家讨论下各种方法的利弊。
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祝你一项已获成功！我认为von Kossa就没必要做了，碱性磷酸酶是成骨分化的早期信号，其检测意义与茜素红不同，可以做。I 型胶原的免疫组化染色也很有帮助，但是非特异性的。骨唾液酸糖蛋白、骨钙素和骨连接蛋白是晚期成骨分化的标志物。可通过RT-PCR进行基因检测，用蛋白印迹测蛋白成分。使用抗体进行的免疫组化反应可定位细胞所分泌的基质。要让题做的好形态、基因、蛋白水平加上定位测定则是上乘之选。
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茜素红和Von Kossa的检测意义相同均是测骨钙的，二选一即可；ALP是成骨细胞特殊成分，鉴定时应该入选。
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I型胶原、茜素红、碱性磷酸酶三种方式就可以。
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von kossa 和茜素红都是检测矿化结节的，这两者可以二选一。其次可以选择一些特异性的成骨后表达的蛋白，用免疫细胞化学方法进行检测，比如一型胶原，骨钙素，碱性磷酸酶，骨涎蛋白，还可以再选择一个阴性的蛋白，卖个关子这里不说了，你自己查查看吧。再次使用反转录PCR检测特异性蛋白表达基因是否表达。western blot检测特异性蛋白也可以选择，选择余地很大的。最后祝你成功！加油！
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谢谢，个人认为，要是鉴定骨细胞，那么是不是可以用茜素红或者是Von Kossa测骨钙， 不用ALP ？
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ye_xiangyang I型胶原、茜素红、碱性磷酸酶三种方式就可以。您的意思是都用吗,I型胶原是什么作用呢，请多多指教
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sparkwalker von kossa 和茜素红都是检测矿化结节的，这两者可以二选一。其次可以选择一些特异性的成骨后表达的蛋白，用免疫细胞化学方法进行检测，比如一型胶原，骨钙素，碱性磷酸酶，骨涎蛋白，还可以再选择一个阴性的蛋白，卖个关子这里不说了，你自己查查看吧。再次使用反转录PCR检测特异性蛋白表达基因是否表达。western blot检测特异性蛋白也可以选择，选择余地很大的。最后祝你成功！加油！谢谢
我诱导的成骨细胞前天茜素红染色成功，为红色矿化结节，非常漂亮，谢谢大家的支持
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sparkwalker von kossa 和茜素红都是检测矿化结节的，这两者可以二选一。其次可以选择一些特异性的成骨后表达的蛋白，用免疫细胞化学方法进行检测，比如一型胶原，骨钙素，碱性磷酸酶，骨涎蛋白，还可以再选择一个阴性的蛋白，卖个关子这里不说了，你自己查查看吧。再次使用反转录PCR检测特异性蛋白表达基因是否表达。western blot检测特异性蛋白也可以选择，选择余地很大的。最后祝你成功！加油！谢谢
我诱导的成骨细胞前天茜素红染色成功，为红色矿化结节，非常漂亮，谢谢大家的支持
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祝你一项已获成功！我认为von Kossa就没必要做了，碱性磷酸酶是成骨分化的早期信号，其检测意义与茜素红不同，可以做。I 型胶原的免疫组化染色也很有帮助，但是非特异性的。骨唾液酸糖蛋白、骨钙素和骨连接蛋白是晚期成骨分化的标志物。可通过RT-PCR进行基因检测，用蛋白印迹测蛋白成分。使用抗体进行的免疫组化反应可定位细胞所分泌的基质。要让题做的好形态、基因、蛋白水平加上定位测定则是上乘之选。
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楼主，请问你的茜素红是哪个公司的？具体方法是怎么做的？我也是做成骨诱导的，但是茜素红染色结果很不稳定，颜色也不是大红色。谢谢
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我做的茜素红染色也很漂亮，可以交流一下，
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mark 一下，好好学
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你好，我最近也准备做MSC的成骨分化，请问可以咨询您一些诱导试剂的信息么。.谢谢
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你好，请问你做逆转录PCR时候引物设计是参考文献还是自己设计的，做出来了么？
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你好，请问你逆转录PCR设计时引物是用的文献还是自己在PUBMED上面找的啊？
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你好，我最近也在做MSC成骨分化检测，麻烦老师把ALP及茜素红染色的步骤及试剂公司发我一份，谢谢！邮箱，万分感激
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最近想做一下间充质干细胞成骨诱导的实验，但是发现地塞米松储存在了室温下，上面标注的应该是储存在4℃，我在想能不能先用这个来试一下呢？地塞米松会不会变质啊？请大家帮助我一下呗，谢谢啦.
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