关注今日：3 | 主题：231524
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即送15丁当
【讨论】解答透射电镜生物制样问题&[精华]
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楼主您好：
我想咨询下我们可否送标本到您的公司？或实验室做相关普通电镜观察呢？或者老师可否提供国内有做相关检查的公司名字呢？谢谢老师。
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doranicole
我看很多文献都是制了样之后切片，然后用切片标记的。只要能做出来结果就行，最重要的是不知道细胞团块怎么样控制密度太多挤在一起就没有办法观察。 切片后标记也要看你的抗原有没有失活，一般常规制样要经过锇酸和戊二醛固定，对抗原活性破坏比较厉害，后面还要高温聚合48小时以上，一般抗原到这时候基本上都挂了。如果是采用冷冻制样的话，抗原活性保存会比较好，但是冷冻制样国内开展的不多，有设备的单位一般都不愿意对外，因为做起来特别麻烦，所以我建议你自己标号了胶体金再送去做电镜，可行性高些。关于细胞团，一般1000转离心10分钟，不会很紧的，我们一般都这么处理。
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切片后标记也要看你的抗原有没有失活，一般常规制样要经过锇酸和戊二醛固定，对抗原活性破坏比较厉害，后面还要高温聚合48小时以上，一般抗原到这时候基本上都挂了。如果是采用冷冻制样的话，抗原活性保存会比较好，但是冷冻制样国内开展的不多，有设备的单位一般都不愿意对外，因为做起来特别麻烦，所以我建议你自己标号了胶体金再送去做电镜，可行性高些。关于细胞团，一般1000转离心10分钟，不会很紧的，我们一般都这么处理。 先标记再做电镜？好像没有看过这样的方案，看文献上都是固定包埋最后切片了之后再孵育抗体，倒过来的话。。。？最初都是要固定的吧，可是标记的话要怎么标记呢？都是精细胞，不可能涂片了标记那就没法做电镜了，那就只能是在EP管里标记？ 有没有相关的文献后者方案什么可以参考下？最近免疫组化实验一直很不顺，有很多事情要处理。
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doranicole
先标记再做电镜？好像没有看过这样的方案，看文献上都是固定包埋最后切片了之后再孵育抗体，倒过来的话。。。？最初都是要固定的吧，可是标记的话要怎么标记呢？都是精细胞，不可能涂片了标记那就没法做电镜了，那就只能是在EP管里标记？ 有没有相关的文献后者方案什么可以参考下？最近免疫组化实验一直很不顺，有很多事情要处理。游离细胞内抗原的免疫电镜胶金标记方法
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透射电镜观察生物材料， 扣扣
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您好，请问我的细菌进行超薄切片后在TEM下观察，若培养过程中有纳米颗粒进入细菌的体内，这时候透镜能看得到吗？
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shebojia 您好，请问我的细菌进行超薄切片后在TEM下观察，若培养过程中有纳米颗粒进入细菌的体内，这时候透镜能看得到吗？ 如果纳米颗粒是金颗粒一样高电子密度的，一般好看些，如果是生物材料的，进入细菌后不能形成聚集的话，不太容易看出来。当然，和细菌种类、切片厚度也有关系。
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如果纳米颗粒是金颗粒一样高电子密度的，一般好看些，如果是生物材料的，进入细菌后不能形成聚集的话，不太容易看出来。当然，和细菌种类、切片厚度也有关系。 那请问如果我就是要看细菌里面有没有纳米颗粒，我是用负染的好还是超薄切片好，因为学校只能做负染的。如果是超薄切片好，那普通的超薄切片跟冷冻超薄切片哪一种对细菌的影响要少。刚接触，疑惑比较多，希望您能帮我解惑，谢谢~
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请问您做过线虫的电镜吗？
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最近做的透射电镜观察大肠杆菌鞭毛，菌体周围一团黑黑的，不知道是培养基不好，还是磷钨酸染色太久了。我用1%磷钨酸染色3min。现在不知如何是好啊！！！！！
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那请问如果我就是要看细菌里面有没有纳米颗粒，我是用负染的好还是超薄切片好，因为学校只能做负染的。如果是超薄切片好，那普通的超薄切片跟冷冻超薄切片哪一种对细菌的影响要少。刚接触，疑惑比较多，希望您能帮我解惑，谢谢~ 看里面切片好点，不过你用的纳米材料不知道好切不，如果比较硬是很损钻石刀的，一般电镜室是不会给你做的。至于常规还是冷冻，建议你还是常规吧，冷冻超薄切片很麻烦，而且现在也很难找到电镜室还开展冷冻的。
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xiaoxinmeijiao 请问您做过线虫的电镜吗？ 没有。
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fengyepiaoling 最近做的透射电镜观察大肠杆菌鞭毛，菌体周围一团黑黑的，不知道是培养基不好，还是磷钨酸染色太久了。我用1%磷钨酸染色3min。现在不知如何是好啊！！！！！ 3min时间有点长了，50s试试。
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老师你好。最近在做一个胶束材料的TEM。用磷钨酸负染30s左右。可是拍了三次了拍出来的照片老是不好看。。背景不是很均匀，黑一块白一块的。或者会出现很多磷钨酸的颗粒。我做负染制样的时候是将我的样品滴两三滴到铜网上晾干以后，再在磷钨酸溶液里浸泡30s，拿出来自然晾干。会不会是因为在磷钨酸晾干的过程中，其实我的染色时间远远不止30s的原因，导致拍出这样的效果来？请老师指点一二。我制样样品的浓度是5mg/ml，浓度会不会太大了，但是我这么大浓度拍照时，很不好找我的样品（球形形貌），一般胶束制样的浓度在多少比较合适一点。
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二不挂五 edited on
二不挂五 老师你好。最近在做一个胶束材料的TEM。用磷钨酸负染30s左右。可是拍了三次了拍出来的照片老是不好看。。背景不是很均匀，黑一块白一块的。或者会出现很多磷钨酸的颗粒。我做负染制样的时候是将我的样品滴两三滴到铜网上晾干以后，再在磷钨酸溶液里浸泡30s，拿出来自然晾干。会不会是因为在磷钨酸晾干的过程中，其实我的染色时间远远不止30s的原因，导致拍出这样的效果来？请老师指点一二。我制样样品的浓度是5mg/ml，浓度会不会太大了，但是我这么大浓度拍照时，很不好找我的样品（球形形貌），一般胶束制样的浓度在多少比较合适一点。 对这种样品不熟悉！染色到话我们一般是到时间就用滤纸洗掉多余到液体，这个你可以试试。
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对这种样品不熟悉！染色到话我们一般是到时间就用滤纸洗掉多余到液体，这个你可以试试。好久不见。快到新年了。祝开心快乐！
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wanliheng 好久不见。快到新年了。祝开心快乐！ 版主新年快乐！辛勤劳动一年，辛苦了。祝：身体健康
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老师您好！我想请教一下大鼠睾丸的电镜固定方法，因为睾丸组织非常松散，直接切的话不能切成小块，是否需要预固定一下？之前做石蜡包埋之前用过两种方法，一种是直接浸泡在10%福尔马林里，但24小时候切开时组织仍很松散。另一种方法是将固定液注射到白膜下，再将整个睾丸浸泡在固定液里，这样过夜之后就基本可以切成块了。之前也想过用针头直接穿刺出组织再固定，但由于条件所限，最大的针头是20ml注射器的，而且组织太软了，可能会挫伤它们。**老师解答~
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无色透明的 wrote 请问配置好的2%的四氧化锇水溶液是什么颜色的啊
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你可以用凝胶包裹但拟南芥种子还不至于小到这个程度吧shuidiedinglan wrote 请教楼主：1、生物制样(植物)过程中，在渗透那一步，如果材料太小，比如拟南芥种子，在换包埋剂的过程中，如果换才能保证种子不丢失？？2、透射电镜(生物电镜JEM-1230)低倍下（10,000倍以下）拍照，照片为什么很模糊，细节一点都不清楚，都成一团了，高倍下反而比较清楚，细节比较明显。如下图：3、调焦方法，大家一般都是怎么调焦的呢？4、光圈亮度在高倍下会逐渐变暗，假设在10万倍下，光的亮度为10，可以将其调试成为10万倍下，光亮度为20吗？因为总觉得在高倍下，光太暗，不好调焦呢，看不清啊~~ 求教有什么办法解决呢？？5、透射电镜日常维护的方法？
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你好！我想问一下，关于牙菌斑生物膜直接滴到铜网上，不做切片处理，会被透射电镜的电子束打散吗？会有什么变化？请帮帮忙回答下好吗？多谢！
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给我猫咪的爱 你好！我想问一下，关于牙菌斑生物膜直接滴到铜网上，不做切片处理，会被透射电镜的电子束打散吗？会有什么变化？请帮帮忙回答下好吗？多谢！ 没做过，sorry
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请教楼主，我做的是肌肉的超薄切片，双染后颜色淡，请问染色的时间多少合适。
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woodzs老师，您好，我将要做精子的透射电镜观察线粒体的改变以及有无自噬体的产生，但是关于标本的制备不清楚，我只需离心精子后进行预固定，既要压实又不能使精子破裂，但是这个具体的离心力以及时间不是特别清楚，据说好像是和细胞的不太一样，而且做这个需要的精子块的大小是多少呀？非常感谢。
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woodzs专家您好！我对有翅型白蚁的飞行肌进行了透射电镜观察，结果很不理想，可否请您帮助分析一下问题所在？
我们使用的是2.5%戊二醛溶液（25%戊二醛原液用.01M的PB（pH7.2）稀释）在4度固定过夜，然后交到外校电镜室进行电镜切片准备，并TEM观察，发现线粒体和肌纤维比较模糊，结构（例如线粒体内脊和内/外膜）偏粗，而且和背景的对比不够明显，请问是哪个环节出现了问题？
电镜室老师认为是肌肉样品取样过慢，导致肌肉内部结构发生变化。您认为是吗？
万分感谢！
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woodzs老师，您好，我想做的是骨骼肌肌细胞的细胞器观察，想在透射电镜下同时观察到溶酶体和高尔基体。其中高尔基体可能要胶体金染色，而溶酶体也需要标记染色才能区分。我是直接从动物身上取材，请问老师，这种观察能不能在同意标本上进行，如果可以该怎样进行，有没有先后顺序。。。。。。。。。。。。。老师，拜托了
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你好：请问下：小鼠的贴壁细胞，怎么样制备透射电镜样本啊？非常感谢普及电镜知识，因为之前没做过电镜，所以比较空白
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请教您一下，我做的是观察大鼠大脑某个核团的形态改变
要用电镜观察
但是需要提前把核团取出来
然后再做接下来的电镜的程序。我就是想请教一下怎么定位核团 把要观察的组织取出来 用电镜观察。谢谢
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请问老师，用福尔马林固定的组织可以用来做透射电镜吗？因为只有这个标本可以用了，没有预先准备好。如果可以的话，要如何做呢？
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Woodzs老师您好！我做的纳米脂质体形状的表征，要用透射电镜，文献最多的是用负染法，我的样品滴加到铜网上，然后晾干，接着用磷钨酸染色，我的问题是：染色的步骤是怎么做啊？
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glalguo 请教楼主，我做的是肌肉的超薄切片，双染后颜色淡，请问染色的时间多少合适。染色我的习惯是铀30分钟，铅12分钟。
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许愿瓶liuping woodzs老师，您好，我将要做精子的透射电镜观察线粒体的改变以及有无自噬体的产生，但是关于标本的制备不清楚，我只需离心精子后进行预固定，既要压实又不能使精子破裂，但是这个具体的离心力以及时间不是特别清楚，据说好像是和细胞的不太一样，而且做这个需要的精子块的大小是多少呀？非常感谢。细胞1000转10分钟，精子也差不多，可以先做个厚片看下离心后的细胞密度，选择合适密度的地方切。
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xiaolangzzy woodzs专家您好！我对有翅型白蚁的飞行肌进行了透射电镜观察，结果很不理想，可否请您帮助分析一下问题所在？
我们使用的是2.5%戊二醛溶液（25%戊二醛原液用.01M的PB（pH7.2）稀释）在4度固定过夜，然后交到外校电镜室进行电镜切片准备，并TEM观察，发现线粒体和肌纤维比较模糊，结构（例如线粒体内脊和内/外膜）偏粗，而且和背景的对比不够明显，请问是哪个环节出现了问题？
电镜室老师认为是肌肉样品取样过慢，导致肌肉内部结构发生变化。您认为是吗？
万分感谢！有这种可能，比如样本处理中受力过大也会导致结构模糊。看第二张纤维结构还可以，线粒体的这种结构是蚂蚁特有的吗？不知道切片厚度是多少，切薄一点衬度会好些，也会清楚些。
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米兰的小锁匠 woodzs老师，您好，我想做的是骨骼肌肌细胞的细胞器观察，想在透射电镜下同时观察到溶酶体和高尔基体。其中高尔基体可能要胶体金染色，而溶酶体也需要标记染色才能区分。我是直接从动物身上取材，请问老师，这种观察能不能在同意标本上进行，如果可以该怎样进行，有没有先后顺序。。。。。。。。。。。。。老师，拜托了这两个细胞器都不需要标记就可以直接观察了，都有自己的结构特征。
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焦胖 你好：请问下：小鼠的贴壁细胞，怎么样制备透射电镜样本啊？非常感谢普及电镜知识，因为之前没做过电镜，所以比较空白刮下离心，ppt里面有
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【讨论】解答透射电镜生物制样问题&[精华]
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医患之伤 老师好！ 我想做肠道平滑肌的电镜， 是否需要用玻片把粘膜和粘膜下层刮掉后再放入戊二醛固定， 以及其他的注意事项？
谢谢！！ 不用的，肠道我们一般是取长条状组织，定向包埋，半薄切片再定位平滑肌就可以了。
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老师，您好！我纯化收集了一批病毒，做负染色能看到有，需要做免疫电镜看病毒颗粒上的蛋白，你有做过吗？大致的步骤能分享一下吗？非常感谢。
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may1224 老师，您好！我纯化收集了一批病毒，做负染色能看到有，需要做免疫电镜看病毒颗粒上的蛋白，你有做过吗？大致的步骤能分享一下吗？非常感谢。 这个没做过，但是应该不算复杂，就是标记以后再负染，金颗粒还是比较好识别的。
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您好，我做贴壁细胞的透射电镜，请问具体步骤是什么？万分感谢~
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比良木 您好，我做贴壁细胞的透射电镜，请问具体步骤是什么？万分感谢~ 看我上传的资料吧，里面很详细的。
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请问老师：在光镜下能否判断免疫金标记的位置？如何判断？谢谢
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yy 请问老师：在光镜下能否判断免疫金标记的位置？如何判断？谢谢 如果你的抗体标记了金颗粒的同时还标记了荧光，那就可以在荧光显微镜下定位了，如果没有荧光，光镜下是看不到的。
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想请教一下我们现在想做微囊泡的电镜，就是重悬在PBS中的纳米级膜性小囊泡电镜室说他们那里复染只有用PH7的3%磷钨酸请问你们有做过囊泡的电镜吗？用这个浓度的磷钨酸复染行不行啊 会不会影响囊泡的结构
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yiyao111 你好
想请教一下我们现在想做微囊泡的电镜，就是重悬在PBS中的纳米级膜性小囊泡电镜室说他们那里复染只有用PH7的3%磷钨酸请问你们有做过囊泡的电镜吗？用这个浓度的磷钨酸复染行不行啊 会不会影响囊泡的结构 负染一般就用磷钨酸，这个方法可行的，囊泡主要看你的纯度，提的越纯越好。参考你看的文献，看看他们用的是那种染液，有些也可能用醋酸铀染。
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磷钨酸也是一种进行电子染色的染液吗？这个负染和你说的染色是同一个概念吧？
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yiyao111 磷钨酸也是一种进行电子染色的染液吗？这个负染和你说的染色是同一个概念吧？ 通常我们所说的染色是指染料和要染色的组织成分结合而显色，负染的作用是与组织周围堆积，从而把组织衬托出来，因为染的是背景，所以相对正染色来说称为负染。磷钨酸是电镜最常用的负染液，正染色一般用铅和铀。
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通常我们所说的染色是指染料和要染色的组织成分结合而显色，负染的作用是与组织周围堆积，从而把组织衬托出来，因为染的是背景，所以相对正染色来说称为负染。磷钨酸是电镜最常用的负染液，正染色一般用铅和铀。 那做微囊泡的时候只负染就可以了吗？不需要染囊泡本身？
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那做微囊泡的时候只负染就可以了吗？不需要染囊泡本身？ 是的!
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老师您好，我这两张图片都是波痕，有些切片局部有，有些切片整张都是，是不是刀痕影响的？还是树脂软的过？要是树脂软的话我单纯的多加点MNA可以吗？谢谢
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yy 老师您好，我这两张图片都是波痕，有些切片局部有，有些切片整张都是，是不是刀痕影响的？还是树脂软的过？要是树脂软的话我单纯的多加点MNA可以吗？谢谢 这个确实软，软的原因有时候是脱水不够彻底，有时候是天气太热，多烤烤块吧，然后再切，单纯调整配方中的某一个效果未必理想。
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Woodzs老师您好，我做的是肝硬化的电镜，这张图片中间白色的那部分是什么呀？盼您回复，谢谢！
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小叶间胆管
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想请教您一下 1:：我做的是心肌肥厚模型 现在想做透射电镜 今天刚拿到戊二醛 但是电镜那边的老师并没有提到说要用锇酸进行后固定，是不是我只要用戊二醛固定好送过去就可以了？2： 如果取了心肌组织 在戊二醛里最长能固定多久时间呢？老师下周要放假。。我怕我取了组织 结果那边电镜排不上 就太悲惨了3：请问您取过心肌组织吗？需不需要提前灌注呢？用什么灌呢？多聚甲醛？4：如果是心肌肥厚的话 取左心室具体什么位置 比如心尖、前壁，效果最好呢。。最能证明我心肌肥厚模型的成功呢。。不好意思 问了很多小白的问题 请您不吝赐教。。对病理这里真是不懂。。谢谢您~~~
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foral5ff 大大您好~
想请教您一下 1:：我做的是心肌肥厚模型 现在想做透射电镜 今天刚拿到戊二醛 但是电镜那边的老师并没有提到说要用锇酸进行后固定，是不是我只要用戊二醛固定好送过去就可以了？2： 如果取了心肌组织 在戊二醛里最长能固定多久时间呢？老师下周要放假。。我怕我取了组织 结果那边电镜排不上 就太悲惨了3：请问您取过心肌组织吗？需不需要提前灌注呢？用什么灌呢？多聚甲醛？4：如果是心肌肥厚的话 取左心室具体什么位置 比如心尖、前壁，效果最好呢。。最能证明我心肌肥厚模型的成功呢。。不好意思 问了很多小白的问题 请您不吝赐教。。对病理这里真是不懂。。谢谢您~~~ 1. 锇酸固定是电镜室那边做的，不需要你来固定，所以你放到戊二醛里4度固定2小时后就可以送样了。2. 一般戊二醛固定2周肯定没有问题，我个人觉得适当延长影响不大，但最好别超过1个月。3. 心肌这类打开胸、腹腔就可以取材的组织可以不用灌注，注意动作快点就可以了，一般取脑子一类的需要灌注，但是如果很熟练的人也可以不用灌注，效果没有什么差异。4. 这个不太懂。
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1. 锇酸固定是电镜室那边做的，不需要你来固定，所以你放到戊二醛里4度固定2小时后就可以送样了。2. 一般戊二醛固定2周肯定没有问题，我个人觉得适当延长影响不大，但最好别超过1个月。3. 心肌这类打开胸、腹腔就可以取材的组织可以不用灌注，注意动作快点就可以了，一般取脑子一类的需要灌注，但是如果很熟练的人也可以不用灌注，效果没有什么差异。4. 这个不太懂。 太谢谢您了 ~果然是术业有专攻 崇拜~~以后还有不懂的 请您多多指教~~
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我想请问一下，因为我们这没有这个要求的戊二醛我让人从杭州寄到宁波，这个试剂常温快递可以吗？到了马上放冰箱还可以用吗？
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杨凡起航 我想请问一下，因为我们这没有这个要求的戊二醛我让人从杭州寄到宁波，这个试剂常温快递可以吗？到了马上放冰箱还可以用吗？
不是吧！戊二醛见光易分解，一般低温避光保存。这个试剂不难买到，你多问几个试剂公司，应该可以买到的。
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woodzs老师，您好，我们这里没有做细胞切片的条件，我能联系您，给我们做细胞切片+透镜么？可以的话，我们需要将样品处理到哪一步，怎么跟您联系？谢谢。
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楼主还在吗？想问下要用精子细胞样本做透射电镜观察，应该怎么样做样本呢？能不能置于某种膜上进行处理观察？还是必须要进过包埋然后才能孵育一抗和二抗染色呢？
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doranicole 楼主还在吗？想问下要用精子细胞样本做透射电镜观察，应该怎么样做样本呢？能不能置于某种膜上进行处理观察？还是必须要进过包埋然后才能孵育一抗和二抗染色呢？ 精子如果只是形态观察，可以同培养细胞的处理方法一样，离心固定就可以了。一抗、二抗染色是做什么？做荧光标记吗？电镜是看不了荧光的。如果是做胶体金标记，那先标完了再做电镜制样就可以了。
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精子如果只是形态观察，可以同培养细胞的处理方法一样，离心固定就可以了。一抗、二抗染色是做什么？做荧光标记吗？电镜是看不了荧光的。如果是做胶体金标记，那先标完了再做电镜制样就可以了。 谢谢您的解答，我是做胶体金标记的，但是没有找到精子透射电镜的制样方案，实验室有做细胞石蜡切片的，先用琼脂预包埋然后用石蜡包埋，透射电镜制样时是不是也要用琼脂先包埋再用树胶包埋呢？有没有相关的文献可以参考下？非常感谢。
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生物材料透射电镜检测， 扣扣
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楼主您好，可以帮我看看近期做的小鼠肝脏电镜图么？有些结构实在不明白是什么，做技术的老师讲的也不是很清楚，非常感谢~C57B/L6，M，16W；1、对照（每天灌灭菌注射用水8周）请问：黑色镜头所指是什么结构？脂滴么？（对照组几只做油红染色脂滴都很多），里面的白色的泡状结构又是什么？白色中间的黑色颗粒？红色箭头所指？2、也是对照组，处理同上请问：箭头所指是什么？自噬体么？里面被包裹的结构又是什么？3、药物处理组：药物灌胃6周请问：1、黑色箭头所指是受损的线粒体么？这种结构是否可以被称为线粒体自噬？2、红色箭头所指空泡是什么？3、蓝色箭头所指结构？4、药物处理组请问：药物处理组整体在低倍镜下感觉胞浆结构疏松，请问这样通常见于什么情况？有什么提示意义？初涉电镜，问题较多，盼回复，谢谢楼主，也希望能多多听到大家的意见。谢谢！
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rain_轩 楼主您好，可以帮我看看近期做的小鼠肝脏电镜图么？有些结构实在不明白是什么，做技术的老师讲的也不是很清楚，非常感谢~C57B/L6，M，16W；1、对照（每天灌灭菌注射用水8周）请问：黑色镜头所指是什么结构？脂滴么？（对照组几只做油红染色脂滴都很多），里面的白色的泡状结构又是什么？白色中间的黑色颗粒？红色箭头所指？2、也是对照组，处理同上请问：箭头所指是什么？自噬体么？里面被包裹的结构又是什么？3、药物处理组：药物灌胃6周请问：1、黑色箭头所指是受损的线粒体么？这种结构是否可以被称为线粒体自噬？2、红色箭头所指空泡是什么？3、蓝色箭头所指结构？4、药物处理组请问：药物处理组整体在低倍镜下感觉胞浆结构疏松，请问这样通常见于什么情况？有什么提示意义？初涉电镜，问题较多，盼回复，谢谢楼主，也希望能多多听到大家的意见。谢谢！ 图1：黑色箭头的是脂滴无疑，里面的黑色颗粒应该是电子致密物，这种结构的脂滴以前没见过。红色的看起来像这个肝细胞的另外一个核，但是仅仅切到了一点边。图2：没有看出外层膜是完整的，我觉得应该是扩张的高尔基复合体。图3：黑色箭头的可能是微体，也可能是退化的线粒体，这个不确定，但不是自噬。红色的是滑面内质网。蓝色的不认识。图4：肝细胞肿胀了，倍数太低看不到细节，可以注意下线粒体是否肿胀，粗面内质网是否扩张、有脱颗粒情况，糖原颗粒数量上的变化等。具体的你可以参考《超微病理学》或者《超微病理诊断学》这两本书。
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doranicole
谢谢您的解答，我是做胶体金标记的，但是没有找到精子透射电镜的制样方案，实验室有做细胞石蜡切片的，先用琼脂预包埋然后用石蜡包埋，透射电镜制样时是不是也要用琼脂先包埋再用树胶包埋呢？有没有相关的文献可以参考下？非常感谢。 不需要，直接制样。不过你做胶体金标记是先标记再制样还是制样后在切片上标记呢？
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图1：黑色箭头的是脂滴无疑，里面的黑色颗粒应该是电子致密物，这种结构的脂滴以前没见过。红色的看起来像这个肝细胞的另外一个核，但是仅仅切到了一点边。图2：没有看出外层膜是完整的，我觉得应该是扩张的高尔基复合体。图3：黑色箭头的可能是微体，也可能是退化的线粒体，这个不确定，但不是自噬。红色的是滑面内质网。蓝色的不认识。图4：肝细胞肿胀了，倍数太低看不到细节，可以注意下线粒体是否肿胀，粗面内质网是否扩张、有脱颗粒情况，糖原颗粒数量上的变化等。具体的你可以参考《超微病理学》或者《超微病理诊断学》这两本书。 非常感谢您的解答
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不需要，直接制样。不过你做胶体金标记是先标记再制样还是制样后在切片上标记呢？ 我看很多文献都是制了样之后切片，然后用切片标记的。只要能做出来结果就行，最重要的是不知道细胞团块怎么样控制密度太多挤在一起就没有办法观察。
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