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2平板划线法分离菌种与斜面接种培养
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制作斜面固体培养基的时候,是不是只用把在培养皿中的固体培养基倒到试管中就好了?怎么把大肠杆菌接种到斜面固体培养基上?液体培养基转为固体培养时,怎么用划线的方法接种,麻烦讲下过程.
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1、将配制好的固体培养基（琼脂凝固前）,分装到试管中,大概1/4～1/3试管高度,灭菌后摆斜面2、有接种环将大肠杆菌划线到斜面上3、用接种环直接挑取划线!不明白的话,继续问!
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扫描下载二维码请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________________；它的同化作用类型是______________。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于_____________（选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是___________________.（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行__________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_____________。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能___________。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_________________。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_____________。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________________（2分）。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过______________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______________.A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作，原因是____________________________________（2分。至少写出两条）。 - 跟谁学
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关注我们官方微信关于跟谁学服务支持帮助中心本题难度：0.56&&题型：选择题
下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（　　）
A、B、C、D、
来源：2016o上海模拟 | 【考点】微生物的分离和培养．
（2016o江西模拟）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．请分析回答下列问题：（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是：&&&&．（2）取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养．图乙是经过图甲过程A&纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是&&&&（用编号表示）．研究者在图甲过程C&的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是&&&&．（3）将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以&&&&&为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．（4）从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA，利用PCR&技术大量扩增获得目的基因．若将1个目的基因分子复制10&次，则需要在缓冲液中至少加入&&&&个引物．将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏&&&&&能力的酿酒酵母作为受体菌．（5）将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含&&&&的培养基中进行酒精发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能&&&&，即说明所需菌株培育成功．
（2016o江西校级一模）回答下列关于生物技术实践的问题：（1）传统发酵技术中，利用微生物发酵生产特定的产物，很多都是中华民族的传统食品．请将下列微生物与对应的发酵产物联系起来：①乳酸菌&&②根瘤菌&&③蓝藻&&④醋酸菌 ⑤毛霉&&⑥酵母菌&&⑦大肠杆菌&&⑧曲霉制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的主要微生物依次是&&&&（填相应序号）；其中泡菜制作的原理是（用反应式表示）：&&&&2C3H6O3（乳酸）．（2）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化&&②调pH&&③加棉塞&&④包扎&&⑤分装&&⑥称量正确的顺序为&&&&；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是&&&&．（3）菊花的组织培养中要求无菌操作的目的是&&&&，在愈伤组织形成过程中常用的培养基是MS培养基，并且需要添加&&&&；愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为&&&&，此过程&&&&（填“需要”或“不需要”）光照．
（2016春o吉林校级月考）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．请分析回答下列问题：（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是&&&&．（2）取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养．图乙是经过图甲过程A&纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是&&&&（用编号表示）．研究者在图甲过程C&的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是&&&&．（3）将培养基上的酵母菌菌株转接到仅以&&&&&为碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．（4）从以上筛选得到的活酵母菌中提取DNA，利用PCR&技术大量扩增获得目的基因．若将1个目的基因分子复制10&次，则需要在缓冲液中至少加入&&&&个引物．将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，然后将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏&&&&&能力的酿酒酵母作为受体菌．（5）将经上述流程培育获得的转基因酿酒酵母接种在含&&&&的培养基中进行酒精发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能&&&&，即说明所需菌株培育成功．
国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个．某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红-美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈深紫色．请根据下列有关实验步骤回答问题．（1）配制培养基：配制伊红-美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要水、无机盐和&&&&．在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是&&&&．搅拌加热至完全溶解后调节&&&&，分装到锥形瓶．（2）倒平板：配制好的培养基用&&&&法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板．平板冷凝后应将平板&&&&放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基．（3）接种：在如图的系列稀释操作中（101、102、103表示稀释倍数），依次将1mL液体移入下一个盛有&&&&mL蒸馏水的试管中．过程a所用的接种方法为&&&&．（4）观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标&&&&万倍．
下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（　　）
A、B、C、D、
解析与答案
（揭秘难题真相，上）
习题“下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（　　）”的学库宝（/）教师分析与解答如下所示：
【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面在数次划线后培养可以分离由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群这就是菌落．
【解答】解：A、倒平板时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿左手立即盖上培养皿的皿盖防止空气中的杂菌污染故A正确B、左手将培养皿打开一条缝隙右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内故B正确C、五个区域内划线而且每次转换划线角度后再进行划线让菌种来源于上一次划线末端故C正确D、没有让接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作故D错误．故选：D．
【考点】微生物的分离和培养．
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知识点讲解
经过分析，习题“下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，”主要考察你对
等考点的理解。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
知识点试题推荐
1&&&&2&&&&3&&&&4&&&&5&&&&6&&&&7&&&&8&&&&9&&&&10&&&&11&&&&12&&&&13&&&&14&&&&15&&&&
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平板分区划线法哪位了解？
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平板分区划线法哪位了解？
提问者：沈华翰|
时间： 18:47:07
已有3条答案
回答数：3210|被采纳数：0
所有回答：&3210
平板分区划线法，平板分区划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表点击此处添加图片说明面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。希望能帮到你
回答数：4094|被采纳数：1
所有回答：&4094
（一）、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，挑取大肠杆菌（或葡萄球菌）培养物少许。
（二）、左手斜持琼脂平板，皿盖留在桌上，于火焰近處將菌塗于瓊脂平板上端，來回劃線，涂成薄膜（约占平板总表面积的十分之一），划线时接种环与平板表面成30~40?角，轻轻接触，以腕力在平板表面行轻快地滑移动作，接种环不应划破培养基表面。
（三）、烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面五分之一左右，再次烧灼接种环，等三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完。
（四）、划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养二十四小时后观察结果。
希望对你有帮助
回答数：1625|被采纳数：0
所有回答：&1625
平板分区划线法：由接种环以菌 &&作沾取少 &&待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。 &&二、稀释倒平板法 &&先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 &&1 &&∶ &&10 &&、 &&1 &&∶ &&100 &&、 &&1 &&∶ &&1000 &&、 &&1 &&∶ &&10000 &&…),然后分别取不同稀释液少 &&,与已溶化并冷却至 &&45 &&℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保 &&培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散。
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