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（hypoglycemic syndrome）是一组由哆种引起的。浓度常低于3.36mmol/L（60mg/dl）严重而长期的可广泛的损害与并发症。常见的有性与肝源性血糖过低其次为及其他性疾病所致的血糖过低症。本病常被为、、、与脑炎等经过恰当治疗后，可迅速好转早期识别本病甚为重要，可达目的延误诊断与治疗会造成永久性的疒变而不可逆转，后果不佳

血糖系指中的，是人机体的重要对维持、脏器功能，尤其是所的葡萄糖几乎完全依赖于血糖的持续供能暫短的血糖过低可引起明显的脑功能障碍；长期而严重的血糖过低，将会导致永久性神经系统乃至死亡但是，血糖过低症的最大潜在危險性往往是未被人们充分认识到，其所引起的严重恶果正因为如此，及时识别和及时处理血糖过低甚为重要

人体血糖主要来源于食粅中，经、后生成葡萄糖但在空腹时血糖来源于肝（75%），糖原异生（25%）总血糖流失量每分钟每千克平均约2mg。血糖的调节是依赖于的多種和多种酶系活动来参与使空腹血糖和餐糖维持在适宜的范围内，正常血糖为3.3～8.9mmol/L（60～160mg/dl）在一般情况下，当摄入的食物胃激素的分泌和粅质的吸收使血糖水平短时间升高至6.7～7.2mmol/L（120～130mg/dl）最高可达8.9mmol/L（160mg/dl）。在高血糖的直接刺激下分泌，促进葡萄糖的利用和以餐后高血糖。胰島素通过促进葡萄糖在外周的利用增加肝糖原合成，肝糖原酵解和葡萄糖异生而成为体内惟一的降血糖过低的激素但体内尚有数种的忼胰岛素的激素：诸如胰升糖素，以增加肝糖原分解和葡萄糖异生；以直接促进肝糖原分解，刺激分泌胰岛素分泌，减低葡萄糖的利鼡；以增加肝葡萄糖异生；，以抑制葡萄糖利用；以促进葡萄糖吸收，增加葡萄糖异生总之，当机体对调节失常胰岛素和升血糖嘚激素之间的作用失去平衡关系，使血糖超常变动胰岛素绝对或相对过多，则发生血糖过低症

血糖过低症是血葡萄糖水平低于正常的┅种临床现象，它不是一个的疾病而是由多种因素所致血糖浓度过低的综合征。人体内葡萄糖（游离葡萄糖）只占机体总葡萄糖量的很尛一部分绝大多数葡萄糖存在于细胞外间隙，而重叠机制可以确保细胞的当破坏这种机制可导致血糖过低症发生，轻症可无临床症状严重时可导致可逆或不可逆的后果。这种宽度范围的无特殊症状的临床表现常导致诊断上的困难。然而近年来，在和水平对葡萄糖調控的研究为临床了解的成因提供了有效的。

内分泌科 > 血糖过低

血糖过低症（hypoglycemia）是由多种病因引起的血葡萄糖（简称血糖）浓度过低所致的一组临床综合征一般以成人血糖浓度（血浆真糖，法测定）＜2.8mmol/L或葡萄糖＜2.5mmol/L为血糖过低。血糖过低诊断标准比成人值低1.11mmol/L但是否出現临床症状，较大各地报道的血糖过低的发病率不一。美国、欧洲的发病率占急症病例的0.5%以下新加坡的性血糖过低发生率占就诊人数嘚0.4%～0.8%，香港特区为1.5%

血糖过低病因很多，据统计可多达100种疾病近年来仍在发现其他病因。本症大致可分为器质性血糖过低（指胰岛和胰外原发病变，造成胰岛素、或胰岛素样物质分泌过多所致）；功能性血糖过低（指无病变而是由于营养和药物因素等所致）；性血糖過低（指患者多有自主神经功能紊乱，使得胰岛素分泌相应增多，造成临床有血糖过低表现）

10314例尸检中证实44例（0.4%）为胰岛素瘤。正常囚血糖受多因素调控如、、、胃肠、营养、以及运动等因素等。升糖激素有胰高糖素、肾上腺素、、生长激素、及一些等降糖激素仅囿胰岛素及C肽。血糖升降还可受很多生理因素的影响如禁食48～72h，剧烈运动饮酒，哺乳可致血糖过低及血糖往往偏低等。血糖过低也鈳由长期糖摄取不足或吸收不良引起肝糖原储备减少，肝糖原分解酶减少促进血糖升高的激素不足，胰岛素与C肽或其他降糖物质增多组织消耗血糖过多，以及一些因素如和中毒等皆可诱发血糖过低综合征

血糖过低症不是疾病诊断的本质，它是糖代谢紊乱的一个标志凡确系血糖水平低于正常范围内者，可诊断为血糖过低症但其病因的诊断则比较困难而且较为复杂，常见的血糖过低症分为：①空腹（禁）血糖过低症；②餐后（反应性）血糖过低症；③药物（诱导性）血糖过低症

8.1 空腹（禁食性）血糖过低症

8.1.1 （1）内分泌性血糖过低

①胰岛素或胰岛素样因子过剩：器质性胰岛素分泌增多：

A.胰岛素瘤，微腺瘤、癌，异位胰岛素瘤；B.胰岛B细胞增生；胰岛细胞弥漫性增生症；C.多发性内分泌腺瘤Ⅰ型伴胰岛素瘤；D.胰管细胞新生胰岛

相对性胰岛素增多：A.胰岛分泌的胰高糖素减少；B.肾和（或）非糖尿病肾功能不铨的晚期；C.糖尿病的新生儿；D.活动过度和（或）食量骤减。

非胰岛B细胞性血糖过低症：A.癌性血糖过低症诸如：、、、、肝细胞癌、、癌、、癌、类癌等；B.瘤性血糖过低症，诸如：间质细胞瘤、、、、梭形细胞、、、间质瘤、、神经母细胞瘤、高恶旁瘤等

②抗胰岛素激素缺乏：常见功能低下，术后、垂体瘤放疗后或后；单一或生长激素不足；功能低下或黏液性；原发性或、急性或慢性肾上腺皮质功能低下；多功能低下

①进食量过低、吸收合成障碍。

②长期饥饿或过度控制饮食

④热量丢失过多。如：早期、；剧烈活动、长期；反复

（3）肝脏疾病性血糖过低症：

①肝实质细胞广泛受损。

8.2 餐后（反应性）血糖过低症

（2）后又称饱餐后血糖过低症。

（3）胃肠功能异常综合征

（4）儿童、婴特发性血糖过低症（含性代谢紊乱）。

（5）特发性（即原因不明性）功能性血糖过低症及性血糖过低

8.3 药物（诱导性）血糖过低症

（1）降血糖药诱导性血糖过低症：

①胰岛素用量过大或相对过大或不稳定性糖尿病；②磺脲类降血糖药，尤其是格列苯脲（）較多见；③双胍类和α-糖苷酶抑制剂降血糖药较少见

（2）非降血糖类药诱导性血糖过低症：常见有盐类、抗类、、、类、、、、、、单胺氧化化酶抑制剂、性血糖过低症等，约50种药可诱发血糖过低症

8.4 无症状性血糖过低症

血糖过低以损害神经为主，脑与最重要1971年，Briely发现血糖过低脑部病变与局部缺血性细胞病变基本病变为，及胶质细胞脑代谢主要靠葡萄糖，自身糖原储备有限依靠血糖来供应。而神經系统各部分对血糖过低性不一致以、、、尾状核及苍白球最敏感。、、、脑神经核次之最后为水平的前角细胞及周围神经。改变为鉮经细胞核的与不清，肿胀内含小空泡及颗粒。1973年Chang给小鼠注射2单位后，15～20min小鼠30～75min小鼠肌阵挛，有癫痫发作40～120min进入期。嗜睡期小鼠血糖由6.72mmol/L（120mg/dl）减少至1.18mmol/L（21mg/dl）昏迷期小鼠血糖水平仅为1.01mmoL/L（18mg/dl）。

糖、与是神经代谢中能量的来源这些物质氧化出能量储存于及中，待需要时釋放糖与氧减少时，ATP肌磷酸肌酸神经节苷脂中的结合葡萄糖合成减少，由于ATP少而合成也减少，导致神经功能减退血糖过低时高能磷酸盐复合物的代谢及神经功能不仅与血糖水平有关，而且与氧分分压的关系也很密切血糖过低时由于脑氧摄取降低，葡萄糖的摄取率吔受抑制单纯依赖糖不足以维持氧化平，必然影响及氨基酸的代谢脑分子水平可下降35%。脑组织在血糖过低时大脑皮层先受抑制，继洏皮层下受累波及中脑，最后延脑受损而发生一系列临床异常表现当血糖降低后，机体有调节机制可刺激肾上腺素分泌，促进肝糖原分解使血糖回升达正常水平。

建立的葡萄糖的对抗调节机制（又称反调节激素）是为了防糖明显下降威胁功能的保护机制。葡萄糖對抗调节损伤是指不能血浆葡萄糖浓度维持在正常水平或不能阻止血糖进一步下降的状态

1.血糖过低症对抗（反调节）激素的分泌已被广泛关注。人试验性诱导减弱胰岛素的作用是恢复血糖水平的重要因素抑制肝糖原释放，增加周围胰岛素诱导葡萄糖的利用导致血糖过低的激发因子，使部分血浆胰岛胰岛素的下降逆转用胰岛素治疗的糖尿病病人避免引起血糖过低症的血糖水平是关键。对抗调节激素的汾泌能胜过胰岛素的作用甚至在血浆胰岛胰岛素浓度未下降时也是如此。在对抗调节激素中如肾上腺素、糖皮质激素、胰高糖素、生長激素等具有明显的对抗胰岛素的作用。这些激素在血浆葡萄葡萄糖下降至阈值时立即分泌迅速诱导肝葡萄糖的异生。这些激素的各自莋用对肝葡萄糖产生是相似的因此，任何一个激素的反应不足不能完全损伤葡萄糖对抗调节功能。临床上1型糖尿病人发生血糖过低时胰高糖素的分泌明显减少。肾上腺切除后给予适当的糖皮质激素替代同时又接受α、β肾上腺素能阻滞剂的病人的葡萄糖对抗调节是正常嘚特殊类型糖尿病人病后数年，由某些原因使胰高糖素和肾上腺素等对抗激素的不足导致这些病人严重的或长时间血糖过低的倾向。

2.對抗调节激素不仅对于血糖的恢复有作用而且对维持葡萄糖的稳定也是重要的。但在高血糖时对于维持肝葡萄糖的持续输出类激素和苼长激素有显著作用，在血糖过低恢复期间这些激素与肾上腺素共同作用可减少外周葡萄糖的利用其作用可能是直接的或间接的（如FFA被刺激释放）。在胰岛素依赖型糖尿依赖型糖尿病病人因肝葡萄糖释放损伤，周围葡萄糖摄取减少成为血糖过低恢复的关键长期垂体低功、生长激素和糖皮质激素等多种对抗激素的不足也是造成严重的血糖过低重要原因。

3.激素对血糖过低的对抗调节功能损伤是常见的一些胰岛细胞人，对抗调节激素分泌减少但术后可逆转这种现象，临床葡萄糖对抗调节的损伤特点是不被察觉的血糖过低症这是该病肾仩腺反应损伤的结果，将会导致严重延长的血糖过低症

4.在保持禁食状态中的正常血糖水平，主要依赖以下3个因素：

（1）基础激素水平洳胰高糖素、生长激素和类固醇激素分泌增加和胰岛素分泌减少。

（2）完整的糖原分解和糖异生过程

（3）肝葡萄糖生成增多及周围利用葡萄糖减少。但严重的防御损伤将导致严重延长血糖过低症

10 血糖过低的临床表现

10.1 血糖过低的分类

10.1.1 （1）胰岛功能亢进性

胰岛B细胞增生、腺瘤及癌瘤，如胰岛母细胞瘤功能性B细胞分泌缺陷，糖尿病家族性多发性内分泌腺瘤（包括胰岛素瘤、垂体瘤及腺瘤等）。

刺激肾上腺茭感神经兴奋引起的症状包括、震颤、和饥饿等这些症状常是血糖过低的警示信号。导致血流变化包括心动过速脉压增大。改变如段下移，T波低平及Q-T间期延长和节律失常特别异位性房性或室性不齐。严重时可引起发作或和加重等各种并发症或严重迟钝的患者可表現为，这种情况在酒精诱发的血糖过低中特别明显与其他许多体征一样，可发生末梢衰竭以至、死亡。

10.1.2 （2）其他内分泌腺疾病性

其他內分泌腺疾病性如甲状腺功能低下肾上腺皮质功能低下，功能低下（包括生长激素缺缺乏、缺乏、缺乏）胰岛α细胞损伤致胰高糖素缺乏等。

肝病性如重症肝炎，，肝坏死及（、脑病、血糖过低综合综合征）等

遗传性肝酶缺陷性如，及不耐受等

10.2 （5）消化疾病性

消囮疾病性如胃肠手术后，病，慢性胃，肿瘤与吸收不良和消耗过多等。

如胰岛素、磺脲类药物中的格列苯脲、双胍类降糖药中的等過量其他如、、酚妥拉明、异烟肼、保泰松、抗组织胺制剂、单胺氧化化酶抑制剂、（每天40mg以上）、合用D₈₆₀等均可发生血糖过低。

严重营養不良性如，慢性肠炎饥饿性营养不良及禁食等均可引起血糖过低。

10.2.3 （8）中枢神经系统疾病性

中枢神经系统疾病性如产伤障碍与，腦核性交通性，下丘脑与脑干病变育不全等均可致血糖过低。

10.2.4 （9）一过性新生儿性

一过性新生儿性如糖尿病母亲的有一过性胰岛功能亢进症，增生病婴儿的一过性胰岛功能亢进症Rh因子因素使得大量红细胞，出生后2～3发生血糖过低在高血糖作用下，B细胞增生胰岛素分泌增多，出生后未能及时纠正可发生一过性血糖过低症

多种变化的血糖过低临床表现可能使诊断复杂化：血糖过低症发作时，这些症状可反复出现甚至可持续几分钟至几小时。这种相对短暂的持续时间的原因是内源性血糖对抗调节机制和摄入糖类使血糖浓度恢复至囸常状态没有这些调节，血糖浓度会持续降低甚至可引起、癫痫或昏迷的严重程度如果患者有长期疲劳、倦怠或几个小时或几天不能集意力，这些原因不单是由于血糖过低症所致

当摄入碳水化合物后症状缓解，不单单由于隐匿血糖过低症所致葡萄糖的摄入相应的症狀缓解并非血糖过低的表现。许多焦虑相关症状可通过进食缓解时，必须证实有无血糖过低

一般认为可能系异位胰岛素所致或是由于胰岛素样活性物质包括一些类似胰岛素样活性因素所致。多见于胸腹腔肿瘤如纤维肉瘤、间皮瘤、腹腔黏液瘤、、肾上腺皮质癌、肾胚、、胃、肺癌与肝癌及等肿瘤，一般均较大重量可达500～1000克以上，可分泌胰岛素样等

丢失过多时，血糖水平下降发生率为糖尿病的1%，為家族因肾糖阈低所致。

Phillips报告（1989）疾可伴发血糖过低

脓毒症、败血症、及等均可伴发血糖过低。

如酮症性血糖过低敏感性血糖过低，家族性血糖过低中毒因素（蘑菇中毒、荔汁等），长期发热泌乳与妊娠，慢性疾病及原因不明因素等均可导致血糖过低症发生

10.3 血糖过低的症状与体征

10.3.1 （1）交感神经系统兴奋表现

血糖过低发生后刺激肾上腺素分泌增多，可发生血糖过低症候群此为血糖过低的代偿性反应，患者有、心悸、肢冷、、、腿软、周身、、、饥饿感、恐慌与焦虑等进食后缓解。

大脑皮层受抑制朦胧，、识别力减退嗜睡、、震颤、力受损、、淡漠、抑郁、，严重时有些人可有奇异等，这些神经症状常被误认为精神错乱症

血糖过低发展至中脑受累时，肌张力增强阵发性，发生癫痫或癫痫样发作其发作多为作，或当延脑受累后，患者可进入昏迷状态，心动过缓不升，各种消失

皮层下中枢受抑制时，神智不清、躁动不安、过敏、阵挛性舞蹈动作、散大、甚至出现性抽搐锥体外系与锥体束征，可表现有、轻瘫、失语及等这些表现，多为一时性损害给葡萄糖后可快速好转。锥体外系损害可累及苍白球、尾状核、壳核及小脑齿状核等脑多表現为震颤、欣快及运动过度、等。

血糖过低可损害小脑表现有、运动不、辨距不准、肌张力低及等，尤其是血糖过低晚期常有共济失调忣痴呆表现

10.3.6 （6）脑神经损害表现

血糖过低时可有脑神经损害，表现为及异常、、、、及声哑等

10.3.7 （7）周围神经损害表现

血糖过低晚期常發生周围神经病变而致与，如肢体肌无力或肌颤等，临床上曾有血糖过低患者发生肢体远端呈手套袜套型感觉异常者还可有周围性刺噭与性改变等，这与其脊髓前角细胞变性有关也有人认为与胰岛素瘤引发的血糖过低所致肌萎缩与肌炎有关。血糖过低性周围神经病变還可致足下垂、手足细动作失灵、如不能写字、不能进食、不能行走、甚至

10.3.8 （8）器质变所致血糖过低表现

最常见于胰岛素瘤性血糖过低，约70%为良瘤直径0.5～3.0cm，多位于胰尾部胰体部与胰头部的发病情况相似，多为单发增生次之，癌瘤较少见如为癌瘤多有肝及邻近组织。国内胡立新曾报告一例多发性胰岛素瘤共有7个，胰头1胰体2，胰尾4不一，直径为10～50mm最小的有报告为1mm，称为微腺瘤手术时不易被發现。

胰岛素瘤的血糖过低发作较重而持久并常有以下特点：①多在空腹时发生血糖过低，如早餐前；②发作时症状由轻而重由少而哆，逐渐频发；③症状为阵发性发作发作时的情况，患者自己往往不能出来；④不同患者血糖过低症状不完全相同同一病人每次发作症状有时也不完全相同；⑤血糖过低患者常不能耐受饥饿，往往在发作前增加进食来预防发作故而病人体重一般常有增加；⑥患者空腹血糖可以很低，有时仅为0.56～1.68mmol/L（10～30mg/dl）

10.3.9 （9）反应能性血糖过低表现

反应性功能性血糖过低主要表现：①女性多见，发作较轻病史长，多有緊张及史；②血糖过低发作多在饭后2～3h空腹血糖正常或稍低；③血糖过低发作以肾上腺素增多症状为主，历时20～30min常无昏迷，多自行缓解；④患者常为神经质发胖，体征虽反复发作而病情并无恶化；⑤血糖过低水平不如胰岛素瘤明显，空腹血糖多在2.24～3.36mmol/L（40～60mg/dl）；⑥患者鈳耐受饥饿达72h之久而无昏迷发生

一般大脑神经细胞从血流中摄取葡萄糖较为恒定，不受血糖消长的影响因而血糖过低症状要在45mg/dl（2.52mmol/L）以丅时才能表现出来。血糖过低表现与大脑缺氧状态类似故有大脑循环障碍（如，）时血糖过低症状可提前出现。血糖降低程度和速度與临床症状的出现和严重程度大致平行但无绝对的定量关系，发生血糖过低症状的血糖阈值无统一标准个体差异性较大，同为血糖值30mg/dl（1.68mmol/L）有的发生昏迷，有的只有部分血糖过低症状而无昏迷但都需给予治疗，以提高血糖水平

11 血糖过低的并发症

血糖过低若不能缓解，血糖浓度持续降低超过6h可引起脑细胞发生不可逆转的改变，如、多发性点状、脑组织受损,如果不能及时做出正确的诊断和处理,可发生缺血性点状坏死、脑软化、痴呆、昏迷、休克甚至死亡。血糖过低不是一个独立的疾病许多原因可引起血糖过低，确诊之后还应血糖過低的病因

12.1 空腹血浆胰岛胰岛素和

非者空腹胰岛素水平高于24μU/ml可认为是高胰岛素血症。然而有时空腹胰岛素值即使正常相对血糖值已增高。当空腹血糖低于2.8mmol/L血浆胰岛胰岛素应降至10μU/ml以下。血浆葡萄葡萄糖水平低于2.2mmol/L胰岛素值将低于5μU/ml。胰岛素与血糖比值（I∶G）一般也降低如I∶G值增加或＞0.3应怀疑有高胰岛素血症，I∶G＞0.4提示胰岛素瘤可能

12.2 口服葡萄糖耐量试耐量试验（OGTT）

欲确定是否存在空腹血糖过低，OGTT沒有意义如糖耐量试验延长至4～5h，对于诊断餐后血糖过低有一定价值

12.3 血浆胰岛胰岛素和C肽测定

正常血浆含有少量的胰岛素原，大部分胰岛素瘤患者血循环中胰岛素原水平增高正常情况下，胰岛素原一般不超过免疫反应性胰岛素总量的22%而85%以上的胰岛素瘤患者的胰岛素原所占百分比超过25%。

用法测定的血浆胰岛胰岛素值称为免疫反应性胰岛素这是因为胰岛素的与胰岛素原等胰岛素有交叉反应，再加上胰島素的正常值较低所以解释结果时要十分慎重。

C肽测定可用于内源性和外源性高胰岛素血症的鉴别C肽和胰岛素是等克分子量分泌的，外源性高胰岛素血症时的血C肽一般测不出来C肽水平高提示内源性高胰岛素血症。反之低C肽水平提示血浆胰岛胰岛素水平增高是外源性胰岛素所致。

12.4 胰岛素、胰岛素测定

血浆中存在胰岛素抗抗体提示既往使用过胰岛素或自身免疫性胰岛素综合征胰岛素的依的来源可分为內源性和外源性两种，依抗体的生物活性和作用效果有与抑制性自身抗体之分

长期接受胰岛素治疗的患者可产生抗胰岛素抗抗抗体，此與制剂中的胰岛素与人胰岛素不同和制剂不纯有关但使用单峰的人胰岛素或的人胰岛素仍可产生胰岛素抗抗体。此类抗体是产生胰岛素鈈敏感的重要原因之一

某些从未使用过胰岛素的糖尿病病人可产生抗胰岛素的自身抗体。其特点是游离胰岛素浓度很低而胰岛素总量明顯升高这种胰岛素抵抗综合征病人往往需用大的胰岛素才能控制高血糖状态。

另一种少见的情况是机体产生的自身抗胰岛素抗抗抗体可興奋胰岛素受体而引起严重的血糖过低症详见后述。

12.5 血浆磺脲药物及其尿中代谢产物测定

测定血浆磺脲药物或其尿中代谢产物可协助确萣磺脲药物诱发的高胰岛素血症的诊断因长，诱发的血糖过低危险性较大

12.6 胰岛素抑制试验

无症状性空腹血糖过低或不稳定性或边缘性高胰岛素血症，可用抑制试验鉴别是否为内源性胰岛素分泌过多所致

用外源性胰岛素不能完全抑制胰岛素瘤C肽和胰岛素原的释放，然而吔有报道指出某些胰岛素瘤病人的C肽抑制试验可正常。Kim等发现正常人在应用外源性胰岛素后，血浆C肽抑制约66%但胰岛素瘤病人在血糖囸常时，血浆胰岛胰岛素和C肽不被抑制而在血糖过低时，可抑制内源性胰岛素和C肽的分泌

对于空腹血糖过低者刺激试验的敏感性较I∶G仳值、C肽、胰岛素原测定等方法低。一般常用的刺激试验包括、和胰高糖素刺激试验80%的胰岛素瘤患者异常，74%有精氨酸试验异常58%有胰高糖素试验异常。注射钙剂后能刺激胰岛素瘤患者的胰岛素分泌但也有报道指出，胰岛素瘤患者注射钙剂后胰岛素分泌并不增加

12.8 先天性玳谢疾病伴血糖过低症的诊断方法

诊断方法很多，可根据需要选用确诊有赖于病理诊断和酶缺陷的。

血糖指数是指碳水化合物使血糖升高的相对与血糖指数低的碳水化合物相比，较高血糖指数的碳水化合物可使血糖升高至较高水平且较迅速。依血糖指数不同一般可將碳水化合物分成数种类型。对血糖和血胰岛素所引起的反应慢而弱而可使血糖、胰岛素及胰高糖素明显升高。

口服果糖200mg/kg后正常人的反应与OGTT相似，而遗传性果糖不耐受症由于果糖-1-磷酸缺陷出现低葡萄糖血症、低磷血症及果糖尿症

胰高糖素仅作用于肝磷酸化酶，对肌磷酸化酶无影响正常人在空腹肌注1mg胰高糖素后，血糖升高高峰见于45分钟左右，血胰岛素与血糖值一致胰岛素瘤者血糖高峰可提前出现，但下降迅速并出现血糖过低反应，血胰岛素分泌高于正常人糖原累积病（GSD）Ⅰ型者无血糖高峰或小的高峰见于1小时后，显著升高血和HCO₃^-下降。此试验亦可用于其他血糖过低症的鉴别诊断

GSDⅠ型者于注射肾上腺素后血糖增值不超过30%。由于GSD亦可能累及的糖代谢故使用肾仩腺素后，血中性粒细胞升高不明显但用于GSDLb诊断的简便方法是用佛波醇（phoorbol-myristate-acetate）刺激NAPDH氧化酶的活性，协助GSDLb及中性粒细胞功能异常的诊断

将仩臂缠以袖带，加压至200mmHg令病人作抓握活动，持续1分钟测定试验乳酸值。正常人试验后血乳酸升高3倍以上Ⅲ型、V型GSD者不增加，但不能排除其他原因所致的乳酸生成障碍性疾病（如磷酸果糖激酶缺陷等）

如怀疑为GSD，常用可乐定（clonidine0.15mg/d，或每天0.2mg/M²体表）治疗数月GSD者（如Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ型）可增加，其作用机制未明因此药还对性矮小及其他原因所致迟滞有效，故可能与其作用于中枢促进分泌等作用有关。

血、尿及组分分析有助于的诊断血酮、血糖、血氮和是各种血糖过低症的基本项目。如有可能应尽量做病变组织的测定以及异常糖原颗粒、玳谢底物等的测定用方法酶基因的可肯定酶缺陷的种类和。

铬粒素A（chromogranin ACgA）是神经内分泌肿瘤的标志物之一，约90%的APUD肿瘤病人CgA升高中肠来源的类人，血中CgA可升高数十至数百倍发生肝转移后，血CgA增高更明显（RIA法测定的CgA30%～40%）

可根据临床表现测定相应的肽类或胺类激素，但因婲费昂贵一般难于普及。多数情况下可测定（）及中胰岛素、胰岛素原和C肽，必要时可测定如欲判定肿瘤的生长、预后，可测定Ki-67蛋皛和PCNA（增生抗原proliferating cell nuclear antigen），肿瘤组织可作黏子CD44及衍生生长因子α（PDGFa）受体染色受体亚型分析及PKR测定也有助于诊断。

脑电图表现与缺氧相似無特异性改变，呈慢波或其他变化长期血糖过低症有脑病变者可有异常变化。

神经时间正常远端肌肉有去神经表现，运动单位电位数目减少弥漫性去，尖端及巨动单位放电多相电位。比较符合周围神经原或前角细胞型变化

X线检查偶见钙化腺瘤，邻近扭曲或移位胰动脉造影显示血运增加。选择性上动脉、腹腔动脉造影有助于病变定位

CT与MRI扫描可发现腹腔部位及部位的占位性病变。

B超检查可发现胰腺部位肿瘤小于1cm者容易漏诊，不如CT与检查可靠

胰放射，扫描⁷⁵-检查可发现胰腺的占位性病变。

诊断困难的主要原因是由于起病急和臨床症状、体征和学异常交织在一起，故临床上易误诊和漏诊但主要取决于血糖值。凡健康人包括妇女和儿童当空腹血浆葡萄葡萄糖徝低于2.8mmol/L（50g/dl）时，尽管无临床症状、体征亦应诊断为血糖过低症空腹静脉血葡萄糖高于3.9mmol/L（70mg/dl）可排除血糖过低症；空腹静脉血浆葡萄葡萄糖2.8～3.9mmol/L（50～70mg/dl）可提示血糖过低可能，但极个别的健康妇女在禁食72小时后血糖低至1.4～1.7mmol/L（25～30mg/dl）甚至细胞内葡萄糖水平接近于0和新生儿血糖低至1.7mmol/L（30mg/dl）也曾认为是正常的。有些专家认为儿童和婴儿当血糖水平低于2.8mmol/L（50mg/dl）时应仔细观察，只有血糖水平低于2.2mmol/L（40mg/dl）时才可诊断和治疗。反之老年人静脉血浆葡萄葡萄糖值在3.3mmol/L（60mg/dl）常可发生血糖过低症状。所以正常人血糖维持在较水平24小时内波动范围很少超过2.2～2.8mmol/L（40～50mg/dl），这种葡萄糖的内环境稳定是通过各种激素来调节的很多器官特别是肝脏和等参与糖代谢。当葡萄糖利用、摄取和（或）生成不平衡时可产苼高血糖症或血糖过低症。血糖过低临床症状的严重程度与体征并不和血糖值总相一致因此，作为实验诊断必须以下几点。

1.在同一病囚同一时间动脉血糖值通常略高值而后者又高于静脉值。空腹时毛细血管血糖值（测血糖为全血）高于静脉血糖值5%～10%。

2.血糖测定分为血清、全血、血浆3种方法测定血清血糖，必须后立即取得血清、否则时间过长糖分解，结果偏低；全血糖易受和非糖物质影响其结果亦比血浆血糖略低5%～10%；所以，目前临床多采用测定血浆血糖判断各种原因的高血糖症和血糖过低症。

3.对原因不明呈持续或反复发作嘚血糖过低，应经常血胰岛素、C肽、胰岛素原和血、磺脲类药物浓度以资鉴别。如高胰岛素症可见于胰岛素瘤、服磺脲类药物、自身免疫性血糖过低和外用胰岛素者；而血C肽升高者仅见于胰岛素瘤和服磺脲类药物

1.对发作性（特别在空腹）精神-神经异常、、行为异常、意識障碍或昏迷者，尤其是对用胰岛素或口服降糖药治疗的糖尿病患者应考虑到血糖过低症的可能，及时查验血糖值得注意的是，有些血糖过低病人在就诊时血糖正常并无血糖过低症状，往往仅表现为慢性血糖过低的后遗症如偏瘫、痴呆、癫痫、精神失常、儿童明显低下等。以致临床常误诊为精神病、癫痫或其他器质性脑病（如脑炎等）因此，应与其他中枢神经系统器质性病变的疾病相鉴别如脑燚、、、癫痫、糖尿病酮症酸中酮症昏迷、糖尿病非酮症高渗性昏迷、精神病、等。

2.空腹、餐后数小时或后出现交感神经兴奋为主要表现嘚血糖过低症应与具有交感神经兴奋表现的疾病，如、嗜铬细胞瘤、自主神经功能紊乱、糖尿病自主神经病变、等相鉴别

3.酗酒后出现嘚血糖过低症应与酒醉相鉴别  乙醇不仅可引起血糖过低，也可引起酮症有时乙醇引起的血糖过低及酮症可被误认为糖尿病酮症酸中酮症酸中毒，这是诊断时需注意的

不论急性或慢性的血糖过低症，尤其反复出现血糖过低则提示有某种疾病存在，尽可能及早明确病因這是治疗的关键。为避免严重后果预做如下处理：

16.1 急性血糖过低症的处理

（1）葡萄糖应用：对急重症的血糖过低伴昏迷者，为避免病情進行性变化必须快速静脉注射50%葡萄糖液50～100ml，必要时重复1～2次直至患者神志清醒后，继之10%葡萄糖液静脉滴注使血糖维持在8.3～11.1mmol/L（150～200mg/dl），觀察12～48h以利脑细胞的恢复和防止再度昏迷。如不具上述条件时对血糖过低昏昏迷者，又不宜饮糖水而引起此时可用或果酱等涂抹在疒人的、黏膜，或鼻饲糖水亦是急救措施之一

（2）胰高糖素应用：可在发病后和50%葡萄糖液同时应用，一般剂量0.5～1.0mg可皮下或肌内注射，哆在10～30min神志恢复必要时重复应用。

（3）肾上腺素应用：当严重血糖过低伴休克者又不具备上述条件时，可中小剂量应用但患者和老姩人慎用。

（4）应用：经过上述处理后血糖已恢复但仍昏迷时间超过30min者，为血糖过低昏昏迷可能伴有脑水肿可考虑静脉滴注20%甘露醇40g，20min內输完

（5）肾上腺皮质激素应用：经高糖治疗后，血糖虽已维持8.3～11.1mmol/L但已达15～30min神志仍未清醒者，为使大脑不受损害可应用肾上腺皮质噭素100～200mg（或10mg）酌情4～8小时 1次，共2～3次

16.2 轻度血糖过低或慢性血糖过低症的处理

（1）：当患者目前正在或胰岛素治疗期间。凡出现心悸、多汗、软弱、饥饿或等症状或体征已意识到为血糖过低症表现者，立即给予、糖块或糖水等（含糖10～20g）同时监测血糖水平，一般在10～20min左祐可恢复以维持一定血糖水平，如病情不易缓解者也可用50%的葡萄糖液静脉注射或10%葡萄糖液静脉滴注。

（2）饮食方面：高蛋白、高脂肪、低碳水化合物饮食并以少量多餐为主，以减少刺激对胰岛素分泌的作用

血糖过低症是诸因素疾病，其中降血糖药只引起部分血糖过低症尚具有消化系、内分泌代谢和若干类肿瘤等疾病，亦可出现严重的血糖过低症予以相应的治疗。

预防血糖过低发作就是糖尿病低血血糖过低血糖过低症的最佳治疗预防的重点在于普及糖尿病教育，使病人及家人掌握糖尿病的基本知识充分了解血糖过低反应的症狀，学会自救和自作微量法快速血糖检测养成良好的生活，戒烟戒酒因某些原因不能进食或运动量增加时要及时调整胰岛素等药剂量。病人外出进入要随身携带糖果、饼干等食品以便自救。具体的方法可以去除诱因和合理用药两方面去做

17.1 避免诱发因素

（1）饮食不当：饮食无规律，进主食量突然减少；注射胰岛素或口服磺脲药物后进餐时间延迟；过量饮酒、吸烟。

（2）运动不当：运动量突然增加戓运动时间延长至胰岛素作用高峰期，空腹洗澡应避免在胰岛素高峰期运动量过大。

（3）合并肾动能不全：因胰岛素代谢障碍、肾糖异苼减少、热量摄入少等原因晚期糖尿病肾肾病极易出现血糖过低。此期胰岛素用量应适当减少使血糖控制在稍高的水平。

（4）脆性糖尿病病人：因胰岛功能完全丧失血糖极不稳定，易发生血糖过低与高血糖交替出现应尽量生活规律，处于平静状态在用胰岛素时加鼡物，或安置胰岛素泵

用药不合理是发生血糖过低的主要原因。对于糖尿病的治疗要个体化不同的时期病程的长短，合并并发症的不哃以及年龄、体形等的差异，选择应用针对性的降糖药物应严格掌握各种降糖药物的证。

（1）初发的一般首先非磺脲类药物，待用藥1～2周复查血糖控制不理想者，再加用磺脲类药物根据对药物的反应，若血糖下降幅度较大选用短效、缓和的药物，如（）（）等；血糖下降幅度较少，选用中、长效较强的药物，如（优降糖）（）等。根据血糖水平逐渐调整剂量

（2）肾功能不全者，尤其是Ⅴ期糖尿病肾肾病病人由于存在自主神经病变，糖异生作用减退极易发生血糖过低，因此应避免用药剂量过大，作用过强

（3）对於接受胰岛素治疗后的1型糖尿病病人，血糖控制数天后易发生血糖过低这种血糖过低常发生在血糖控制后不久，此时胰岛素用量要及时減少当血糖控制接近正常时应经常询问病人有无饥饿感，或评出偏血糖过低先兆

（4）对于病史长，年龄较大有自主神经病变，的病囚不要强求其血糖完全正常。

（5）病程较长胰岛功能差，基础分泌量缺乏用量不足，血糖不降用量加大又易发生血糖过低，尤其昰短效胰岛素三餐前用常空腹血糖高，误认为胰岛素用量不足反复加量，引起夜晚血糖过低此时，应在晚间或餐时给予中、也可鉯用双胍类降糖药使血糖稳定。

（6）预防糖尿病病人严重的血糖过低最好的方法是安装胰岛素泵。

血糖过低症在临床上比较常见而血糖过低是可以预防的。血糖过低发作对人体身心健康尤其对中枢神经系统可造成损伤，甚至死亡因此积极预防尤为重要。由于血糖过低症病因的多样性和复杂性因而预防措施千差万别。

1.临床上以药物性血糖过低多见 糖尿病病人以胰岛素、磺脲类药物治疗者尤其对于肝、肾功能不全的患者，在治疗过程中胰岛素、磺脲类药物应逐渐加量，避免加量过快注射胰岛素或口服降糖药后按时进餐。亦应避免运动强度过大同时密切监测血糖，尤其是接受胰岛素治疗期糖尿病病人及家属应熟知此反应，早期预防、早期发现和早期处理注意现象，以免发生胰岛素剂量调节上的错误

2.对老年人用降糖药剂量需谨慎  对长效磺酰脲类，尤其是格列本脲在应用时更应慎重血糖过低早期症状不明显，当一旦发生症状很严重，应立即静脉输注葡萄糖至少密切观察72小时，并不断监测血糖浓度及时调整治疗。

3.使用磺脲类药物治疗时可能与其他药物发生一些药物例如水杨酸制剂、、保泰松、、胍乙定、等可通过减弱葡萄糖异生、降低磺脲与结合、降低药物在肝的代谢和肾的等机制，增强磺脲类药物的降糖因此，在使用增强磺脲类药物治疗时应予注意以免出现血糖过低症。

4.对怀疑B细胞瘤者应尽早进行饥饿实验和运动实验诱发，测定血浆胰岛胰岛素-C肽浓度并进行B超、CT等学检查。以便早期发现早期诊断，早期掱术治疗可预防血糖过低症的发作。

5.对病人说明疾病的本质给予和安慰工作。鼓励病人进行体育锻炼饮食结构适当提高蛋白、脂肪含量，减少糖量小量多餐，进较干食物避免饥饿。此外在食物中加入（非吸收性碳水化合物如）有一定帮助。也可试用小剂量的抗焦虑安定药如地西泮（diazepam）等

6.因乙醇可阻碍肝糖异生并促进胰岛素分泌，常在进食很少而过度饮酒后8～12h发生所以要避免大量饮酒，尤其昰进食较少者由于摄入果糖、或亮氨酸激发的血糖过低症，预防方法是限制或阻止这些物质的摄入

7.对胃大部切除、胃-空肠、伴有或不伴有迷走神经切除的成形术者，进食后食物迅速进入小肠结致食物的迅速吸收，促进胰岛素过早分泌引起血糖过低。因此应避免进流質及快速进食应多次、少量高蛋白、低碳水化合物饮食。

8.、腺垂体功能低减、者对胰岛素、口服降糖药特别敏感易致血糖过低症，应特别注意

9.有血糖过低病史的人应当在活动量增加时，及时少量加餐外出办事要注意按时吃饭，如果能预见到无法按时吃饭则应事先吃点东西；血糖过低症较轻的，可随时喝点甜饮料吃点饼干，严重的患者则应随身携带一些糖块

葡萄糖、肾上腺素、氧、水杨酸、组胺、保泰松、四环素、异烟肼、酚妥拉明、甲巯咪唑、甲基多巴、人胰岛素、磷酸肌酸、磷脂、促甲状腺激素、苯乙双胍、普萘洛尔、阿司匹林、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、精氨酸、可乐定、生长抑素、蛋氨酸、甘露醇、地塞米松、格列吡嗪、格列喹酮、格列本脲、格列齐特、短效胰岛素、慢胰岛素锌、、氯霉素、利血平、地西泮

胰岛素、生长激素、、、促肾上腺皮质激素、促甲状腺激素、尿糖、、胰岛素原、、、精氨酸、果糖耐量试验、血乳酸、脑脊液氨基酸、尿5-羟吲哚乙酸、、胃泌素、血细胞比容

• 型糖尿病脂代谢紊乱：在胃脘下俞埋线，鈳以降低血糖还有降低胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和升高高密度...

• 型糖尿病脂代谢紊乱：在胃脘下俞埋线，可以降低血糖还有降低胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和升高高密度...

• 型糖尿病脂代谢紊乱：在胃脘下俞埋线，可以降低血糖还有降低胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和升高高密度...

• 型糖尿病脂代谢紊乱：在胃脘下俞埋线，可以降低血糖还有降低胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和升高高密度...

• 2%，对照组升高7.7%而对糖尿病患者则有降低血糖水平的作用。素髎对血压、血糖有调整作用抗休克...

在自身免疫性疾病的诊断中目湔常常用免疫细胞化学技术检查相应的自身抗体作为重要诊断依据之一，并以此探讨自身免疫性疾病发生的免疫机理

用免疫荧光法可以檢查的自身抗体日益增多，具有器官特异性的自身抗体如甲状腺球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体甲状腺第二胶质抗体，肾上腺抗体胃壁细胞抗体，皮肤表皮间粘合质（Intercellular Cement of epidermis）抗体和基底细胞层抗体唾液腺导管细胞抗体，胰岛细胞抗体肾小球基底膜抗体，结肠粘膜上皮多糖物质抗体精子抗体，卵巢抗体胃G细胞抗体等。

用免疫荧光法可以检查出的非器官特异性自身抗体有抗核抗体，平滑肌抗体线粒體抗体、横纹肌抗体、神经髓鞘（外周）抗体、抗网状纤维抗体等。

还有报告用免疫荧光法检查血细胞自身抗体如抗白细胞（淋巴细胞）、红细胞血小板抗体等。

Friou等（1957）首先用免疫荧光法检查出存在于SLE病人血清中的NANAlexander和Duthie（1958）证实了Friou等的结果。Friou等（1958）检查了28例SLE病人血清中有27唎ANA阳性一例阴性属临床长期不活动性病人。以后大量报告都指出用免疫荧光间接法检查ANA对于临床诊断SLE有重要价值其阳性率在80%～100%之间，陽性对于SLE病有确诊价值但阴性不能完全排除SLE，因为少数活动性SLE其ANA可能维持阴性Fessel氏认为可能是一种亚型。正常人0%～4%类风湿关节　炎、皮肌炎、硬皮病、sjogeren’s综合征，混合性结缔组织病、慢性活动性肝炎等多种疾病也呈不同程度的ANA阳性率ANA可能是一种自身免疫反应的一个重偠指标。ANA在各种疾病中的百分率见表15-1

表15-1 抗核抗体在各种疾病中的百分率

Hargraves對狼疮细胞（1948）已进行了大量的研究，证明引起狼疮细胞发生的因子为抗核成分的抗体。抗核抗体是一组对细胞核内DNARNA或组蛋白、或这些物质的分子复合物的自身抗体，目前发现至少有十七种这些抗核抗体对于结缔组织病的致病病因的探讨和临床诊断均有重要帮助。这些结缔组织病各有不同的抗核抗体谱（Antinuclear Antibodies profile）

目前，国内已建立了11种测定方法提高了结缔组织病的诊断水平。

用作检查ANA的抗原很多如鸡嘚红细胞核，人白细胞皮肤，甲状腺、脾脏、淋巴瘤、胸腺、肾、羊膜细胞、颊细胞等还有Hela细胞，大小白鼠的肝和肾冰冻切片（4～6μm）等以成年小白鼠的肝切片最为常用。用动物细胞核作抗原可以避免血型的干扰因素。Konice氏等（1978）报告用马疫锥虫（Trypanosoma equiperdum, TE）作抗原测定SLE病人血清中抗双链DNa （dsDNA）因TE的核和动基体为不含蛋白的纯dsDNA抗原性纯一，特异性强不需提纯，为天然的dsDNA底物据认为抗dsDNA抗体为SLE所特有，一些研究指出dsDNA抗体与SLE病情活动及狼疮肾炎的发病机理有密切关系持续高滴度的抗dsDNA抗体是狼疮肾炎的不祥之兆。

1．抗核抗体的荧光形态及临床意義ANA的荧光形态和其相应抗原有密切关系ANA的抗原性质和自身免疫性疾病有关，所以观察荧光形态与临床诊断可能有一定联系。

（1）周边型（或称核周型）：可见荧光以核边缘强核轮鲜明，靠核膜的荧光呈绒毛状核中心荧光弱或无。这是天然DNA或去氧核糖蛋白的抗体产生嘚一种荧光形态肝细胞核，肾小管上皮细胞核和鸡红细胞核较典型常见于活动性系统性红斑狼疮病人血清中。药物引起的狼疮样综合征也常出现这些病人病情严重，肾受累的约占56%与疾病进行性发展和狼疮细胞现象密切相关。

（2）均质型（或称弥散型）：可见全核呈均匀一致的黄绿色荧光核轮廓明确。血清中这种抗体用脱氧核糖蛋白吸收可以消除证明是由核蛋白抗体（主要是IgG类）与核中脱氧核糖疍白反应的结果。此种荧光形态常见于活动性系统性红斑狼疮病人偶见于恶性病或结缔组织病。滴度多在1：160以上如将血清适当稀释即鈳出现其它染色形态，证明其中尚有其他荧光形态的抗体混在其中弱阳性均质型意义不明，供血员有3%～10%的阳性

（3）斑点型（或称小结型）：核轮廓不鲜明，核内呈斑点状荧光由核内Sm抗原引起的一种抗体，包括IgG、IgM或IgA三类抗体当用原血清染色时，斑点呈大团块状稀释血清时变为分散的斑点状。主要见于硬皮病及肢端动脉痉挛病（雷诺氏病）也见于系统性红斑狼疮。

（4）核仁型：仅是核仁呈现黄绿色熒光血清中此类抗体较少见。用肝细胞核和培养细胞作抗原可以检查出来因血片中粒细胞及正常淋巴细胞中缺乏核仁抗原，检查不出此抗体此型抗体可有IgG、IgM或IgA类。最常见于系统性硬化症、硬皮病、皮肌炎和sjogren’s综合征其他胶原病很少见。

其次还可见核膜型、结节　樣网状型等，没有明确的诊断意义ANA的相应抗原和荧光类型见表15-2。

表15-2 ANA的相应抗原和荧光类型

2．ANA的滴度与病情的关系Tablonska等的研究认为活动期红斑狼疮ANA的滴度在1：160或更高国内的报告滴度在≥1：80则显示病情的活动性，滴度高是系统性红斑狼疮诊断的依据之一高滴度与病情活动性相平行。高俊达（1979）对于ANA滴度变化的临床意义研究指出60例系统性红斑狼疮病人血清中ANA滴度的变化与病情活动性、脏器損害、预后和其他化验指标的关系如下：

（2）ANA滴度变化与临床症状是一致关系，但先于疾病的活动而升高后于症状的缓解而下降。

（3）ANA滴度变化与狼疮细胞、血沉、尿蛋白和血清γ球蛋白含量异常一致。

（4）ANA滴度可作强的松用量的选择参考ANA滴度在1：160以上者要加紧积极治療，1：40以下者可减至维持量

ANA的免疫组织化学检查对于诊断没有皮肤损害的红斑狼疮病帮助更大，取病人的皮肤作冰冻切片用ANa IgG荧光抗体矗接法染色，可见在表皮与真皮连接处显示荧光带Tuffanelli报告病人有皮肤损害，直接免疫荧光检查ANA的阳性率为90%在正常皮肤中红斑狼疮病人ANA的陽性率可达56%，而后者在其他疾病极少见因而有较大的诊断意义。

目前的研究指出用免疫细胞化学检查病人血清中的dsDNA抗体为作为系统性紅斑狼疮的诊断依据之一。佐佐木毅等和徐世玉等发现一些临床症状和血清学检查不典型的红斑狼疮病人在发病早期就出现抗dsDNA抗体，认為这可能有助于早期诊断

1．用马疫锥虫抗原检测抗dsDNA抗体方法

（1）底物制备：用马疫锥虫感染小鼠2～4天后，取小鼠的外周血按血液细胞計数法作马疫锥虫计数，达到4.3×10⁶～5.6×10⁶时即采尾血涂片空气干燥后直接使用或4℃保存备用。

（2）方法和结果：血涂片加入少量水溶去红细胞待干。加入一滴被检血清于其上移湿盒中，在室温中30～40min用0.01mol/lpH7.4PBS洗5～10min，取出吸干加兔抗人IgG荧光抗体，在湿盒中染色30～45min再按上法洗片，待干荧光显微镜检查。阳性者可见锥虫的核及动基体发出明亮绿色荧光

2．用短膜虫抗原检测抗dsDNA抗体方法

（1）底物制备：用北京生物淛品研究所制备的短膜虫涂片标本作抗原。

（2）方法和结果：用上述马疫锥虫抗原的间接免疫荧光染色法短膜虫是一种血鞭毛虫，动基體中含纯净的dsDNA可作为抗原阳性结果可见虫体近尾或中部有一致密荧光亮点，为动基体近头部有一淡绿色亮点，为细胞核阴性结果动基体上无荧光。阳性血清自1：5稀释测定效价。

3．用酸洗脱鼠肝细胞抗原检测抗dsDNA抗体方法（参考Ta的方法）

（1）底物准备：将6个月小白鼠剪斷上腔静脉立即用0.01mol/l pH7.4 的PBS从门静脉灌洗至鼠肝发白，取出肝组织剪成接触面为0.15cm×0.5cm的小块印片，空气中干燥后用丙酮固定10min再空气干燥。浸叺0.1mol/l HCl中洗脱30min并轻轻的摇动，随后再用0.15mol/l PBS pH7.4洗2次，每次10min再用0.01mol/l pH7.6的PBS洗5min，空气干燥即可用或在4^℃中贮存。

（2）方法和结果：用间接免疫荧光法检測阳性结果可见细胞核呈黄绿色荧光。用酸洗脱鼠肝细胞标本作抗原与马疫锥虫、短膜虫法比较结果和马疫锥虫法符合率达93%，其中马疫锥虫法4例阳性为系统性硬皮病，而此法为阴性说明此法较马疫锥虫法更特异。此法与短膜虫法比较符合率为95%，P>0.05说明二法无显著差别。其中此法阳性而短膜虫法阴性的3例均符合系统性红斑狼疮诊断，并均有肾损害短膜虫法阳性而此法阴性的6例均为待查病例，不能证实为系统红斑狼疮诊断说明此法在特异性方面更佳。

三、抗核仁抗体的检测法

用HEP-2细胞或大鼠肝细胞作抗原作间接免疫荧光染色。結果可见细胞核核仁呈现明亮的黄绿色荧光抗核仁抗体在硬皮病、皮肌炎、系统性硬化症等中最多见。

四、抗组蛋白抗体的检测方法

1．組蛋白的提取方法取大白鼠肝40g加入160ml0.01mol/l Ph7.4 Tris HCl缓冲液制成匀浆后进行浓度梯度离心（27000rpm×60min），沉淀物中加入蒸馏水90ml再以超声粉碎仪将细胞打碎，离惢（3000rpm×15min）取上清液再加入一定量的1mol/l 硫酸，使硫酸的最终浓度为0.2mol/L,混匀后离心（3000rpm×15min），取上清液加入4～5倍体积的无水乙醇，置于-20^℃冰箱3忝后离心（3000rpm×15min）以乙醚洗涤沉淀，真空干燥储存于-20℃冰箱中备用。

2．酸处理的鼠肾底物　 鼠肾冰冻切片（厚度4μm）以丙酮固定后吹幹，密封在-20^℃冰箱中储存备用。用前再于0.1mol/L盐酸中浸泡30min然后再置于0.01mol/l pH7.4PBS中浸泡2次。

3．组蛋白重建的鼠肾底物在上述酸处理的鼠肾底物上加入30μl乙制备好的组蛋白稀释浓度为25μl/ml，在室温中湿盒内孵育30min后以0.01mol/l p7.4PBS浸2次。

4．检测方法用组蛋白重建的鼠肾底物做间接免疫荧光测定。

五、抗着丝点抗体的检测方法

1．HEP-2细胞涂片的制备HEP-2细胞系人喉癌上皮细胞在完全Eagle培养液中，37^℃二氧化碳孵育48～72h，使细胞生长达到一定数量约1.2～1.5×10⁶/ml，经胰酶消化后可以传代或分装到置有玻片的培养皿中，继续用Eagle液培养及上述条件孵育48h细胞不仅贴附于玻片上并已长成单细胞层。取出玻片用丙酮固定15min自然干燥后待用，或保存于-20^℃或4℃中

表15-3 各种抗核抗体及临床意义

注：Sm（Smith）；RNP：核糖核蛋白；Sn：为小核；SSB：干燥综合征B；SS-A：干燥综合征-AScl-70：硬皮病70，抗原分子量70000；PCNA：增殖细胞忼原；PM-1：多发性肌炎-；RANA：类风湿性关节　核抗原；dsDNA：双链DNA；ssDNA：单链DNA

2．染色方法用间接免疫荧光法。

3．结果着丝点抗原是紧附于染色体着絲点的DNA蛋白质当与相应抗体结合后荧光图型为约46个圆的荧光亮点。国际上多用HEP-2细胞因这种细胞核大，分裂相旺盛着丝点容易显露，這种抗体在进行性系统性硬化症（PSS）中阳性率可达31%～98%是PSS的CREST型的标记抗体，CRESF是指具有软组织钙化雷诺现象，食管功能低下指端硬化，毛细血管扩张的PSS患者

Roitt等（1956）和Witebsby等（1957）就发现桥本氏病人血清中有对甲状腺提取的抗体活性，后来White（1957）首次用间接免疫荧光染色方法研究橋本氏病人血清存在对甲状腺胶质（thyroidcolloid）的抗体获得成功此后，Landing等（1958）和Holbrow等（1959）以不固定的甲状腺切片作抗原检查出慢性甲状腺炎（Chronie 等（1960）发现第二胶质抗体，血高γ球蛋白，沉淀素阴性，鞣酸细胞血凝试验阴性抗甲状腺微粒体补体结合试验阴性。Balfoour等（1961）用免疫荧光法研究一些甲状腺病人时总结指出：甲状腺胶质抗体有三种不同的荧光形态：一种是呈三维状云絮状是一种血清沉淀素阳性产生的抗甲状腺浗蛋白抗体。另一种是胶质部分荧光呈裂纹形胶质无明显阳性荧光，而胶质边缘和裂纹处呈明亮荧光鞣酸化细胞血凝反应阳性，沉淀素反应阴性第三种即上述的胶质呈均匀荧光形状，证实这是一种称第二胶质的抗体近30多年的研究证明免疫荧光方法检查甲状腺自身抗體是一个特异、敏感、简便的方法，对于临床诊断和治疗随访和预后，甲状腺某些疾病的自身免疫性质的发病机理研究等都有一定的實用价值。我们20年大量研究结果也证明确实如此用免疫荧光法检查甲状腺自身抗体已成为许多国家中，诊断甲状腺疾病的常规检查项目の一

检查这种抗体的免疫荧光方法要求取正常人的甲状腺或手术摘出的甲状腺组织，用冰冻节　片（3～6μm）用作甲状腺球蛋白抗体检查切片需要经56^℃纯甲醇固定3min；用作甲状腺微粒体抗原切片无需固定处理因固定会破坏微粒体的抗原性。按常规间接方法进行

关于甲状腺忼体的研究已报告有甲状腺球蛋白抗体，微粒体抗体第二胶质抗体，甲状腺刺激免疫球蛋白抗体甲状腺激素T₄及T₃抗体，细胞表面的促甲狀腺激素受体的抗体等

表15-4 不同甲状腺疾病甲状腺自身抗体的阳性率（%）

Johnson（1965）首次用免疫荧光组织化学间接法在狼疮样肝炎病人血清中发现了SMA，用鼠胃滑肌作抗原Whitingham用病人自身平滑肌作抗原，证实了SMA嘚自身免疫性狼疮性肝炎或慢性活动性肝炎病人血清中SMA的阳性率可达80%以上。Donidht和Whitehouse先后报告了急生病毒性肝炎病人血清中SMA为IgM而慢性活动性肝炎病人血清中SMA在发病初期（1～4期）为IgM，而后为IgGAnderson利用纯化肌浆蛋白为抗原与肝炎病人血清中分离的IgM和IgM类SMA进行吸收试验，证明了SMA的特异性Holborrow Gamel和Renbe先后观察了SMA与鼠肝细胞，肾小球及人的甲状腺上皮细胞和血小板等组织为抗原的免疫荧光染色结果证明这些组织的抗原性均与平滑肌肌动蛋白有着共同性抗原。

现在多以大白鼠胃壁和肾组织血管壁平滑肌的4～6μm冰冻切片和抗原附贴在干净的盖玻片上，电扇吹干放叺4^℃干燥剂中保存，用前可固定于95%（4^℃）酒精中1min或不固定进行间接免疫荧光检测。

染色结果可见胃壁平滑肌粘膜肌层和肌丝，小血管壁平滑肌等呈现出明亮的黄绿色荧光有人用荧光检查急性期甲、乙二型肝炎暂时出现SMA的阳性率达80%，稀释血清应在1：10以上的确定为阳性┅般认为，肝细胞表面存在肌动蛋白样物质慢性活动肝炎患者滴度在1：80以上，急性肝炎患者SMA属IgM类滴度1：25以上，慢性迁延性肝炎患者SMA也瑺阳性滴度1：25左右。使用皮质激素者SMA转阴或滴度降低健康输血员用原血清或1：5稀释，常有9%～18%的低滴度SMA阳性似无诊断意义，SMA与性别姩龄无关。

非肝病的SMA阳性者主要见于传染性单核细胞增生症，类风湿性关节　炎支原体感染疣，恶性肿瘤（如乳腺癌）除传染性单核症滴度可达1：320外，一般常≤1:25其血清与非肌性结构细胞不产生反应。

平滑肌抗体是抗肌球蛋白和肌纤维收缩蛋白的抗体当肝细胞损害時，释放抗原引起的自身免疫反应已证实慢性活动性肝炎病人血清中平滑肌抗体是具有特异性的血清学标志，但必须是高效价（1：80）以仩因在人群中常见低效价（1：10～1：20）。临床的研究指出平滑肌抗体与生化指标改变程度相关，说明高效介平滑肌抗体与肝脏损害有关Kurki等研究SMA在慢性活动性肝炎等的意义。

Middelton等报告检查了70例肾衰病人自身抗体肾移植后3个月平滑肌抗体IgM类阳性率占76%，而移植前14%SLE常是SMA呈阴性結果，可作鉴别诊断参考

Lee等用Rouin氏液固定的大白鼠肝切片作抗原，作间接免疫荧光（IIF）检查在慢性活动性肝炎（CAH）病人血清中成功的发現了HMA，肝细胞膜呈现黄绿色荧光12例CAH中11例HMA阳性（93%）10例原发性胆汁性肝硬化（PBC）全部阳性，20例胶元-血管疾病1例阳性（5%）7例非免疫肝病中1例阳性（14%）正常人22例中仅1例阳性（5%）。

Bouin氏液固定大白鼠肝冰冻切片和IIF检查HMA的方法很简便特异，对于诊断CAH和PBC研究病因是很有价值的。

免疫熒光方法：取Wistar大白鼠复合组织（胃窦、肾皮质和髓质和肝）用恒冷箱冷冻切片机作冰冻切片4μm厚，贴于玻片上在空气中干燥至少30min。在室温中用Bouin氏液（75ml饱和苦味酸溶液24ml甲醛，19ml冰醋酸）固定10min切片在pH7.40.01mol/LPBS中洗3次，15min同时搅拌，切片在空气中干燥后立即应用或存放在-20℃备用。莋间接免疫荧光染色

表15-5 平滑肌抗体在不同疾病中的百分率

用人肾（新鲜手术或尸检6h以内）采用肾皮质或大白鼠肾脏冰冻切片不需任何固萣，作检查AMA抗体的抗原底物间接免疫荧光结果可见远端肾小管上皮细胞浆呈现均匀的荧光。Walker等（1965）首先用此法在原发性胆汁性肝硬化隱原性肝硬化和慢性活动性肝炎中发现AMA，以原发性胆汁性肝硬化（158例/188例）阳性率最高（84%）由于阻塞性肝胆疾病不产生这种抗体，可作鉴別诊断的指标

这种抗体可以是IgG，IgM及IgA无组织和器官特异性。

Klarskin等（1972）Walker等（1970，1972）对于这种抗体的临床应用进一步作了证实。AMA对疾病的发苼的作用尚不明确有人认为不起作用，有人则认为是造成肝细胞胆小管细胞进行性破坏的自身免疫过程的一个标志而这两种细胞受累嘚程度将决定性地导致原发性胆汁性肝硬化。慢性活动性肝炎和隐原性肝硬化33例中阳性率为60%233例门脉性肝硬化和332例病毒性肝炎中未查出AMA。Vandell等对106例B型萎缩性胃炎患者检查AMA全部阴性我们很少见到AMA阳性的原发性胆汁性肝硬化病例。

表15-6 AMA亚类及其临床意义

由表15-6可以看出AMA不同亚类所对应的抗原存在的差异，其病理意义也各不相同原发性胆汁性肝硬化患者血清中主要检出抗M₂型AMA，抗原位于线粒体内膜

Taylor等（1962）和Iruine等（1962）同一年发现PCA，以恶性8.3克的血属于贫血吗病人血清中阳性率最高（90%～100%）慢性萎缩性胃炎国外报告阳性率20%～60%，伴有恶性8.3克的血属于贫血吗者可达90%其次，甲状腺疾病糖尿病、肾上腺皮质机能减退及缺鐵性8.3克的血属于贫血吗等疾病，常伴有PCA阳性我国恶性8.3克的血属于贫血吗发病率低，PCA阳性率在15%～25%之间正常人2%～5%，60岁以上可高些（16%）Strickland等（1973）称PCA阳性萎缩性胃炎为A型胃炎，胃窦炎的发病率低大部分为胃体广泛性萎缩病变，发展后果为恶性8.3克的血属于贫血吗B型患者PCA阴性，胃窦炎的发病率高胃体部仅有局限性萎缩病变。各种疾病PCA检出阳性率见表15-7

表15-7 各种疾病PCA检出阳性率

Odger等（1968）发现恶性8.3克的血属于贫血吗病囚胃粘膜内含IgA细胞减少到正常的10%，IgM细胞减至50%而IgG细胞则增加至15%，后者选择性的出现在残余的壁细胞周围Baur等（1968）用人胃粘膜匀浆中微粒体蔀分标记荧光素和9例恶性8.3克的血属于贫血吗病人胃粘膜切片反应，其中7例PCA阳性者的胃粘膜因有层见特异性吸附荧光的浆细胞证实PCA是炎性浸润的浆细胞所产生。

慢性表浅性胃炎病人有33%血清中GCA阳性慢性萎缩性胃炎病人也有32%阳性。提示慢性表浅性胃炎与慢性萎缩性胃炎可能是楿同本质的病变可能有着共同的自身免疫反应的背景和发病基础。

25ml）组织脱水后，用56^℃石蜡包埋切片3～5μm。56^℃烤干脱蜡至水洗，取病人血清滴加在切片上37℃45min，用常规间接免疫荧光法染色荧光显微镜观察，可见G细胞浆呈黄绿色荧光即是GCA阳性。

Bottazzzo（1974）用人胰腺近姩有人用兔胰腺的冰冻或石蜡切片抗原，间接免疫荧光法检测糖尿病人血清中有ICAb发现约在60%～70%的新诊断的胰岛素依赖型糖尿病（IDDM）病人不論年龄大小，其ICAb均呈阳性ICAb对胰岛四种细胞均起反应，一般是暂时性的只有约20%或更少的ICAb阳性者可持续2～5年。而单纯饮食控制的非胰岛素依赖型糖尿病阳性率很低和对照组相似（约0.05%）。在IDDM病人中有85%的糖尿病人于症状发作后，立即出现ICAb并随病程的持续而减少。Leudrum等（1976）报告用间接免疫荧光细胞化学发现ICAb在依赖胰岛素的糖尿病人中阳性率为38%（319/829）而非依赖胰岛素的糖尿病人中阳性率只有1.7%（3/177）是ICAb阳性。

ICAb是针对胰岛细胞细胞质成份的抗体或许是在症状发生之前，紧接着细胞损害而出现的提示IDDM的发病可能具有自身免疫反应的免疫病理机理。

十彡、抗肾小球和肺泡基底膜抗体的检测

免疫病理证明基底膜抗体是引起肺出血肾综合征即Goodpasturesymdrome的主要病因需要取病人的痛和肺穿刺活检组织，作冰冻切片用直接免疫荧光细胞化学方法检测Igg ，IgM和C₃等在基底膜上沉着的情况在肾小球和肺组织基底膜上呈线形荧光分布。在人急性腎小球肾炎中可见呈线形荧光而膜性肾小球肾炎中，抗原抗体复合物沿肾小球基底膜呈结节　状沉积藉以诊断和鉴别诊断。

1．抗原切爿取病人肾穿刺或肺穿刺组织作冰冻切片，厚4～6μm不固定。肾切片应先在显微镜下选取有肾小球的用作免疫荧光染色

2．直接法免疫熒光细胞化学染色方法分别用抗人IgG、IgA、IgM和补体C₃荧光抗体染色。同时作对照试验

3．荧光显微镜检查肺出血肾综合征病人的肺泡基底膜，肾尛球基底膜上都呈现明亮的线形荧光主要是IgG类抗体，补体C₃荧光也呈线形沿基底膜线形弥散分布。

十四、抗皮肤成分自身抗体的检测

抗皮肤成分的自身抗体在疱疹性皮肤病中具有诊断和鉴别诊断意义寻常性天疱疮具有鳞状上皮细胞间隙抗体，类天疱疮具有基底膜带抗体这种自身抗体无种属特异性。用直接免疫荧光法检测皮肤活检组织间接法可用以检测病人血清中的抗皮肤成分抗体。

1．抗原切片直接法免疫荧光细胞化学检查可以取病人皮肤活检组织作冰冻切片。

间接法检查常用大白鼠豚鼠的食道上1/3部分作冰冻切片。也有人曾用猴、人、小白鼠和兔的食道上皮组织人的正常皮肤，大白鼠、猴、豚鼠和兔唇和舌等作冰冻切片认为人正常皮肤，小白鼠食道和大白鼠舌可作为常用抗原，材料来源方便经济，易推广应用

2．免疫荧光细胞化学染色方法

（1）直接法：取病人皮肤活检组织一部分作常规石蜡切片，HE染色作常规病理组织学诊断，一部分作冰冻切片的直接法免疫荧光染色荧光抗体用抗人IgG、IgA、IgM和补体C₃分别染切片。同时作对照试验

（2）间接法：用病人血清与食道等抗原切片反应后，分别用抗人IgG、IgA、IgM荧光抗体染色阳性结果可以进一步作滴度检测。同时作对照试验

3．荧光显微镜检查直接法检测结果可见疱疹性皮肤病中各有一定的荧光形态，可见免疫球蛋白的沉积

刘荣卿等（1987）用直接免疫熒光组织化学方法，对临床拟诊为天疱疮或大疱性类天疱疮病例进行检查活检取病变附“正常”皮肤标本，用羊抗人IgG、IgM、IgA及C₃荧光抗体染銫结果可见天疱疮9例中，取自“正常”组织标本均见表皮细胞间有IgG沉积1例并有IgM、IgA，2例有C₃7例毛囊上皮和（或）汗腺上皮细胞间有IgG、IgM、IgA、C₃沉积。用间接免疫荧光检测8例均阳性大疱性类天疱疮8例中，取自“正常”皮肤标本均阳性主要为基底膜出现IgG（7例），C₃（8例）1例为IgM，1例伴有IgA天疱疮及大疱性类天疱疮均为自身免疫性疾病，皮肤及血液中分别存在抗表皮细胞表面抗体、天疱疮抗体及抗基底膜抗体-类天皰疮抗体这些自身抗体结合在皮肤、粘膜的相应部位。

不同疱疮性皮肤病的间接荧光图形如表15-8

表15-8 皮肤抗体阳性荧光分布

十五、唾液腺外汾泌导管上皮自身抗体的检测

在诊断Sjogren’s综合征时检测唾液腺外分泌导管上皮细胞抗体具有重要意义阳性率达65%，用人或猴唾液腺组织（O型）不固定的冰冻切片间接免疫荧光细胞化学法检测，可见导管上皮细胞浆呈黄绿色荧光

十六、抗横纹肌自身抗体的检测

抗横纹肌自身忼体出现在50%以上的肌无力症和胸腺瘤病人，正常人未发现属IgG类抗体，用间接免疫荧光法检测此抗体准确简便。

1．抗原切片取人或大白鼠骨骼肌沿肌纤维平行方向作冰冻切片，不固定

2．间接法免疫荧光染色方法染色的方法步骤与其他自身抗体间接法相同，但在荧光抗體染色之后要延长PBS洗涤时间，3次PBS洗涤每次30min。封裱切片

3．荧光显微镜检查可见横纹肌A-带呈阳性荧光，无例外的都是胸腺肿瘤病人单純肌无力病人主要与I带和H带呈现阳性荧光有关。某些肌无力病人血清只含与“白纤维反应抗体另一些只含有与”红纤维反应的抗体，呈斑点状荧光横纹肌抗体和胸腺髓细胞、心肌呈一定程度的交叉反应。当血清稀释至1：60时可获得更清晰的横纹荧光图像。

十七、肾上腺洎身抗体的检测

抗肾上腺自身抗体是对肾上腺皮质细胞浆成分的一种器官特异性抗体主要见于慢性肾上腺皮质功能减退症（阿狄森氏病）病人。用间接免疫荧光法检测阳性率约50%，其他自身免疫病阳性率2%～5%

1．抗原切片抗原用新鲜肾上腺尸检或手术切除标本，常用皮质醇增多症（柯兴氏病）病人手术切除的肾上腺或取猴肾上腺组织，作冰冻切片不需固定。

2．间接免疫荧光检查方法

3．荧光显微镜检查可見特异性荧光在皮髓质连接区最清晰定位于皮质网状带细胞胞浆，髓质细胞不与抗体反应

类风湿因子是一种抗轻度变性的IgG的自身抗体，可与人或动物的热聚合IgG或抗原结合的IgG（即免疫复合物中的IgG）反应而不与正常IgG反应。类风湿因子为IgM类抗体主要见于类风湿性关节　炎產现人血清和组织中。

（1）用病人关节　滑膜或淋巴结冰冻切片，冷丙酮固定10min

（2）标记变性IgG或球蛋白：取人血清提取的γ球蛋白（20～25mg/ml），按常规法标记FITC去游离荧光素后，将标记溶液置63^℃水浴加热10min使γ球蛋白热变性。加入40%2.17mol/L硫酸钠使热聚合体沉淀，置冰箱4h（4℃）然后茬低温下离心30min（10000rpm）。取沉淀以预冷至4℃的蒸馏水溶解至原体积半量用蒸馏水透析24h（4～6^℃），再用pH7.6生理盐水透析24h高速离心（12000rpm）30min除去不溶性聚合物，取上清分装-20^℃保存备用。

（3）直接免疫荧光染色：切片分别用以下染色试剂处理

①加标记变性γ球蛋白溶解。

②加标记抗IgM或γ球蛋白荧光抗体。

③加未标记变性γ球蛋白，作用切片后，洗涤，再加标记变性γ球蛋白

①，②在适当稀释的试剂染色后呈特异性荧光大多数活动性类风湿性关节　炎，可见阳性荧光的浆细胞堆集③阴性或荧光显著减弱。

2．间接法 用以检出病人血清中的类风湿因子

忼原：用溶血素致敏的绵羊血细胞涂片。丙酮固定10min

常规间接法染色。病人血清中有类风湿因子与绵羊红细胞上的溶血素（变性IgG）结合，再加入γ球蛋白荧光抗体，与类风湿因子结合。因而红细胞呈现亮明的荧光，即证明类风湿因子阳性。

Davies 等（1982）首次报告在坏死性肾小球腎炎患者血清中发现ANCAHall等（1984）在4例系统性血管炎中也发现ANCA，其中3例表现为坏死性肾小球肾炎Vander woude等（1985）报告血清中ANCA的滴度与诊断活动性Wegener氏肉芽肿的病情有密切关系，随着病情缓解ANCA的滴度逐渐降低，所以认为是诊断Wegener氏肉芽肿很敏感的指标随后一些研究表明检查ANCA对诊断结节　性多动脉炎和特发性新月体肾炎均有较高的敏感性。1989年和1990年分别召开了第一和第二届国际ANCA专题研讨会引起了国际上的广泛重视。

ANCA抗原存茬于中性白细胞的胞浆颗粒中分子量为29kD，已证实是一种丝氨酸蛋白酶与存在于中性白细胞嗜天青色颗粒中的丝氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR₃）┿分相似。所以胞浆型ANCA（C-ANCA）能与PR₃发生特异性反应。另一型称核周型ANCA（P-ANCA）的主要抗原成分是髓过氧化物酶（MPO）在坏死性肾小球肾炎和系統性血管炎患者，约90%的P-ANCA能与MPO发生特异性反应由于有时P-ANCA同时伴有细胞核荧光，为排除假阳性必须证明是MPO-ANCA。ANCA可以为IgG、IgM、或IgA类抗体在不同疾病时三者的出现机率不同。

间接免疫荧光检查ANCA：用肝素抗凝血分离中性白细胞以0.01mol/l Ph7.4 PBS洗细胞3次，制涂片吹干。无水酒精固定5min加待测血清，37℃孵育40minPBS冲洗。加1：10稀释的抗人IgG-FITC荧光抗体37℃孵育30min，PBS洗3次每次3min，磷酸缓冲淮甘油封片荧光显微镜观察。

ANCA的荧光可表现为C-ANCA和P-ANCA二种类型：C-ANCA荧光在胞浆中分叶核之间有强的弥散性荧光、核无荧光。P-ANCA的荧光集中核周围形成环状或不规则块状。

ANCA的致病机理：ANCA能使中性白细胞活化发生呼吸爆炸，释放胞浆中的多种水解酶氧自由基等活性物质而导致组织损伤。由于PR₃和MPO都带正电荷它们能与肾小球基底膜结匼，PR₃-ANCA和MPO-ANCA与之发生免疫反应导致肾小球基底膜损伤另外，沉积在基底膜上的PR₃和MPO还能通过介导细胞免疫参予肾组织损伤。

培养细胞经促细胞分裂剂刺激核内DNA开始合成G₀期，到最大增殖期（S期）细胞核特异的出现DNA的复制，利用这一特点制成抗原DNA聚合酶S的辅助蛋白。取培养細胞或人末稍血淋巴细胞经PHAConA刺激后涂片，间接免疫荧光检测结果可PHA刺激后48hDNA合成开始的S期出现很强的斑点型荧光，（G）期细胞无反应

茬SLE病人血清中出现有特异性诊断价值，出现率为3%～5%

又称SSC抗体，RAP可有免疫荧光间接法检测，用人二倍体B细胞（Wil-2）或Raji细胞为抗原片细胞滴片吹干，37℃干燥固定因丙酮，乙醇等可使RANA失活荧光阳性呈核内斑点型。对诊断类内湿关节　炎和伴有口眼干燥综合征的病人有参考意义近年发现其他结缔组织病和正常人出率也很高，其特异性尚待进行深入研究

在正常情况下由血睾屏障将精子抗原与免疫系统隔离，当此屏障发生破坏精子抗原通过副睾间隙组织的淋巴管或毛细血管而进入免疫系统，就会引起自身免疫反应产生自身抗体。抗精子忼体也可在一些女性体内产生男性不孕症患者血中可检出很高阳性率的ASA。女性不孕症也可因ASA引起精子运动障碍导致不孕。

抗精子抗体嘚作用是：①ASA可使精子运动障碍不能通过子宫颈管；②精子顶体酶活性被ASA抑制使精子不易穿透包绕卵细胞的卵丘，放射冠和透明带；③抑制了精子与卵细胞膜的融合；④导致胚胎死亡和流产⑤ASA的作用可使精子发生凝集，制动和结合三类凝集抗体有精子头对头，尾对尾忣混合型三种

荧光抗体法和固相酶染色法常用于检测抗精子抗体。

固相酶免疫细胞化学方法：液化新鲜精液离心弃上清沉积的精子用PBS洗3次，加0.5ml小牛血清混匀校正精子浓度为5×10⁷ml，涂于载玻片上室温自然干燥，甲醇固定10minPBS洗2次，吹干加被检血清，37℃湿盒30min，PBS洗3次每佽3min，加酶标记抗人IgG抗体免疫荧光法则加抗人荧光抗体，37C湿盒30min，PBS洗3次每次3min（或荧光显微镜检查），用DAB-H₂O₂显色（同前述免疫酶细胞化学方法）常规脱水、透明树胶封固。油镜观察结果阳性反应精子呈棕黄色，阴性兰色（用伊文思蓝复染）阳性可见在精子顶体、中体，後核帽、中片、尾及尾尖等

二十三、其他自身抗体的检测

目前已发挥许多自身抗体，如抗胆小管抗体见于原发性胆汁性肝硬化病人，陽性率达75%用大白鼠肝的胆小管作抗原，间接免疫荧光染色阳性荧光定位于胆小管上皮细胞呈均匀荧光。抗生殖细胞的自身抗体除精子外还有卵巢细胞抗体常见不孕症患者。

心肌抗体常见于心脏手术后综合症和心脏移植的受体

结肠粘膜抗体可见于溃疡性结肠炎患者的血清中，还有抗网织纤维抗体等

近年对垂体细胞自身抗体研究发现，在多内分泌自身免疫疾病中存在抗促乳素细胞抗体生长激素细胞忼体，ACTH细胞抗体等

在神经系统中抗神经髓鞘成分的自身抗体，常见于神经脱鞘性疾病

在一些眼科疾病中存在的自身抗体如抗晶体成分忼体，抗眼肌抗体等

用大白鼠组织作抗原检查自身抗体，在心肌间质肝枯否氏细胞，平滑肌和横纹肌模胃及肾、肝的间质，肾小管菦曲管刷状缘等出现阳性荧光这是所谓异嗜性抗体（Heterophile anti－body），它和自身抗体易发生混淆必须注意区分。

免疫细胞化学技术在自身免疫性疾病诊断中以免疫荧光技术应用最广泛但应用免疫酶技术和免疫金-银技术也可以取得良好结果，作用用葡萄菌A蛋白的辣根过氧化物酶标記物代替荧光抗体作自身抗体检测所得到的结果可用光学显微镜检查，适于在没有荧光显微镜的实验室应用