免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体)形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发絀明亮的荧光这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量以达到对抗原物质定位、定性和定量测定的目的。
4. 在湿盒里以适当浓度的一抗室温温育1小时
6. 在湿盒里与稀释为4 ug/ml 的荧光标记二抗室温温育1小时。
8. 用封片剂将盖玻爿封在载波片上用干净的指甲油将盖玻片封边,防止盖玻片滑动
1. 要在盖玻片一边角落做记号,以知道细胞在盖玻片的那一面
2. 一抗的濃度需要经过实验摸索确定。
3. 第四步中如果用22×22 mm 盖玻片则在盖玻片上加30 ul 稀释的抗体,并且将盖玻片倒置在玻璃载玻片上然后将载玻片放到湿盒里,在室温温育
来源《细胞生物学实验手册》