目的基因与质粒用同种限制酶酶切后,产生相同的黏性末端,那目的基因与质粒结合时,有几种方式?_百度作业帮
目的基因与质粒用同种限制酶酶切后,产生相同的黏性末端,那目的基因与质粒结合时,有几种方式?目的基因切割后，产生黏性末端，如果目的基因翻转180°与质粒连接，和不翻转连接，产生的是同种重组质粒吗？
目的基因与质粒只有一种结合方式,因为黏性末端具有回文序列,即两端是相互颠倒的,但在结合时有可能会形成目的基因与目的基因,质粒与质粒的结合体.
如果你用两种不同酶切的话，只有一种连接方式，可以定向插入。但是如果用一种酶酶切的话，那么载体一定要去磷酸化，不然的话，绝大多数都是载体自连，形成空载体。如果载体去磷酸化了，片段一般会有正反两种方式插入载体，如果片段比较小的话，很可能片段会发生多次串联然后连入载体。 目的基因切割后，产生黏性末端，如果目的基因翻转180°与质粒连接，和不翻转连接，产生的是两种完全不同的质粒...
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用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是(　　) A．常用相同的限制酶处理质粒和含目的基因的DNA分子 B．DNA、限制酶和运载体是重组DNA必需的工具酶
C．可用含的培养基检测中是否导入了重组
D．常选用细菌作为重组质粒受体主要是因为细菌繁殖快
答案:B【解析】略
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用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物?额。。问错了。。再问一遍，就是他会产生三种连接产物，那其中的那种载体-载体连接物是什么啊？等于没切么？
不是…一种是需要的产物,一种是切开以后又合上了,等于没切.还有一种是载体载体连接的,就是两个载体连在一起的特殊产物
不是，质粒环被切割后，两个相同的质粒之间可以相互连接形成载体-载体连接物，毕竟他们的末端能够互补
那这种载体载体会不会被导入受体细胞啊
如果是同种酶，结果有如下可能，载体空连，载体和载体互连，载体和目的基因相连。通常这种情况下，载体酶切后要用CIP进行末端去磷酸化处理，这样就不能发生载体空连，载体和载体互连的情况了。。实际操作时，其实仍有一定比例的载体空连，因为CIP处理并不能达到100%效率。如果有用，请采用。...
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请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为&&&&。②在第&&&&轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。①第1组:&&&&;②第2组:&&&&。(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为&&&&。(4)用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb即1 000个碱基对),请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点。Array
本题难度：较难
题型：解答题&|&来源：2014-高三生物一轮总复习备课资源包专题20生物技术在其他方面的应用
分析与解答
习题“请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片...”的分析与解答如下所示：
(1)①一个亲代DNA复制4次得到16个DNA,不含引物A的DNA就一个,其余均含有引物A,故含有引物A的DNA的比例为15/16。②由图示知,第一、二轮循环合成的子链长度均不同,根据半保留复制特点,前两轮循环产生的4个DNA分子的两条链均不等长,第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链,如下图所示。(2)第1组中,引物Ⅰ和引物Ⅱ中第3、4个碱基发生互补导致失效。第2组中,引物Ⅰ'折叠后会出现与后面5个碱基的互补而失效。(3)DNA聚合酶在催化DNA合成时可将多个核苷酸连接起来,形成DNA单链。(4)单独用EcoRV可将质粒切成一段,说明在其上有一个EcoRV切点。单独使用MboⅠ能将环状质粒切成2.5 kb和11.5 kb两段,说明在质粒上有两个Mbo Ⅰ切点,且切点在2.5 kb和11.5 kb之间。两者共同使用时,环状质粒被切成三段,说明在质粒上共有三个切点,如图所示,说明EcoRV的切点在5.5 kb和6 kb之间,如下图所示。
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请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A...
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基因工程、生物技术的安全性和伦理问题
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下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是&&&&　　　　&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键DNA连接酶连接的是粘性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖DNA连接酶连接的是粘性末端两条链主链上的磷酸和核糖同一种DNA连接酶可以切出不同的粘性末端
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