为适应2010版GMP要求对湿热灭菌柜的改造_行业标准_新闻资讯_宝正网
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& 为适应2010版GMP要求对湿热灭菌柜的改造
为适应2010版GMP要求对湿热灭菌柜的改造 宝正网-【】 /
&　　灭菌柜是制药行企业常用的设备之一，根据2010版GMP规范对湿热灭菌柜新增的相关要求，从制定方案、硬件选型、控制程序、设备确认这四个方面介绍了灭菌柜针对性的改造过程。
　　关于灭菌柜的介绍：
　　脉动真空蒸汽灭菌柜是无菌原料药生产中的关键设备。它主要由灭菌柜主体、控制系统、蒸汽系统、压缩空气系统、水系统等组成。其工作原理：通过真空泵，借助水的流动抽出灭菌柜腔室的冷空气，使其处于负压状态，然后输入纯蒸气，使其迅速穿透到物品内部，如此反复数次，在高温和高压力的作用下使微生物蛋白质和核酸变性导致其死亡，达到灭菌要求。灭菌后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。工作流程采用微机控制，具有方便、省时、省力、总灭菌时间短、灭菌彻底可靠、物品干燥等特点。
　　1新版GMP的相关要求和设备情况
　　在2010版GMP规范的&附录1：无菌产品&中：
　　第七十条规定：热力灭菌通常有湿热灭菌和干热灭菌，应当符合以下要求：
　　在验证和生产过程中，用于检测或者记录的温度探头与用于控制的温度探头应当分别设备，设置的位置应当通过验证确定。每次灭菌均应记录灭菌过程的时间&温度曲线。
　　采用自控和检测系统的，应当经过验证，保证符合关键工艺的要求。自控和检测系统应当能够记录系统以及工艺运行过程中出现的故障，并有操作人员监控，应当定期将独立的问去显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱进行对照。
　　第七十一条规定：湿热灭菌工艺检测的参数应当包括灭菌时间、湿度或压力。腔室底部装有排水口的灭菌柜，必要时应当测定记录该点在美军过程中的温度数据。
　　若工厂现有的脉动真空灭菌柜都是只有自控系统，没有检测系统，不符合2010版GMP规范的要求，因此需要对设备进行改造。
　　2改造方案
　　2.1具体要求
　　实验室灭菌柜主要用于微生物班组的工、器具和培养基的灭菌。对于培养基等灭菌，需要培养基内的温度也达到要求的115摄氏度或121摄氏度，并保持足够长的时间。这就需要在灭菌柜内有一个活动的探头，能够插入培养基或者液体内，监测其灭菌过程中的温度，对于工、器具等物品的灭菌，要保证灭菌柜内室最冷点达到121摄氏度以上。整个灭菌过程中，内室温度都保持的灭菌温度以上，保持足够长的时间以满足FO值的要求，灭菌柜内热分布均匀，同一时刻内室各处的温度差应不超过3摄氏度。对于上述两个湿度控制点还需要有检测探头，起到记录灭菌过程和复核的作用。
　　2.2硬件改造
　　2.2.1温度探头
　　根据湿热灭菌柜以前的设备确认结果得知，灭菌柜运行过程中的最冷点在室内的排水口。新版GMP规范第七十一条要求对湿热灭菌柜的排水口温度进行全过程测定，灭菌柜现在用于控制的温度探头就安装在内室排水口处，因此该探头位置可以继续用于控制，而且满足新GMP的要求。为了把检测探头和控制探头分开，该探头改为双支高精度探头。
　　灭菌柜内室增加一个耐高温的双支高精度探头，为了方便插入带塞子的锥形瓶等玻璃容器，要求探头是尖头的，而且直径尽量小。探头的导线为柔软的耐高温导线。一般灭菌柜都会预留一至两个验证口，而且有验证口专门的接头，把温度探头穿过接头放入验证口，在内室预留足够长的导线，然后上紧验证口就完成了内室探头的安装。
　　2.2.2记录仪
　　记录仪用于记录灭菌过程的时间-温度曲线，同时对控制系统显示的温度进行复核。考虑到只管、真实、不可修改、使用方面等因素，选择嵌入暗转的2通道有纸记录仪，有纸记录仪有毡笔和热敏两种，厂里原先有一台毡笔的记录仪，长时间不容易印纸，笔尖变干，因此选择热敏记录纸的记录仪。
　　2.3.3控制系统
　　排水口和内室温度探头共四组探头线，两组接至PLC控制系统，两组接至2通道有纸记录仪。
　　2.3控制程序的改造
　　考虑到液体或者培养基灭菌过程中，液体内部到达温度较慢，因此把控制方式由原来的排水口温度单独控制改为排水口和内室温度共同控制。当两处温度都达到设定的灭菌温度后，灭菌过程开始计时。当温度发生波动时，只累计当前温度值高于灭菌温度的时间，在累计时间达到灭菌设定时间后，灭菌过程结束，进入干燥或者排气阶段。
　　3设备确认
　　改造完成后，需要对灭菌柜进行设备确认，包括安装确认、运输确认和性能确认。根据这次灭菌柜的改造情况，确认内容的重点包括：外观确认、电气连接确认、气密性确认和空载、满载的性能确认。
　　通过验证来检查并确认该脉动真空灭菌柜的各项指标能满足生产要求，验证灭菌柜在空载及满载时的温度分布情况、满载下不同位置的热分布试验、热穿透和生物指示剂试验，以及检验灭菌柜灭菌能力能够满足生产工艺和生产能力的要求。每个去热项目都要做三次，以观察确认结果的重现性。
　　4 灭菌柜改造总结
　　灭菌柜改造完成后，操作人员能够随时对灭菌柜的灭菌温度进行复核，及时发现探头温度的偏差情况，增加的内室活动探头使操作人员能够直观的了解热穿透情况或者希望了解的内室位置温度变化情况。经过设备确认，改造后的脉动真空灭菌柜能够符合已定的各项指标，同时满足2010版GMP规范对灭菌柜的相关要求。
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湿热灭菌验证与干热灭菌验证的比较
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为什么培养细菌湿热比干热容易杀死细菌？
热力灭菌_百度百科
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热力灭菌法包括干热灭菌与湿热灭菌法。干热灭菌可使菌体蛋白质变性及电解质浓缩。湿热灭菌可使菌体蛋白质变性，核酸降解及损伤细菌的细胞膜。湿热灭菌的优越性有穿透力强，菌体吸收水分易变性凝固及蒸汽有潜在热能。[1]外文名Thermal sterilization原&&&&理使菌体变性或凝固，酶失去活性标&&&&准杀死细菌的芽孢
高温对细菌有明显的致死作用。热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。但是，更细微的变化已发生于细菌凝固之前。有人认为DNA单螺旋的断裂可能是主要的致死因素。细菌蛋白质、核酸等化学结构是由氢键连接的，而氢键是较弱的化学键，当菌体受热时，氢键遭到破坏，蛋白质、核酸、酶等结构也随之被破坏，失去其生物学活性，与细菌致死有关。此外，高温亦可导致胞膜功能损伤而使小分子物质以及降解的核糖体漏出。干热的致死作用与湿热不尽相同，一般属于蛋白变性、氧化作用受损和电解质水平增高的毒力效应。
热力灭菌时最可靠而普遍应用的灭菌法，包括湿热灭菌和干热灭菌法。灭菌是指杀灭一切生物（包括细菌芽孢），使物体达到无菌状态的一类方法。如常用的湿热灭菌和干热灭菌。常用的灭菌方法 在食用菌的科研和生产中常用的灭菌方法是热力灭菌和辐射灭菌。热力灭菌：利用高温杀死微生物的方法称热力灭菌。当高温作用于微生物时，使细胞膜的结构变化，酶钝化，蛋白质凝固，从而使细胞死亡。根据微生物生长发育与温度的关系，可将微生物划分为低温性微生物、中温性微生物和高温性微生物三大类。不同温度型的微生物对高温的抵抗力不同。当环境温度超过微生物生长的最高温度范围时很容易死亡。超过的温度越高，或在高温条件下时间越长，微生物死亡越快。多数无牙孢的杆菌80~100℃下几分钟就几乎全部死亡，但在70℃下需10~15min才能致死，而在60℃下必须30min以上才被杀死。霉菌的孢子通常86~88℃加热30min即可死亡。但一些细菌的芽孢耐热性极强，在100℃下30min还能生存。所以，灭菌彻底与否，一般以杀死细菌的芽孢为标准。不同微生物对高温的耐受力也不同。一般说来，处于营养生长期细胞耐热性差，处于休眠状态的细胞，如各类孢子耐热性较强。
影响热力灭菌效果的因素很多，这主要是的种类、数量、生理状态、温度、湿度、时间、介质成分和pH等。被灭菌材料中的真菌类微生物较细菌，特别是产生芽孢的细菌易于杀灭；在被灭菌材料中微生物基数大的情况下，同样的灭菌温度、灭菌时间不及微生物基数小的材料灭菌效果好。灭菌的温度越高，时间越长，灭菌效果越好；湿热灭菌较干热灭菌需要的温度低，时间短；在一定温度下，湿热灭菌较干热灭菌效果好。一般来说，被灭菌的基质pH高的不及低的易达到灭菌效果。因此，热力灭菌时要注意被灭菌材料的微生物状况、含水量和pH等诸多因素，选择适当的灭菌温度和时间，以达到彻底灭菌的效果。此外，在对培养基和培养料进行灭菌时，还必须注意灭菌温度和时间对培养基和培养料的化学成分的影响，对一些营养成分，灭菌温度不可过高，时间也不宜过长，以防灭菌过程中产生大量的不利与于食用菌生长的物质。常用的热力灭菌方法有：干热灭菌：干热灭菌主要有火焰灭菌和高温烘烤灭菌两种。火焰灭菌就是通过火焰高温灼烧进行灭菌的方法。如接种时，接种环、接种钩、接种勺、接种铲、解剖刀、镊子等通过酒精灯火焰的灼烧，可以达到灭菌效果。瓶口和试管口在酒精灯火焰上通过几次，温度可达到200℃以上，一切微生物（包括细菌芽孢）都可杀死，达到无菌状态。高温烘烤灭菌是利用高温干燥空气进行灭菌的方法。使用的仪器是高温干燥箱（干热烤箱）。干热灭菌使用于固体非生物性材料，与培养皿、吸管等，不适于液体和生物性材料，如培养基、培养料等。干热灭菌要求温度160~162℃2h。不可温度过高，温度过高时包装灭菌物品的纸张或棉、布类易被热空气烤焦，甚至燃烧。干热灭菌升温时，要使其自然降温，干燥箱内温度降至80℃以下时才可开门。
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第四章 微生物的生活条件
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你可能喜欢什么样的食品腐败后容易产生大量肉毒杆菌,产生的可能性高么.空气中也会有这种细菌的芽孢么?_百度作业帮
什么样的食品腐败后容易产生大量肉毒杆菌,产生的可能性高么.空气中也会有这种细菌的芽孢么?
肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌,在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力.pH&4.6的低酸性罐头食品(含铁罐,玻璃罐) 2.香肠,火腿等腐败食物中一般会产生肉毒杆菌肉毒杆菌在自然界分布广泛,土壤中常可检出,偶亦存在于动物粪 便中.根据所产生毒素的抗原性不同,肉毒杆菌分为A、B、Ca、Cb、D、E、F、G这8个型,能引起人类疾病的有A、B、E、F型,其中以A、B型最为常见.人体的胃肠道是一个良好的缺氧环境,适于肉毒杆菌居住.肉毒杆菌属于厌氧菌,严格厌氧,在胃肠道内既能分解葡萄糖、麦芽糖及果糖,产酸产气,又能消化分解肉渣,使之变黑,腐败恶臭.在厌氧环境中,此菌能分泌强烈的肉毒毒素,能引起特殊的神经中毒症状,致残率、病死率极高.肉毒杆菌芽胞抵抗力很强,干热180摄氏度5-15分钟,湿热100摄氏度5小时,高压蒸气121摄氏度30分钟,才能杀死芽胞.肉毒毒素对酸的抵抗力特别强,胃酸溶液24小时内不能将其破坏,故可被胃肠道吸收,损害身心健康.微生物知识查询
-&-&微生物及无菌知识――消毒与灭菌
微生物及无菌知识――消毒与灭菌
录入时间: 10:27:10
来源：青岛海博
消毒与灭菌
消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事药品生产和检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害患者安全。
&O无菌――不存在活的生物（GMP指南）。
“无菌”从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发展的今天，药品的绝对无菌即做不到，也无法加以证实。然而，无菌制剂的安全性要求人们设定无菌的相对标准。
FDA、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品“无菌”的相对标准，它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为10-6（即产品的无菌保证值为6），系同一标准的不同表示法。这一标准于1980起收录于USP XX中，如今已为世界各国普遍接受和采用。
&O灭菌――使达到无菌状态的方法（GMP指南）。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（GB）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。
&O消毒――用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化（GB）。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。
&O无菌制剂――不存在活的微生物的制剂（GMP指南）。
&O非无菌制剂――所含活的微生物量符合卫生学标准的制剂（GMP指南）。
2．常用消毒剂
常　用　量
① 70%~75%水溶液
② 0.5%洗必泰溶于70%乙醇，再加入2%甘油
用于皮肤、器具等消毒
供洗手用消毒
用于皮肤、器具等消毒
37%~40%甲醛液8~9ml，再加入4~5g高锰酸钾
每m3熏蒸量，密闭12~24h。刺激性强
用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。
新洁尔灭（苯扎溴铵）
0.1%水溶液
用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。
杜灭芬（消毒宁）
0.05%~0.1%水溶液
用于皮肤、器具等消毒
① 0.2%~0.5%水溶液
② 新配0.5%水溶液
用于器具等消毒　　　抗菌谱广，可
用于皮肤消毒　　　　杀灭某些病毒
熏蒸　　　　　　　　但性质不稳定
① 0.33~1mol/L
② 1~1.5ml/m3熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸
喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用
熏蒸，密闭12h以上
5%麝香草酚溶于50%乙醇
喷洒墙面、地面，杀霉菌
3．常用灭菌法
1）干热灭菌法　常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。
①火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。
②干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135~145℃需3~5h，160~170℃需2h以上，170~180℃需1h以上，180~200℃需0.5~1h。除热原则需250℃30min，或200℃45min，180℃2h。
空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。
2）湿热灭菌法　通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。
①煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是100℃，一般处理30~60min可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。
②低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用60~80℃加热（或煮沸）1h，然后置20~25℃保存24h（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。
③高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水的沸点高于100℃，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为：
115.5℃&&&&&&&& 30min
121.5℃&&&&&&&& 20min
126.5℃&&&&&&&& 15min
注意事项：
a. 必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。
b. 注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。
c. 定期检查灭菌器内温度的准确性。
3）化学灭菌法　利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。）
4）滤过除菌法　利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。
过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。
滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22μm。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。
一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应超过8小时。
5）辐射灭菌法　辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、γ射线。
①紫外线：紫外光波长在136~390nm之间，其中260nm左右能破坏核酸，杀菌作用最强。另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变为臭氧共同起杀菌作用。紫外线消毒的效果与光源的功率、光源与被照射物的距离、照射时间、温度和湿度等因素有关。我国规定紫外灯照射强度在距离1m处不低于70μW/cm2（以紫外线测强仪测定）。在操作面上要求强度达40μW/cm2以上。一般每10m2装30W灯管1支，工作前开30~60min。
紫外灯的输出功率随使用时间增加而降低。国产紫外灯的平均寿命（点到70%额定功率的时间）一般为2000h，超过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。
紫外线的穿透力很弱，不能穿透一般包装材料，如玻璃、塑料薄膜、纸等。玻璃能强烈吸收小于350nm的紫外线，石英玻璃能吸收小于200nm的紫外线。因此，它主要用于空气和物体表面消毒，特制的紫外灯装置也可用于水的消毒。
紫外线对眼、皮肤有损坏，照射过程中产生的臭氧对眼、鼻腔有刺激，臭氧过多时使人头晕、胸闷、血压下降。
②红外线：通过加热碳化硅板产生的辐射热能，由空气传导加热灭菌。如红外线烤箱，温度可达180℃左右。热效应特点是由表及里。
③微波：微波灭菌主要是因其热效应。微波加热升温快，温度高且均匀，杀菌作用强。热效应特点是由里及表。不同性质的物品吸收微波的能力不同，其热效应和消毒效果也不同。
微波有一定穿透力，但不强。微波对人体有害，要注意防护。
④60Co灭菌：放射性同位素60Co（或137Cs）衰变时可放射出γ射线，γ射线的能量高、穿透力强，可使细胞内各种活性物质发生化学变化，从而使细菌损伤或死亡。
经60Co辐射灭菌的物品温度升高很少，一般仅约5℃，故又称“冷灭菌”。
60Co辐射存在两个方面的安全问题：一是辐射的直接作用。γ射线对人体细胞同样有害；二是经过辐射的食品、药品的安全性。1984年美国农业部食品安全实验室用辐射处理的鸡肉喂饲小鼠，发现患睾丸肿瘤增加，包括加重癌病损害。因此60Co辐射用于食品和药品都应经过安全试验，进行科学的、全面的评价，高剂量的辐射药品更应慎重。
美国药典规定25kGy为有效灭菌剂量。1997年我国卫生部颁发了60Co中药灭菌标准，该标准限国内流通中药可用60Co辐照灭菌，规定了允许辐照的药材和中成药的品种和剂量。
中药辐照最大吸收剂量标准：
散剂&&&&&&&&& 3kGy
片剂&&&&&&&&& 3kGy
丸剂&&&&&&&&& 5kGy
中药原料粉&&& 6kGy
地址：青岛市李沧区九水东路320号-25 &&&邮编：266100&&&E-mail:&&&
电话:6、935156&&&传真：0、&
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为什么湿热体质比干热容易杀死细菌？
实验室常用的灭菌方法有干热灭菌.高压蒸汽灭菌.紫外线灭菌.过滤除菌四种？各有那些优缺点_百度知道
实验室常用的灭菌方法有干热灭菌.高压蒸汽灭菌.紫外线灭菌.过滤除菌四种？各有那些优缺点
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1.高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。压力和温度之间的关系见表9－1。高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。一般在15磅/英寸2压力下（121.6℃），15～30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。 可以用电热、煤气、蒸汽等。锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。2.干热灭菌微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的。干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。3.间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。4.紫外线灭菌紫外线杀菌力最强的是波长&A的部分。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。无菌室和缓冲间的照射时间为20～50分钟（视房间大小而定），接种箱照射10～15分钟即可。为了加强紫外线灭菌的效果，在照射前，可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷洒5%石炭酸，以使空气中附着有微生物的尘埃降落，同时也可以杀死一部分微生物。无菌室的工作台的台面和椅子，可用2～3%的来苏儿擦洗。然后再照射紫外线。由于紫外线对人体有伤害作用，所以人不要直视正在照射的紫外线灯，也不要在照射情况下进行工作。灭菌后，为了检验紫外线的灭菌效果，可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放一套盛有培养基的培养皿，将皿盖打开5～10分钟，盖好后，放入温箱中培养。如果只有一、二个菌落，可认为灭菌效果良好。如杂菌丛生。则需延长照射时间或同时加强其它灭菌措施。
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干热灭菌.高压蒸汽灭菌.紫外线灭菌.过滤除菌各有利弊。
高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。压力和温度之间的关系见表9－1。高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。一般在15磅/英寸2压力下（121.6℃），15～30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。 可以用电热、煤气、蒸汽等。锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。干热灭菌wei生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的。干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。紫外线灭菌紫外线杀菌力最强的是波长&A的部分。无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。无菌室和缓冲间的照射时间为20～50分钟（视房间大小而定），接种箱照射10～15分钟即可。为了加强紫外线灭菌的效果，在照射前，可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷洒5%石炭酸，以使空气中附着有微生物的尘埃降落，同时也可以杀死一部分微生物。无菌室的工作台的台面和椅子，可用2～3%的来苏儿擦洗。然后再照射紫外线。由于紫外线对人体有伤害作用，所以人不要直视正在照射的紫外线灯，也不要在照射情况下进行工作。灭菌后，为了检验紫外线的灭菌效果，可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放一套盛有培养基的培养皿，将皿盖打开5～10分钟，盖好后，放入温箱中培养。如果只有一、二个菌落，可认为灭菌效果良好。如杂菌丛生。则需延长照射时间或同时加强其它灭菌措施。
高压蒸汽灭菌的相关知识
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为什么湿热比干热容易杀死细菌？
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您好，我认为正好相反，是干热比湿热容易杀死细菌。因干热容易使细菌脱水死亡，湿热容易细菌繁殖。
湿热比干热容易杀死微生物，原因是蛋白质的含水量越多，加热时愈容易凝固，而且湿热所用的水蒸气的传导力与穿透力都比较强，更容易破坏蛋白质。
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说的太好了，我顶！
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说的太好了，我顶！
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