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【求助】想问大家，用大孔吸附树脂一定要做个动态吸附试验的吗？
RT！非常感谢！
一般用大孔吸附树脂富集化合物，都是会做动态实验的，因为你后面用的实验方法就是动态吸附的过程，所以都会进行动态实验的各因素考察。 : Originally posted by zhangkunnb at
一般用大孔吸附树脂富集化合物，都是会做动态实验的，因为你后面用的实验方法就是动态吸附的过程，所以都会进行动态实验的各因素考察。 谢谢。 : Originally posted by zhangkunnb at
一般用大孔吸附树脂富集化合物，都是会做动态实验的，因为你后面用的实验方法就是动态吸附的过程，所以都会进行动态实验的各因素考察。 你好，我想再请教您一个问题，我看到测大孔树脂吸附量有静态吸附试验和动态吸附试验，如果不是做工艺优化的话是不是就不用做静态了呢？我只是用大孔树脂进行硅胶柱层析前的富集和纯化，我感觉做个动态吸附实验就可以了吧？ 嗯，如果你不做工艺优化的话，个人觉得做个动态试验就可以了，而且没必要去优化其工艺，因为你的重心不在这。 : Originally posted by zhangkunnb at
嗯，如果你不做工艺优化的话，个人觉得做个动态试验就可以了，而且没必要去优化其工艺，因为你的重心不在这。 谢了:hand: 不客气，:D|/|/|/|/|/|
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【讨论】大孔树脂
我刚进实验室，做分离，想问楼主，现在我用生物碱总碱进行分离纯化，请问能否用大孔树脂。我在上样后出现了气泡，这时候怎么办？是否可以拿玻璃棒搅动？而且我在清洗柱子的时候出现了断层现象（水冲，不存在密度不一致问题），原因是什么？本人使用大孔树脂进行实验有3年时间，树脂的预处理与再生方法应具体根据树脂的类型分别进行处理。一、树脂的预处理1、树脂装入交换柱后，用蒸留水反洗树脂层，展开率为50-70%，直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止，再用50%-100%乙醇10-15倍体积慢速淋洗。2、用约2倍体积的4-5%HCl溶液，以2m/h流速通过树脂层。全部通入后，浸泡4-8小时，排去酸液，用洁净水冲洗至出水呈中性。冲洗流速为10-20m/h。3、用约2倍树脂体积的2-5%NaOH溶液，按上面进HCl的方法通入和浸泡。排去碱液，用洁净水冲洗至出水呈中性。流速同上。
酸碱溶液若能重复进行2-3次，则效果更佳。
经预处理后的树脂，在第一次投入运行时应适当增加再生剂用量，以保证树脂获得充分的再生。二、树脂再生方法1、酸性树脂
用2.5倍树脂体积的HCl溶液（浓度4%）以2倍树脂体积60-80 min通完，然后用纯水的相同流速（慢速淋洗）30 min之后，加大流速（6BV/h）快速淋洗至出水PH至6-7为止。2、碱性树脂
方法同上，再生剂为4%NaOH溶液，尘洗终点为出水PH7-8。3、中性树脂
配制碱性盐水（含8%NaCl，2%NaOH），以用2.5倍树脂体积60-80 min通完，然后浸泡2-4小时，以纯水淋洗至出水PH呈中性。实验总结1,大孔树脂的度量:个人认为大孔树脂中除含水以外，还含有脂溶性成分，所以用测定含水量的方法不是很方便。我在实验中采用测定树脂体积进行度量，经实验对比发现，此方法很适用。2,吸附量的确定：可以采用过量的对照品进行吸附，根据两者相减可得理论吸附量。实际实验及生产中，特别是生产中，因样品中其他物质的影响，吸附量却大大低于理论吸附量。
在实验中，我一般采用过量样品代替对照品进行吸附量的测定，在实验中上样量仅为此测定吸附量的60-80%，这样可解决吸附过量的问题。3,流速的控制:应根据树脂体积及高度核算。回答：我在上样后出现了气泡，这时候怎么办？是否可以拿玻璃棒搅动？而且我在清洗柱子的时候出现了断层现象（水冲，不存在密度不一致问题），原因是什么？ 1、上样出现气泡不能用玻璃棒搅动，如使用的是小柱子（直径≤1cm），可使用振动的方法解决（指用洗耳球等物敲击，不是指玻璃棒等硬物），如直径较大（≥3cm），就可不用管他。2、洗柱子断层问题：注意观察，在用水冲的时候一般会有气泡产生（可能是水与洗脱剂进行交换时产生，我也不太认得），气泡在向上移动的时候集结，自然就产生断层；另一种原因自然是密度问题，你在用水洗的时候上面的部分（全水）与下面的部分（水与洗脱剂混合）之间密度一般不同，自然就分层。在树脂的洗脱过程中，洗脱下来的液体颜色是不是由深到浅啊，我现在做提取的是蒽醌类物质，颜色由红黑 到黄在变红，不知正确吗？在样前，药物只是用醇提或水提，在直接浓缩，离心上样；上样后，只是用水快速冲洗，出去水溶性杂质和色素，能除尽色素吗？好像不能把，那用大孔树脂提取出来的物质并不纯啊，初次做大孔树脂，很多不懂之处，希望各位高手多多帮助，谢了啊。请问各位大虾：大孔吸附树脂称量问题，上面有大虾提到烘干，具体怎么烘呢？（多少度烘干恒重？各型号一个温度还是各自考虑？烘完后需要挑出不合格的吗？）；也有大虾提到干，湿的一起考虑，湿的标准是怎样？有文献说抽滤至干，可以吗？哪位大侠能告诉我柱床体积怎么定义的吗?小弟发现的一篇文章与各位共享。用大孔吸附树脂分离川芎总提物1　大孔吸附树脂的预处理及再生1.1　预处理：取市售大孔吸附树脂，用乙醇加热回流洗脱(或用改良索氏提取器加热洗脱)，洗至洗脱液蒸干后无残留物。经乙醇洗净的树脂挥去溶剂后保存备用。1.2　装柱：以乙醇湿法装柱，继续用乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出的乙醇，至与水混合不呈白色混浊为止(取1 mL乙醇液加5 mL水)。然后以大量的蒸馏水洗去乙醇，备用。少量乙醇存在将会大大降低树脂的吸附力。1.3　再生：将样品溶于少量水中加至柱的上端，也可以将样品先溶于少量乙醇中，拌入适量树脂，挥去乙醇后，再将拌有样品的树脂加到柱上。先用水，继而以乙醇-水洗脱，逐步加大醇的浓度，同时配合高效液相色谱法作指导。一般用95%的乙醇洗脱至无色时，树脂柱即已再生，然后以大量水洗去醇，即可进行下一次的提取分离。经反复使用后，吸附树脂颜色变深，吸附效果下降时，可用0.01%～1 mol/L NaOH(或HCl)洗涤或浸泡适当时间，至树脂接近原颜色为宜，继用蒸馏水洗至中性即可再用。如果柱上方沉积有悬浮物，影响流速，可用水从柱上进行反洗，以便把悬浮物顶出。经多次使用后，有时柱床挤压过紧，或树脂颗粒部分破碎而影响流速，可从柱中取出树脂，盛于一个较大容器中用水漂洗除去小颗粒和悬浮杂质，再重新装柱。大孔吸附树脂应湿态保存，若部分颗粒暴露在空气中失水，在进行水溶性杂质分离时，失水后被空气填充的颗粒会浮于水面，此时将上浮树脂用乙醇处理，将树脂内部的空气排出后使用。2　川芎总提取物的分离　　取川芎饮片，略破碎，用95%乙醇回流提取9次，每次1.5 h，溶媒用量为8～10倍，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至干，再加适量水加热使溶解，抽滤，滤液加到已处理好的大孔吸附树脂柱(干膏和树脂的比例为1∶15～20，或药材和树脂的比例为1∶2～3)上，慢慢滴加完后，先用水洗至还原糖反应呈阴性(Molish反应)，改用30%乙醇洗至阿魏酸和川芎嗪全部洗脱完全(Rp-HPLC法检测，检测液中无阿魏酸和川芎嗪的色谱峰)，合并30%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至干，低温真空干燥，呈淡黄色粉末，即为川芎总提取物(含川芎生物碱类和酚类化合物)，其中川芎嗪和阿魏酸二者约占本品的25%～29%，收率为0.6%。想问一下，什么样的组分可以用离子交换的介质分离。另外，树脂，纤维素，葡聚糖的介质用来分离有什么具体差别吗？hao_shihai wrote:原创：：：：我来谈谈大孔吸附树脂１．关于预处理其实每种树脂都会附带有前处理说明，这种前处理一般用于指导工业，目前还没有药用标准，所以也没有药用标准的预处理方法，在一般研究时，不考虑残留问题，主要是除掉树脂中影响吸附和检测的杂质，这些杂质包括交联剂，致孔剂等，通常使用的水－醇－酸－碱洗涤可以解决大多数实际问题．但有时也会出现不理想的情况，这是可以在水－醇－酸－碱洗涤前加一个丙酮回流（一般不小于８小时），这样就基本上没有其他问题了．同时需要指出的是：酸碱的浓度一般是５％（质量百分比）和１Ｍ（摩尔浓度），而乙醇多采用９５％乙醇，也有用无水乙醇和７５％乙醇的，我比较倾向于７５％乙醇，这样醇水交替洗涤时柱中产生气泡的可能性就小多了．当然－－－一家之言．２．关于树脂工艺的研究思路　　　思虑才是应用的核心，初接触树脂的人大都没什么好思路，而做过植化的人会将层析的思路移花接木，当然如果用于于相似成分的分离，这种层析思路还是很好的，如果用于富集分离就有点勉强了．因为富集分离时不用考虑柱效，就没有考虑径高比之说．　　２．１．树脂的筛选多采用静态吸附法对一系列树脂进行快速筛选，筛选的目的是筛出吸附能力大的树脂，但是吸附能力大的树脂未必吸附速度快，未必洗脱容易，所以一般选出２～３中树脂进行进一步考察．（具体筛选方法以后在讨论）　　２．２．树脂动态吸附＼洗脱考察一般要控制好流速（１～２ＢＶ／ｍｉｎ）做泄漏曲线和洗脱曲线（具体方法可以与个别人讨论），确定洗脱溶媒，洗脱体积，上样处理量等参数．３．关于一些问题的个人理解
．大孔树脂度量方法，尤其是实验室确定其吸附能力，对量的准确度要求很高，我见到过以下三种办法：测体积＼称潮重＼烘干称重，我个人比较倾向于烘干称重，原因：１，树脂耐热＼耐酸碱，２，称量准确．认为孔树脂完全烘干后吸附效果会受影响是不科学的，因为烘干只为称重，使用时不会是干态，而树脂出厂为何湿保存，是因为树脂干态时脆性大，易破碎从而引起吸附能力下降．（怎样烘？可和个别人讨论）　　　由于时间关系，就先谈到这吧！！！我在用大孔跑丹参型号是HPD-100请问有什么注意的？谢谢！！小弟想请教一问题:在测定大孔树脂对该药品的吸附量时,饱和吸附后,被水洗脱下来的物质的质量该怎么测啊?我就用旋转蒸发,最后称出质量.但我发现对药品有一定的损失.我看了好多说的都是用密度×体积.但密度是怎么测呢?我想过用HPLC,和分光光度计测,但好像不行!因为它的标准曲线不知道!谢谢!希望前辈给予知道!请大家帮帮忙!啊!我遇见过，我把洗脱液超声脱气。效果还蛮好的。注意：极性不要变化太大了哦！！！！！请问怎样进行色谱柱的径高比，收集洗脱液的量工艺优选？以什么作为考察指标？麻烦各位帮帮忙！！一般用95%乙醇冲洗，再用大量去离子水洗至无醇味，如果树脂重复次数过多，你可以先用1%氢氧化钠浸泡，冲洗，再用乙醇洗，水洗。请问各位，大孔树脂上样是像上硅胶柱那样，浓缩到浓度很浓上样，还是直接把提取液上到树脂柱上？？还有树脂柱装上候好像树脂流动性很大，稍微加的洗脱剂快些，树脂就会乱跑，我是在上面加了层棉花，请问大家有更好的办法吗？这个不错.对以前的精彩回帖进行了整理，详见附件，供大家参考。
大孔吸附树脂.doc (55.0k)啊，我有个很疑惑的问题.我选用的是XAD-16大孔树脂,说是吸附非极性物质.可是当我用甲醇洗脱以后,把甲醇蒸干,发现里面有很多水溶性杂质!这是为什么呢!!!!而且想用甲醇再溶也溶解不了啦.hikarugo wrote:啊，我有个很疑惑的问题.我选用的是XAD-16大孔树脂,说是吸附非极性物质.可是当我用甲醇洗脱以后,把甲醇蒸干,发现里面有很多水溶性杂质!这是为什么呢!!!!而且想用甲醇再溶也溶解不了啦.你的洗脱程序是什么?先用水冲洗，然后再用甲醇洗脱的。所以最后浓缩甲醇发现还有很多水溶性物质，真的觉得很奇怪呢。而且那些东西大多都象是原来培养液（细菌发酵）中的色素，还呈现很粘稠的状态baobo wrote:请教几个问题:1,大孔树脂上样浓度是浓点好,还是稀点好?2,流速为1ml/min是不是太慢了,影响实验进展,好像加快点对效果影响不大,谁有这方面的经验体会可以分主享?3,水溶解时不溶物一般怎么处理,可能含有少量要的成分,我一般是洗一洗就算了,各位大虾有什么高招?1.稀一点好，一来不容易形成死吸附；二来可以加快上样速度，从而延长树脂的寿命；2.流速一般没有什么严格的定义，偶认为你可以根据你的柱子的大小，选择适当的流速，不过上样的时候一定要小流速，这样样品吸附效果较好；3.你的问题好象是说水洗部分的溶解性不好，可以稀醇试试看，不过这与你的分离目的有关系了，不好决定～看文献遇到ZTC-1大孔树脂，但搜了半天发现ZTC-1为澄清剂中一种，应该先用ZTC-1先处理后再上柱子，但文献中并没有指出柱子的型号，到底文献中所提的ZTC-1大孔树脂该如何理解？希望各位大虾指点！！江边一碗水 wrote:大孔吸附树脂在上样后是否需要静止一段时间，以求得吸附平衡，此问题大家能探讨一下吗？
我以为上样直接 让样品液通过柱子，那么被柱子吸附的只是其中一部分，我们在实验中发现，流出液中被测成分能占到综上样量的10%，因此，认为此方法值得讨论。不知道各位是怎么做的改变流速和浓度，这种方法不值得提倡。因为有时即使在最佳流速和浓度，被分离成分依然被冲下来。这时，需反复上样2～4次，直到绝大多数被吸附。上样时需低流度。江边一碗水 wrote:大孔吸附树脂在上样后是否需要静止一段时间，以求得吸附平衡，此问题大家能探讨一下吗？
我以为上样直接 让样品液通过柱子，那么被柱子吸附的只是其中一部分，我们在实验中发现，流出液中被测成分能占到综上样量的10%，因此，认为此方法值得讨论。不知道各位是怎么做的我认为让样品直接流过主机就可以了，只要速度控制好就可以，可以采取先快后慢的方法，那样吸收应该比较完全学习了，谢谢实验室上的大孔树脂柱冲多长时间就能沉好？
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大孔树脂装柱后无气泡，乙醇洗脱时都是气泡，怎么办？
大孔树脂预处理后，湿法装柱，一边装柱一边用胶棒敲打柱子，没有上样之前，用水洗柱子，没有发现气泡，但开始洗脱时，随着乙醇的不断加入，柱子上方开始出现气泡，慢慢随着水的留出，树脂和柱壁分离，可以明显看到不是紧贴在壁上，而且柱子上面有的地方还开始气泡很多，有断裂的迹象，但是靠近液面的树脂气泡，稍微敲敲可以被排除，中上端的就很难排除了，怎么办啊？
请各位帮帮忙，我这是刚刚接触过柱子，一切都得自己弄，，没有师兄师姐帮忙哦~
在乙醇洗脱前一定要注意水要留一些，起码漫过柱子，而且，刚开始水洗看着没有气泡，还是要反复缓慢颠倒晃一下，注意排除气泡，这是我在那个滴定管装柱子的经验，可以参考一下 : Originally posted by 下午茶xuc at
在乙醇洗脱前一定要注意水要留一些，起码漫过柱子，而且，刚开始水洗看着没有气泡，还是要反复缓慢颠倒晃一下，注意排除气泡，这是我在那个滴定管装柱子的经验，可以参考一下 我现在就是用滴定管做的试验&&我上乙醇的时候 水漫过柱子10cm呢&&水洗的时候 我洗了好久 有10BV&&而且边洗边敲&&
颠倒摇晃？ 这个.......不懂呀，你还是多问问做过的人吧，哈哈，祝你实验顺利！:P : Originally posted by oliver2011 at
这个.......不懂呀，你还是多问问做过的人吧，哈哈，祝你实验顺利！:P 实验室没人做过&&我这只能靠自己靠虫友们的帮助了~:cry: : Originally posted by 摩卡巧克力 at
我现在就是用滴定管做的试验&&我上乙醇的时候 水漫过柱子10cm呢&&水洗的时候 我洗了好久 有10BV&&而且边洗边敲&&
颠倒摇晃？... 恩，颠倒的时候要稍微慢一点，尽量将气泡排除完全，在用乙醇洗的时候，慢一点也是可以避免后来出现的水泡，壁上粘着的不太多都不太影响。 : Originally posted by 摩卡巧克力 at
实验室没人做过&&我这只能靠自己靠虫友们的帮助了~:cry:... 多和其他实验室交流下，或许有人做过的，我也在愁呢，想养蚊子却不知道哪里有卖的，真麻烦...:shuai: : Originally posted by 下午茶xuc at
恩，颠倒的时候要稍微慢一点，尽量将气泡排除完全，在用乙醇洗的时候，慢一点也是可以避免后来出现的水泡，壁上粘着的不太多都不太影响。... 柱子装好后 颠倒可以排除看不见的气泡？ 我现在乙醇已经开始洗脱了 能不能再颠倒了啊？壁上粘不多&&乙醇不会从壁上留下么？ : Originally posted by oliver2011 at
多和其他实验室交流下，或许有人做过的，我也在愁呢，想养蚊子却不知道哪里有卖的，真麻烦...:shuai:... 其他实验室也没人做的&&养蚊子？？？？你逗我玩啊 : Originally posted by 摩卡巧克力 at
其他实验室也没人做的&&养蚊子？？？？你逗我玩啊... 逗你啥啊，我要做竹醋液对蚊子的驱避性试验，所以要养几批蚊子，不然怎么测试驱蚊效果呀 : Originally posted by oliver2011 at
逗你啥啊，我要做竹醋液对蚊子的驱避性试验，所以要养几批蚊子，不然怎么测试驱蚊效果呀... 还研究这个？那怎么找蚊子啊？你求救求救吧& &这个好难啊！ : Originally posted by 下午茶xuc at
在乙醇洗脱前一定要注意水要留一些，起码漫过柱子，而且，刚开始水洗看着没有气泡，还是要反复缓慢颠倒晃一下，注意排除气泡，这是我在那个滴定管装柱子的经验，可以参考一下 颠倒的时候&&用手堵住滴定管上端 ？然后再反复的敲么？ 树脂在乙醇里面收缩，所以有气泡，你先用低浓度的乙醇冲，然后慢慢过渡到搞浓度，最后在用无水乙醇试试 : Originally posted by daidai0124 at
树脂在乙醇里面收缩，所以有气泡，你先用低浓度的乙醇冲，然后慢慢过渡到搞浓度，最后在用无水乙醇试试 我是从低浓度到高浓度的& & 我的流程要先用水洗到无醇味&&然后用水洗 然后30%-96%的乙醇梯度洗脱&&怎么办啊 二个办法：1、如果你很在乎气泡，水和溶剂都必须超
声30分钟，且浓度差不要过大；2、
过大孔树脂是较粗
的分离方法不必太在离溶剂与水混合过程中产生的气泡，这对分离没太大影响。希望对你有帮助 : Originally posted by ebmzhao at
二个办法：1、如果你很在乎气泡，水和溶剂都必须超
声30分钟，且浓度差不要过大；2、
过大孔树脂是较粗
的分离方法不必太在离溶剂与水混合过程中产生的气泡，这对分离没太大影响。希望对你有帮助
... 气泡影响不大？真的么？ : Originally posted by 摩卡巧克力 at
气泡影响不大？真的么？... 普通吸附一解吸没关系，层析就不行了 用梯度洗脱，就是乙醇不用一下上高浓度，先低浓度再慢慢提高。如果有梯度洗脱仪器就很容易实现了。想AKTA : Originally posted by 摩卡巧克力 at
还研究这个？那怎么找蚊子啊？你求救求救吧& &这个好难啊！... 驱蚊活性筛选倒不难，就是驱蚊机理不是我这种小弟能做出来的呀。呵呵，蚊子一些研究所或各地的疾病控制中心有，就是老板不愿我自己做这个...他怕花钱啊:cry: : Originally posted by ebmzhao at
普通吸附一解吸没关系，层析就不行了
... 我不就是过柱子 是柱层析么？ 还得有影响的啊&&怎么解决啊 我现在用的是滴定管 正常的柱子还没买回来呢&& 查看话题
装柱子上样之后有气泡
前两天湿法装的柱子，用石油醚冲了两天整个柱子里都没有气泡了，今天早上上样之后开始冲柱子，可能是上样的时候有气泡了，然后冲柱子的过程中下面的部分也开始出现气泡，而且挺多的。有什么好的办法么，对分离效果影响会不会很大。
不知道你上的什么柱子？填料是什么。柱子直径多大，如果填料的孔径较大就应该没很大影响，比较粗的大孔吸附树脂应该没多大影响 可以先用初始梯度多冲一会吧 多冲冲，看看会不会冲走 如果是小柱子的话，用洗耳球轻轻敲打柱子外面，这样可能会好点。大柱子的话只有多冲了。希望能帮到你。 如果是小柱子的话，可用洗耳球轻轻敲打柱子外表，大柱子的话就只能多冲一会儿了。希望对你有帮助 如果是小柱子的话，可用洗耳球轻轻敲打柱子外表，大柱子的话就只能多冲一会儿了。希望对你有帮助 如果是树脂柱应该没多大问题的，若是硅胶或者其他&&先敲敲没效果的话&&小柱子建议你加压试试 你的展开剂和石油醚混合的时候有热量放出，所以产生气泡了
用展开剂装柱子，:pig: 我之前装大柱子的时候，是采用干法装柱，装入硅胶之后，是在泡沫板上蹲一段时间的，直到硅胶表面没有浮动的硅胶为止。而湿法装柱呢，在小柱子装过，第一是要保证柱子下面的棉花要塞好，可以事先用冲柱的溶液进行润湿，然后才一次性的倒入硅胶，待沉淀好之后，可以用管子进行抽一下压力。这样气泡就会减少很多 :dragon20: 可以抽压去掉，或冲柱子 : Originally posted by lixishan at
可以先用初始梯度多冲一会吧 请问这个怎么走梯度啊，没有见过过柱子还梯度，你是直溶剂的极性慢慢放大吗？