扫二维码下载作业帮
拍照搜题，秒出答案，一键查看所有搜题记录
下载作业帮安装包
扫二维码下载作业帮
拍照搜题，秒出答案，一键查看所有搜题记录
考马斯亮蓝法测定蛋白质的公式是什么?
作业帮用户
扫二维码下载作业帮
拍照搜题，秒出答案，一键查看所有搜题记录
公式是根据测量结果自己算出来的：考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5],考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力,通过疏水作用与蛋白质相结合,形成的蓝色蛋白质一染料复合物,在595 nm处有最大吸光度,复合物1 h内保持稳定.在一定的蛋白质浓度范围内,蛋白质一染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质含量的测定.测定时,用同一种标准蛋白（自己选,如牛血清白蛋白,所选的标准蛋白最好是纯化的待测蛋白——但这是理想状态,一般选择氨基酸构成与待测蛋白相近的标准蛋白.否则将影响测定结果）配制成覆盖待测样品蛋白浓度的标准蛋白溶液,然后加等量考马斯亮蓝G-250,混匀后用紫外分光光度计测定个标准蛋白样品的吸光值.并测定待测样品（可稀释成几个不同浓度的样品同时测）的吸光值.所有样品重复测三次.最后以蛋白标准溶液浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线.计算出回归方程.如Y=aX+b让后把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度.只要上数据库一搜,这样的论文多的是,要加强自学能力呀!——赚点分真辛苦!
为您推荐：
其他类似问题
扫描下载二维码请问，小牛血清中含有哪些蛋白质。
相关信息血清的主要成份
血清是一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已为人所知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
1.蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。
纤维粘连素 :促进细胞附着；
α2 巨球蛋白 :抑制胰蛋白酶的作用；
胎牛血清中含胎球蛋白: 促细胞附着；
转铁蛋白: 能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用。
2.多肽：血小板促生长因子能促细胞分裂，是多肽家庭的主要成员之一，是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等，血清中含量虽很少，但对细胞生长也有一定作用。
3.激素：激素对细胞的作用是多方面的。
胰岛素：促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关。
类胰岛素生长因子：能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用。
促生长激素：促细胞增殖效应。
氢化可的松：血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化可的松，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分...
相关信息血清的主要成份
血清是一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已为人所知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
1.蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。
纤维粘连素 :促进细胞附着；
α2 巨球蛋白 :抑制胰蛋白酶的作用；
胎牛血清中含胎球蛋白: 促细胞附着；
转铁蛋白: 能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用。
2.多肽：血小板促生长因子能促细胞分裂，是多肽家庭的主要成员之一，是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等，血清中含量虽很少，但对细胞生长也有一定作用。
3.激素：激素对细胞的作用是多方面的。
胰岛素：促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关。
类胰岛素生长因子：能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用。
促生长激素：促细胞增殖效应。
氢化可的松：血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化可的松，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。
4其他成份
氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
你好！小牛血清去蛋白注射液和小牛血去蛋白提取物注射液主要成分为都是小牛血去蛋白提取物。两种药都是微黄色澄明液体，没什么区别。治疗作用也差不多：改善脑部血液循环和...
牛血清白蛋白的用途：
1、在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境...
胎牛血清、透析型胎牛血清、天然低IGG胎牛血清、干细胞培养胎牛血清、特殊用途胎牛血清、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清、胎牛血清替代物、小牛血清、新生牛血清...
这要看什么手术，请看说明：
小牛血清去蛋白注射液用于
1. 改善脑部血液循环和营养障碍性疾病（缺血性损害颅脑外伤）所引起的神经功能缺损
2. 末稍动脉静脉循环障...
是药三分毒啊
答: 高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌统称湿热灭菌。其原理是通过饱和蒸汽杀死物体上和介质中的全部病原微生物及其孢子和芽孢。湿热灭菌的饱和蒸汽具有很强的穿透力，可以杀死病原微...
答: 动物也需要性教育
今年早些时候曾有新闻报道，成都大熊猫繁育研究基地一只5岁半的美女大熊猫“科琳”进入发情高潮期，与她两情相悦的基地第一帅哥“勇勇”也同步达到发情...
答: 你好.生物科学培养掌握生物科学的基本理论、基本知识和实验技能，能够在高等和中等学校进行教学和教学研究的教师及其他教育工作者，并输送部分研究生。
答: 人类的文化成果通过教育者附着在个体的意识当中，塑造了新的个体，为个体关于未来的指向提供了透视器和显微镜
海鸟的种类约350种，其中大洋性海鸟约150种。比较著名的海鸟有信天翁、海燕、海鸥、鹈鹕、鸬鹚、鲣鸟、军舰鸟等。海鸟终日生活在海洋上，饥餐鱼虾，渴饮海水。海鸟食量大，一只海鸥一天要吃6000只磷虾，一只鹈鹕一天能吃(2～2.5)kg鱼。在秘鲁海域，上千万只海鸟每年要消耗?鱼400×104t，它们对渔业有一定的危害，但鸟粪是极好的天然肥料。中国南海著名的金丝燕，用唾液等作成的巢被称为燕窝，是上等的营养补品。
根本就没有正式的国际驾照，如果到国外开车，正式的程序：
1、到公证处办理驾照的公证书，可以要求英文或者法文译本（看看到哪个国家而定）；
2、拿公证书到外交部的领事司指定的地点办理“领事认证”，可以登录外交部网站查询，北京有4、5家代办的，在外交部南街的京华豪园2楼或者中旅都可以。
3、认证后在公证书上面贴一个大标志；
4、有的国家还要到大使馆或者领事馆盖章一下。
偶前几天刚刚办过。
目前我们的生活水平必竟非同以往．吃得好休息得好，能量消耗慢，食欲比较旺盛，活动又少，不知不觉脂肪堆积开始胖啦。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　减肥诀窍：一．注意调整生活习惯，二。科学合理饮食结构，三。坚持不懈适量运动。
　　　具体说来：不要暴饮暴食。宜细嚼慢咽。忌辛辣油腻，清淡为好。多喝水，多吃脆平果青香焦，芹菜，冬瓜，黄瓜，罗卜，番茄，既助减肥，又益养颜，两全其美！
有减肥史或顽固型症状则需经药物治疗．
如有其他问题，请发电子邮件:jiaoaozihao53@ .或新浪QQ: 1
如何洗衣服？也许有人会说，衣服谁不会洗啊？放到水里，加点洗衣粉洗就成了呗。是啊，说是这样说，可是洗衣服还有不少学问呢。我就说说我的“洗衣经”吧。
说起洗衣服，想想真有不少要说的呢。
首先要分开洗。内衣外衣、深色浅色要分开。个人和个人的衣物也尽量分开洗涤，这样可以防止不同人体间细菌和病菌的相互交叉感染，尤其是宿舍或者朋友的衣服尽量不要放置在一起洗。即使是自己的衣服，内衣和外衣也要分开洗。因为外衣接触外界的污染和尘土较多，而内衣将直接接触皮肤，为避免外界尘螨等对皮肤的不良入侵，内外分开洗涤是有科学道理的。不同颜色的衣物要分开洗涤，可将颜色相近的一同洗涤，浅色的一起洗涤，容易掉色的单独洗涤，避免衣物因脱色而损坏。另外，袜子和其他衣物不要一起洗涤。
其次，使用洗衣粉宜提浸泡一会。洗衣粉功效的发挥不同于肥皂，只有衣物适时浸泡才能发挥最大的洗涤效果。浸泡时间也不宜太长，一般20分钟左右。时间太长，洗涤效果也不好，而且衣物易褶皱。有人洗衣服时把洗衣粉直接撒在衣物上便开始搓揉洗涤，那样不能发挥最好的洗涤效果，对洗衣粉是一种浪费，当然，免浸泡洗衣粉出外。另外，冬季一般宜使用温水浸泡衣物。水温过低，不能有效发挥洗衣粉的洗涤效果，水温太高，会破坏洗衣粉中的活性成分，也不利于洗涤。
再次，衣物及时更换，及时洗涤。衣服要及时更换，相信道理大家应该都很清楚。可是，衣物换下后应该及时清洗，有人却做的不好。好多家庭喜欢将换的衣服积攒起来，每周洗一次，这样很不科学，容易使衣物上积聚的细菌大量繁殖，容易诱发皮疹或皮肤瘙痒症状。为了个人和家人的身体健康，还是勤快一点，把及时换下的衣物及时洗涤，这样，其实也费不了多少时间，也不至于最后要花费半天甚至更长 的时间专门来洗涤大量的衣物要节约的多。另外衣服穿的太久就比较脏，要花很大的力气洗涤才能洗干净，也容易将衣物搓揉变形，而影响美观和穿着效果。
洗衣服是个简单的小家务，也是生活中不可缺少的一件事，学问却很多，也许您的“洗衣心得”比这还要科学，还要多样，欢迎您 的指正~~
玉林大学名单玉林共有2所高校，其中本科高校1所，专科高校1所，详细名单如下：玉林本科大学名单学校名称所在地办学层次备注玉林师范学院玉林市本科公办玉林专科大学名单学校名称所在地办学层次备注玉柴职业技术学院玉林市专科民办1玉林师范学院简介玉林师范学院坐落在著名的语言学家王力的故乡、中国优秀旅游城市、广西东南部的千年古城玉林市，占地面积1746亩，是广西壮族自治区直属全日制普通本科高校。学校创办于1945年，原名广西省立鬰林师范学校，1952年春改名为玉林师范学校，1958年升格为广西玉林专区师范专科学校，开始招收高等教育层次的专科生。1962年更名为玉林专区师范学校。1978年经国务院批准恢复玉林师范专科学校。1994年更名为玉林师范高等专科学校。2000年，经教育部批准，玉林师范高等专科学校、玉林市教育学院、玉林市高等职业技术学院、广西广播电视大学玉林分校，合并升格为玉林师范学院。
2018绥化本科大学一共有1所，其中公办本科大学有1所，民办本科大学有0所。全部名单数据请看下表：学校名称学校标识码主管部门所在地办学层次备注绥化学院黑龙江省绥化市本科公办绥化学院是黑龙江省属公立综合性普通本科高等学校，座落在中国寒地黑土绿色物产之乡绥化市，与省会哈尔滨相距70余公里。1953年，经黑龙江省教育厅批准，绥化县创办了绥化师范学校；1978年，经国务院批准，成立绥化师范专科学校，是“文革”后国家首批设立的高等师范专科学校之一；2004年，经国家教育部批准成立绥化学院。创建时间学校类型学科类型隶属单位1953年公立综合黑龙江省人民政府.
湛江民办本科院校一共1所，全部名单数据请看下表：序号学校名称学校标识码主管部门所在地办学层次备注1广东海洋大学寸金学院广东省教育厅湛江市本科民办广东海洋大学校舍总面积36万多平方米，其中教学行政用房18万多平方米，教室面积为12.3万平方米，多媒体教室座位数21112个，学生宿舍14.5万多平方米，教工宿舍和其他生活用房3.5万多平方米。图书馆藏书总量200多万册。建有公共实验室、专业实验室96个；建有校外就业实习基地142个；教学科研仪器设备总值6400多万元，固定资产总值9亿多元。创建时间学校类型学科类型隶属单位1999年私立综合广东省教育厅。
2018江门本科大学一共有1所，其中公办本科大学有1所，民办本科大学有0所。全部名单数据请看下表：学校名称学校标识码主管部门所在地办学层次备注五邑大学广东省江门市本科公办五邑大学地处“中国第一侨乡”—广东省江门市，是珠江三角洲西岸唯一一所以工科为主的多科性教学型地方大学。学校占地1000余亩，总建筑面积约60万平方米，设有17个教学院（部），拥有工、理、经、管、文、法、艺术等7个学科门类，45个本科专业，6个一级学科硕士学位授权点，27个二级学科硕士学位授权点，2个专业硕士学位类别。创建时间学校类型学科类型隶属单位1985年公立综合广东省教育厅
白山专科学校仅有一所，即长白山职业技术学院。长白山职业技术学院介绍长白山职业技术学院是经吉林省政府批准，国家教育部备案的一所具有高等教育招生资格的公立高职院校。学院座落在白山市区中心，占地338亩，建筑面积12万平方米，教职工513人，现有在校生4,300人。学院是以高等职业教育为主，兼顾中等职业教育，同时开展社会培训和职业技能认证教育的多层次、多门类教学型高职院校。创建时间学校类型学科类型隶属单位2008年公立综合吉林省教育厅
IT外包公司在创办初期的成本会太高，几台电脑再再加一间办公室就可以了。但是想把公司运作一起却很难，首先是现在的互联网时代网络业务外包公司遍地开花，太多了；其次是公司业务的来源。只要你需要解决问题公司过渡期的业务来源，你就可以开公司了。但是如果没业务来源，或者说不平稳，建议你先别开公司，等时机成熟之后再开！
玳瑁手串配绿松石、雨花石等艳丽一点的珠子即可。
　　玳瑁维修迷信讲究：
　　不要与含酒精和酸性液体认识，以免生锈到玳瑁制品。
　　不要把玳瑁饰品放到热水中侵泡，因为给玳瑁冷却后，会使玳瑁变硬、变形。（用热水也是一种辨别玳瑁的方法）。
　　如果长时间不配戴应当用坚硬的布涂抹在展开留存。另外，玳瑁配戴时间长会变得没光泽度，能用润肤油涂抹，让玳瑁首饰完全恢复光泽 。
我就是云帆的，喜报是真实的。其实今年复读生考的都不好，因为新课标第一年中考，出题的老师都要竭力维护新课标的面子，给社会一个交代。以后复读生就好了。云帆的喜报主要是展现出学生们的增分情况。说实话，他们只看分数，会关心你志愿填的怎样。我之前也是省重点中学毕业的，必须说一句，云帆的自学氛围比省重点好多了，但老师的水平连初中老师都不如！！烂的很。关键看你自己了，初中本来就要自觉地，而且环境很最重要，云帆可以符合这一点。他们也有入学分数线的。食堂很黑很黑，不可想象，不是滑稽！
要看你是纯乳胶床垫还是床垫表面加乳胶的，如果是纯乳胶的话建议用于板材的床架，且高箱床最宜，以免导致凸起。如果是床垫表面加乳胶的那倒不必担忧，您就随意了。
深圳幸福旅途旅游有限公司比较好，你可以看下。
你好！首先祝你身体健康！我来和你介绍“小牛血清”。
1）小牛血清提取物
1. 适应病症：角膜上皮层细胞的营养性损伤、创伤性角膜炎、免眼性角膜炎、神经麻痹性角膜炎、角膜移植手术并发症及预防并发症、角膜糜烂及异物性角膜损伤。
2. 用量用法：点眼，用于各种原因引起的角膜炎或角膜溃疡遵医嘱。一般病人每日在眼球或结膜囊涂本品数次，每次1滴。
3. 注重事项：至今尚未见明显的不良反应。
4. 药品规格：每支5克。
2）小牛血清去蛋白注射液
小牛血清去蛋白注射液的主要成分是小分子激活肽和磷酸肌醇寡糖。
临床上用于治疗缺血性脑血管病。其能保护大脑神经细胞，减轻脑缺血再灌注损伤，改善脑供氧和能量供应，有消除氧自由基、促进神经细胞修复等作用。
以上回答如果满意，请不要辜负我的一片好意，及时采纳为答案。
普拉洛芬滴眼液是抗生素,里面含有小牛血清去蛋白的
小牛血清去蛋白注射液可增强组织细胞对氧及葡萄糖摄取与利用作用改善细胞乏氧状态和机体内环境增加心、脑、肝等脏器的血流量改善微循环主要是用于脑缺血、脑痴呆、脑外伤及大脑功能不全等脑细胞代谢障碍性疾病用于改善脑供血不足、颅脑外伤引起的神经功能缺损临床也可用于：1．末稍动脉、静脉循环障碍及其引起的动脉血管病腿部溃疡2．皮肤移植术 小牛血去蛋白提取物注射液主要是改善微循环没有提高免疫力的功效
牛痘疫苗致炎兔皮提取物，牛痘血清去蛋白注
这个不好确定的，是受地区现在的，地区不同医保的范围用药等是不同的，最好是去当地咨询，这样更好点
有区别,胎牛血清含有丰富的胚胎发育过程中必须的一些生长因子和激素等。而小牛血清中的含量则少很多。
牛血清的主要成份
血清是一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已为人所知，但还有一部分尚不清楚，而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。
1.蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。
纤维粘连素 :促进细胞附着；
α2 巨球蛋白 :抑制胰蛋白酶的作用；
胎牛血清中含胎球蛋白: 促细胞附着；
转铁蛋白: 能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用。
2.多肽：血小板促生长因子能促细胞分裂，是多肽家庭的主要成员之一，是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等，血清中含量虽很少，但对细胞生长也有一定作用。
3.激素：激素对细胞的作用是多方面的。
胰岛素：促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关。
类胰岛素生长因子：能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用。
促生长激素：促细胞增殖效应。
氢化可的松：血清中含有定量的该成分，它可能兼有促细胞贴附和增殖作用，但有人证明，血清中的氢化可的松，如细胞密度高时可能有抑制细胞的作用和诱导其发生分化。
氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。
请看说明：
小牛血清去蛋白注射液用于
1. 改善脑部血液循环和营养障碍性疾病（缺血性损害颅脑外伤）所引起的神经功能缺损
2. 末稍动脉静脉循环障碍及其引起的动脉血管病腿部溃疡
3. 皮肤移植术皮肤烧伤烫伤糜烂愈合伤口（创伤褥疮）放射所致的皮肤粘膜损伤
小牛血清去蛋白注射液可以用于静脉注射动脉注射肌内注射也可加入输液中滴注或加入200～300ml5%葡萄糖或0. 9%氯化钠注射液中静脉滴注滴注速度约2ml/min
1. 静脉给药
(1) 脑部缺血性损害一次20～30ml静脉滴注一日一次连续2～3周
(2) 动脉血管病一次20～50ml静脉滴注一日一次或一次20～50ml动脉或静脉注射每周数次四周一个疗程
(3) 腿部或其他慢性溃疡烧伤每次10ml静注(或5ml肌注)一日一次或每周数次按愈合情况可加用小牛血清去蛋白注射液局部治疗
(4) 放射引起的皮肤粘膜损伤的预防和治疗在放疗期间平均一日5ml静注
2. 尿道给药
放射性膀胱炎一日10ml联合抗菌素治疗经尿道给药
对小牛血清去蛋白注射液或同类药品过敏者禁用
【不良反应】
过敏反应极为罕见(例如荨麻疹皮肤潮红药物热休克等)如发生过敏反应立即停药并给予抗过敏处理
【注意事项】
1. 小牛血清去蛋白注射液不宜与其他药物混合输注
2. 小牛血清去蛋白注射液为高渗溶液肌内注射时要缓慢注射量不超过5ml
【孕妇及哺乳期用药】
小牛血清去蛋白注射液对母婴无不良影响但使用时要注意对婴儿可能产生的潜在危险
【药理作用】
小牛血清去蛋白注射液能促进细胞对葡萄糖和氧的摄取与利用在低血氧以及能量需增加等情况下小牛血清去蛋白注射液可以促进能量代谢增加供血量
1.改善脑部血液循环和营养障碍性疾病(缺血性损害、颅脑外伤)所引起的神经功能缺损。&br/&2.末稍动脉、静脉循环障碍及其引起的动脉血管病，腿部溃疡。&br/&3.皮肤移植术；皮肤烧伤、烫伤、糜烂；愈合伤口(创伤、褥疮)；放射所致的皮肤、粘膜损伤。
本品能促进细胞对葡萄糖和氧的摄取与利用。在低血氧以及能量需增加等情况下，本品可以促进能量代谢。增加供血量。
正在加载...
Copyright &
Corporation, All Rights Reserved
确定举报此问题
举报原因(必选)：
广告或垃圾信息
激进时政或意识形态话题
不雅词句或人身攻击
侵犯他人隐私
其它违法和不良信息
报告，这不是个问题
报告原因(必选)：
这不是个问题
这个问题分类似乎错了
这个不是我熟悉的地区
相关问答：123456789101112131415蛋白质标准品中的牛血清蛋白的规格有什么要求没？型号为阿拉丁Ag；H1308020可以作为标准品用吗？_百度知道
蛋白质标准品中的牛血清蛋白的规格有什么要求没？型号为阿拉丁Ag；H1308020可以作为标准品用吗？
就是市售的牛血清蛋白可以直接买来作为蛋白质标准品吗？还是测蛋白质的话只能用标注为“蛋白质标准品”的样品来测
提示该问题下回答为网友贡献，仅供参考。
我有更好的答案
看你实验的具体要求吧，很多标准品都是特制的，但不同实验的话误差允许范围内的可以用其他替代影响不大，还是看使用目的吧
采纳率：66%
为您推荐：
其他类似问题
牛血清蛋白的相关知识
换一换
回答问题，赢新手礼包
个人、企业类
违法有害信息,请在下方选择后提交
色情、暴力
我们会通过消息、邮箱等方式尽快将举报结果通知您。考马斯亮蓝法测定牛血清蛋白的标准曲线！！_百度知道
考马斯亮蓝法测定牛血清蛋白的标准曲线！！
运用考马斯亮蓝法测定的牛血清清蛋白的标准曲线~~~要标准曲线或数据均可~~~谢谢~~~
我有更好的答案
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、 标准曲线一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、 蛋白质含量测定方法1、 凯氏定氮法2、 双缩脲法3、 Folin-酚试剂法4、 紫外吸收法5、 考马斯亮蓝法三、 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作（一）、试剂：1、 考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。2、 标准蛋白质溶液：纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。（二）、器材：1、722S型分光光度计使用及原理（）。2、移液管使用（）。（三）、标准曲线制作：试管编号 0 1 2 3 4 5 6100ug/ml标准蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.60.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4考马斯亮蓝试剂 （ml） 5 5 5 5 5 5 5摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色A595nm
1、2、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。1）、利用标准曲线查出回归方程。2）、用公式计算回归方程。3）、或用origin作图
，测出回归线性方程。即A595nm=a×X(
)+6一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。（四）、蛋白质含量的测定：样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。（五）、注意事项：1、 玻璃仪器要洗涤干净。2、 取量要准确。3、 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。4、 对照：用被测物质以外的物质作空白对照。药品的配制（磷酸缓冲液的配制）一、药品的配制步骤（一）、实验准备：1、 准备所需的药品和玻璃仪器。2、 洗涤。（怎样洗涤算干净？）（二）、计算：1、百分比浓度计算：1)、G/V比例如配1% NaCl，称1g NaCl溶于100ml 水。2）、V/V比：例如配75%乙醇100ml，75%×100%=100%×X,
X=75ml。取75ml无水乙醇，加25ml蒸馏水。乙醇：乙醚：丙酮=2：1：2配500ml，各取200 ml，100 ml，200 ml混合。3）G/V比：用的较少，如计算灰分中某种元素如Fe的含量。2、摩尔浓度计算：注：药品的分子量一般在标签中注明。1）、0.1M或0.1mol/L NaCl配100ml。M=质量/体积（L）称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g
摩尔数=G（g）/摩尔质量2）、0.1mMNaCl配100mlmM=毫摩尔数/体积（L）
称取NaCl0.1×0.1×40=0.4g
毫摩尔数=G（mg）/摩尔质量3）、0.1uNaCl配100mlmM=微摩尔数/体积（L）
称取NaCl0.1×0.1×40=0.4mg微摩尔数=G（ug）/摩尔质量
称取NaCl0.1×0.1×40=0.4ug 3、 混合溶液配制的计算：如配3uMEDTA，2.25mM NBT以及60uM
溶液100ml，用50mM磷酸缓冲液配制。注意：1、分别标定体积计算2、分别配制再混合，但总体积不能
为100ml（三）、标量：1、 根据需要选择不同量程的天平根据要求去不同精度的测量器，如量筒或移液管。2、 电子分析天平的使用。（四）、溶解：1、 根据药品配置要求选择溶剂。蒸馏水，双蒸水，无离子水等。2、 只能用烧杯溶解。注意加入溶剂只能加入总体积的2/3左右，剩余溶剂洗涤烧杯三次左右，直到洗涤干净。小常识：药品标签中一般标识有药品的溶解性能和分子式，可根据分子式和所学的常识判断药品的结构和性质特点（包括溶解性质）。如酸碱两性物质的配制（AA、蛋白质、核苷酸等）如果溶解性能不好可以用稀酸或稀碱促进溶解，但pH应在被要求的范围内。3、 加热促进溶解，但注意应在配制的范围内有的药品还需水溶加热较好。如:配0.1%的淀粉，水裕加热（温度在80-90。C），过量会糊化。（五）、定容：1、 用容量瓶定容；2、 用玻璃棒引流或用小漏斗；3、 用溶剂加入到接近刻度，然后用滴管加入到刻度。要求刻度与液体凹面相切为止（眼睛可视）；4、 上下窑洞容量瓶几次，混合均匀即可。(注意不再定容了，防止溶液漏掉。)（六）、装入试剂瓶，贴上标签。标签应注明以下内容：药品浓度、名称、配制人、配制日期等。（七）、清理实验场所。二、磷酸缓冲液的配制。（一）、配制0.2mol/L即0.2M pH=6.8的磷酸缓冲液。用磷酸氢二钠—磷酸二氢钠做缓冲液。选用药品：Na2HPO4&#O（碱）和NaH2PO4&#O（酸）配缓冲液100ml。书中说明。（二）、计算 ：1、 注：书中有注明配置的量。2、 计算：Na2HPO4&#O称取71.64×0.1=7.164gNaH2PO4&#O称取 31.21×0.1=3.121g3、 含有不同结晶水的换算。书中配1/15mol/L的缓冲液配1L，书中用Na2HPO4&#O需要11.87g/L但用Na2HPO4&#O需多少g？11.87=（178/358）×X，X=23.87g。（三）、分别配制缓冲液各100ml（根据需要确定配制的量）。即：0.2M
Na2HPO4&#O和NaH2PO4&#O100ml。（四）、按书中的量配制取量再混合。如：pH=6.8，分别去缓冲对49ml和51ml。（五）、用pH试纸ceni索赔的缓冲液的pH值，检测配置是否准确。（六）如配50mM pH =6.8的缓冲液100ml ，以你配制的母液稀释即可。计算：50×0.1=0.2×1000×X （L）；X =0.025L；取0.2M
pH=7.2的缓冲液25ml，用蒸馏水定容至100ml即可。
采纳率：42%
为您推荐：
其他类似问题
您可能关注的内容
考马斯亮蓝法的相关知识
换一换
回答问题，赢新手礼包
个人、企业类
违法有害信息,请在下方选择后提交
色情、暴力
我们会通过消息、邮箱等方式尽快将举报结果通知您。