人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）ELISA试剂盒说明书,17-羟皮质类固_实验百科_中国百科网
人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）ELISA试剂盒说明书,17-羟皮质类固
    
人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）ELISA试剂盒说明书
&&&&本试剂仅供研究使用&&&&&&目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中17-羟皮质类固醇（17-OHCS）的含量。
&&&&实验原理：
&&&&&本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）水平。用纯化的人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加进17-羟皮质类固醇（17-OHCS），再与HRP标记的17-OHCS抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终极的黄色。颜色的深浅和样品中的17-羟皮质类固醇（17-OHCS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人17-羟皮质类固醇（17-OHCS）浓度。
&&&&试剂盒组成：
试剂盒组成
酶标包被板
标准品：36μg/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
样品稀释液
浓缩洗涤液
&&&&（20ml×20倍）×1瓶
（20ml×30倍）×1瓶
&&&&样本处理及要求：
&&&&1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
&&&&2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
&&&&3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
&&&&4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
&&&&5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加进一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加进一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
&&&&6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
&&&&7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
&&&&操纵步骤
&&&&1.&&&& 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24μg/L，16μg/L ，8μg/L，4μg/L，2μg/L）。
&&&&2.&&&& 加样：分别设空缺孔（空缺对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操纵相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终极稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
&&&&3.&&&& 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
&&&&4.&&&& 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
&&&&5.&&&& 洗涤：小心揭掉封板膜，弃往液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃往，如此重复5次，拍干。
&&&&6.&&&& 加酶：每孔加进酶标试剂50μl，空缺孔除外。
&&&&7.&&&& 温育：操纵同3。
&&&&8.&&&& 洗涤：操纵同5。
&&&&9.&&&& 显色：每孔先加进显色剂A50μl，再加进显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
&&&&10.&&&& 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
&&&&11.&&&& 测定：以空缺空调零，450nm波长依序丈量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
&&&&留意事项：
&&&&1．&试剂盒从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装进密封袋中保存。
&&&&2．&浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
&&&&3．&各步加样均应使用加样器，并经常校对其正确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数目多，推荐使用排枪加样。
&&&&4．&请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
&&&&5．&封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
&&&&6．&底物请避光保存。
&&&&7．&严格按照说明书的操纵进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
&&&&8．&所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
&&&&9．&本试剂不同批号组分不得混用。
&&&&10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
&&&&计算：
&&&&以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，&&&
&&&&在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD&&&&&
&&&&值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释&&&& &
&&&&倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标&&&& &
&&&&准曲线的直线回回方程式，将样品的OD值&&&& &
&&&&代进方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释&&&& &
&&&&倍数，即为样品的实际浓度。&&&&&&&& &
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&
&&&&（此图仅供参考）
&&&&试剂盒性能：
&&&&1.样品线性回回与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
&&&&2.批内与批见应分别小于9%和11%
&&&&检测范围：&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
&&&&1.5μg/L -30μg/L&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
&&&&保存条件及有效期：
&&&&1.试剂盒保存：；2-8℃。
&&&&2．有效期：6个月
&&&&厦门慧嘉生物科技有限公司专业代理众多国际生命科学领域的着名品牌。致力于各种ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、一抗二抗、细胞因子、生物试剂、移液器、耗材的销售推广及服务工作。
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葡萄膜炎如何使用皮质类固酵激素?
责任编缉：阳光
核心提示：葡萄膜炎如何使用皮质类固酵激素?皮质类固醇激素是一类强力抗炎药物，是治疗葡萄膜炎必不可少的。但这类药物使用不当将导致严重并发症。皮质类固醇激索的使用方法应因人而异、因病而
葡萄膜炎如何使用皮质类固酵激素?皮质类固醇激素是一类强力抗炎药物，是治疗葡萄膜炎必不可少的。但这类药物使用不当将导致严重并发症。皮质类固醇激索的使用方法应因人而异、因病而异，需严格掌握适应症，减少并发症的出现。一般说来，前葡萄膜炎，如虹膜一睫状体炎，以局部使用为佳。如用1%强的松龙、O.l%地塞米松点跟，急性期每日8次，病情好转后减为每日4次，病情控制后减为每日2次。并在炎症消失后继续用药4周，以防复发。
单纯激素点眼不能控制病情者，可用强的松龙0.3ml球结膜下注射，每周1次，或用地塞米松2mg，每周2次。对后葡萄膜炎，以全身使用激素为主，局部使用为辅。如用强的松20&200mg晨顿服，或地塞米松5&20mg静脉滴注，每日1次。病情控制后逐渐减量，炎症消失后维持用药卜2个月。切不可过早或突然停药，这有可能导致葡萄膜炎复发和肾上腺皮质功能减退。
皮质类固醇激素对全身的代谢有较大影响，尤其是全身、大剂量、长时问使用时更为明显。因此，对不同的病人，选择不同的给药方法非常重要。儿童和孕妇易受激素的影响，产生内分泌功能紊乱，故不宜全身使用激素，应尽量采用局部给药。使用激素可使血糖升高，所以糖尿病患者不宜全身使用激素。使用激素抑制了机体的免疫反应能力，对身上存在感染性病灶如结核者，可能激活病灶或使感染加重、扩散，全身使用激素应非常慎重。全身大剂量使用激素可诱发消化道溃疡，所以原有此类疾病者应慎重。
为了合理使用皮质类固醇激素治疗葡萄膜炎，患者应在使用激素前向医生详细介绍既往病史，以利医生正确选择给药方法。使用激素后，不可自主改变用量或停药，以免产生并发症或病情反跳。用药期间如出现上腹部疼痛，应及时到医院检查.排除消化道溃疡;同时定期查尿糖或血糖，摄胸片或透视，防止并发症的出现。
还有一点患者应该了解，使用激素会产生血中永钠潴留和尿中排钾增加，高血压患者应观察血压变化，血压升高时及时服抗血压药。服用激素期间要注意补钾，如口服氯化钾片，以防低血钾的发生。
希望通过本篇文章的介绍，能对您的眼病有所帮助。对于本篇文章如有疑惑或想了解更多健康资讯，欢迎登入中国眼病网，我们将有更多的健康内容和专家等着您。
（责任编辑：阳光）
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皮质类固醇性青光眼
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　　皮质类固醇性青光眼是由于眼局部或全身长期应用皮质类固醇后所引起的一种继发性开角青光眼。其发病机理尚不清楚，可能与类固醇影响了粘多糖的代谢，使粘多糖积聚于前房角，阻碍房水外流有关。多见于青年人，其临床表现与原发性开角青光眼相似。但一经停用此药多能自愈。 皮质类固醇滴眼2￣8周左右可以发生高眼压反应，停药后多可恢复正常，少数病人恢复迅速，但大多数恢复缓慢，需经数周或数月，约20%可出现青光眼性视野改变。皮质类固醇所引起的高眼压反应与遗传有关。有开角青光眼家族史，，高度近视者发生皮质类固醇性的比例较高。地塞米松、倍他米松、强的松龙眼局部应用较易引起眼压升高，而可的松则较少发生。全身用药对眼压影响较少
　　[症状体症]
　　1.多无自觉症状，少数可有视蒙、虹视、眼胀等； 2.眼压升高； 3.房角开放； 4.可出现性视乳头凹陷、萎缩及视野缺损。
　　[诊断依据]
　　1.有长期使用皮质类固醇的病史，特别是眼局部使用者； 2.眼压升高； 3.眼压升高时房角开放； 4.停用皮质类固醇药物后眼压可逐渐恢复正常。
　　[治疗原则]
　　1.首先是停用皮质类固醇制剂。 2.用药物治疗降低眼压，对眼压难于控制，有进行性视野缺损的年青患者，可考虑手术治疗。
　　[疗效评价]
　　1.治愈：经药物治疗或手术后，眼压及24小时眼压波动均控制在正常范围，视野、视神经无进一步损害。 2.好转：经药物治疗或手术后，眼压降低，但术后需加用药物，眼压及24小时眼压波动接近正常，视野、视神经损害无明显增加。 3.未愈：经药物治疗或手术后联合用药，眼压仍高，视野及视神经损害进一步增加，或手术发生严重并发症致视功能明显减退或失明。
　　[专家提示]
　　该病是一种药源性眼病。要防止其发生，最好就是不用皮质类固醇药物。但临床上有不少病又要使用皮质类固醇药物治疗，不仅要用，其他科亦要用。为预防本病的发生，首先要提高对本病的认识，注意不要滥用皮质类固醇，如必须要用特别是需较长时间(局部滴药一般为4周以上)使用易引起高眼压反应的皮质类固药物时，应密切观察眼压，用药前、后要定期检查眼压、眼底及视野等。某些皮质类固醇制剂，如强的松龙等混悬液结膜下注射，由于浓度较高，吸收缓慢，有些病人仅注射一次就可发生本病，故也不能忽视。还应提醒患者注意的是： 1.不要因为自觉某些疾病用皮质类固醇药物治疗效果较好，就自行购药经常使用，如的确当滴眼液(含0.1%地塞米松)等； 2.在眼局部或全身使用皮质类固醇药物后，如发生视力下降、虹视、眼胀、等症状时，要及早就诊，以免延误诊治。