不同培养基配方对香菇菌丝生长影响的对比试验
　　是常见的之一,在我国栽培历史悠久,而且产量也居世界第一位。近年来,我国香菇人工栽培技术得到了推广和应用,并取得了较好的经济效益,但随着香菇规模化生产,香菇生产日显重要。而培养基是香菇菌丝体生长发育的基质,可以提供香菇菌丝体生长发育所必需的水分、碳源、氮源、各种元素和生长因素,使菌丝体能正常、健壮地生长。笔者进行了香菇培养基配方的研究,旨在选育出较适合香菇菌丝生长的培养基配方。&
　　1　材料与方法&
　　1.1　供试菌株
　　菌株香菇937、香菇939、香菇1363,由辽宁省农业科学院食用菌研究所提供。
　　1.2　培养基配方
　　1.2.1　母种培养基
　　配方1:木屑14g,麦麸6g(煎汁过滤取其澄清液),胡萝卜200g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,蛋白胨5g,琼脂20g,水1 000mL;
　　配方2:苹果100g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,琼脂20g,蛋白胨5g,水1 000mL;
　　配方3:土豆200g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,蛋白胨5g,琼脂20g,水1 000mL;
　　配方4:豆芽100g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,蛋白胨5g,琼脂20g,水1 000mL。
　　1.2.2　原种培养基
　　配方1:木屑78%,麸皮或米糠20%,蔗糖1%,石膏1%;
　　配方2:木屑50%,棉籽壳30%,麸皮或米糠18%,蔗糖1%,石膏1%;
　　配方3:木屑50%,玉米芯30%,麸皮或米糠18%,蔗糖1%,石膏1%。
　　1.3　试验设计
　　1.3.1　母种培养基配方试验
　　用20mm&20mm的试管,每个配方各装30支,培养基装量为试管的1/4,灭菌,冷却制成等长斜面,每个配方分别接入香菇937、香菇939、香菇1363菌种各10支,置于24℃培养箱培养,每天观察菌丝生长状况。记录菌丝萌发时间,测量菌丝生长速度,菌丝满管时间。
　　1.3.2　原种培养基配方试验
　　原料按常规方法拌料,含水量60%~65%,装瓶,灭菌、冷却后接种,置于25℃暗光下培养。观察、记录各培养料配方中香菇各品种菌丝的生长情况、满瓶时间;采用直线生长测量法测量菌丝生长速度,综合分析确定最适宜的培养料配方,设3次重复,每个处理20瓶。&
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灵芝所含的化学成分复杂，目前灵芝主要有效成分有多糖类、三萜类化合物、核苷类等。在灵芝发酵全过程中，把菌体形态、菌体浓度以及养分消耗的生化指标作为控制发酵的标准。& && &一、镜检& && &（一）灵芝菌丝& && &在深层培养的早期，灵芝菌丝粗壮，分枝较少，原生质碱性较强，着色深。显微镜观察菌丝壁有明显的锁状联合。& && &到培养后期，灵芝菌丝变细，有大量分枝，原生质碱性 较弱，着色浅，出现较多空泡，锁状联合不明显，此为菌丝衰老的象征。& && &（二）灵芝菌丝球& && &菌丝疏松或紧密地集合在一起，分枝菌丝从中心向外放射生长，菌丝间被培养基所充填，内部菌丝逐渐老化，甚至菌丝细胞自溶；外层菌丝是年轻的。到了发酵后期菌丝球“刺毛”不清，变短。& && &二、无菌检验& && &灵芝所含的化学成分复杂，多达上百种，目前灵芝主要有效成分有多糖类、三萜类化合物、核苷类等。在灵芝发酵全过程中，把菌体形态、菌体浓度以及养分消耗的生化指标作为控制发酵的标准。主要检验灵芝发酵过程中的各个阶段是否被杂菌所污染，如发现问题，应及时处理。& && &（一）肉汤酚红培养基& && &把灵芝发酵液接种于肉汤酚红培养基内，如果发酵液被细菌污染，由于细菌生长过程中产酸，致使酚红指示剂由红→黄，培养基出现混浊。& && &（二）平板杂菌检验培养基& && &灵芝发酵液涂布于平板培养基上，如染霉菌，可从菌落颜色判断，通常霉菌颜色较鲜艳。菌母类的菌落花样较少，一般呈油脂或蜡质状，表面光滑，粗糙或皱褶，边缘整齐、缺刻或带丝状。& && &三、含量测定& && &灵芝菌体浓度和代谢产物含量测定是控制发酵的重要参数之一，它的大小和变化速度对菌体的生化反应都有影响，因此量的测定具有重要意义。& && &（一）灵芝菌丝体含量测定& && &干重：取不少于100ml灵芝发酵液，水洗至水相澄清。在沙芯漏斗上用已知干重（60℃烘干）的滤纸真空抽滤，然后将菌丝体连同滤纸于60℃鼓风干燥机2小时，迅速称重，精确至0.01g。& && && && && && &湿重：取一定体积的发酵液，用离心机分离，转速3500r/min，离心20分钟后，弃去清液，称菌丝重量。如发酵液粘度大，菌丝不易分离时，采用硫酸铵盐析法或冰冻分离菌丝。& && &（二）乙醇提取物测定& && &灵芝发酵液中菌丝分离之后，用95%乙醇反复提取菌丝3～4次，每次1小时，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，沉淀物在105℃烘干至恒重。测定乙醇提取物干重以g/100ml表示。& && &（三）灵芝菌丝球数量的测定& && &取不少于50ml的灵发酵液，按一定比例再带塞量筒中加水稀释，摇匀后取一定量在直径150mm的培养皿中摊匀，培养皿下垫黑白相间方格纸，用方格数计数。& && && && &&&& && &（四）灵芝菌丝粘度测定& && &粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志，也能反映发酵罐中灵芝菌丝分裂过程的情况，通常用表观粘度（Pa·s）表示之。它的大小可改变氧传递的阻力，又可表示相对灵芝菌体浓度。& &&&（五）灵芝粗多糖重量测定& && &1.灵芝胞外多糖测定 量取离心后的发酵清液250ml，浓缩至50ml。冷却，搅拌下加入3倍量95%乙醇，于冰箱中静置过夜。次日离心，沉淀物（粗多糖）依次用无水乙醇、丙酮洗涤，真空干燥至恒重，称重准确至0.001g。& && &2.胞内粗多糖侧定 取一定体积灵芝发酵液，离心或过滤分离其中菌丝体，以蒸馏水洗涤3～5次，60℃烘干，研细。称取菌丝体干粉1g，以50ml蒸馏水于沸水浴中抽取3次，每次2小时。离心后合并抽提液，浓缩至原体积的1/5，搅拌下加入3倍95%乙醇，于冰箱中静置过夜，以下操作同胞外粗多糖测定。按下列公式计算：& && && && &（七）灵芝三萜含量的测定& && &1.样品的制备 & && &取烘干的灵芝菌丝粉碾磨0.3g，菌丝：95%=1:50（w/v），置于50ml容量瓶中加水至刻度，在超声波仪中超声破壁2.5小时后，于4000r/min离心10分钟，取上清液备用。& && &2.样品测定& && &采用752型分光光度计，标准溶液用齐墩果酸，用甲醇定容；香草醛溶液为5%冰醋酸，通过比色法测定灵芝三萜含量。& && &灵芝多糖、灵芝三萜是灵芝及灵芝孢子中重要的化学成分。其含量及活性的高低，直接决定灵芝制剂的作用效果。
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在食用菌行业中，大多数人缺的不是方法，而是方向!
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配方、制造工艺制备方法
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【资料内容】
★ 一种富硒冬虫夏草菌丝体的制备方法&&& 摘要：发明提供了一种富硒冬虫夏草菌丝体的制备方法，所述方法包括：将冬虫夏草菌种接种至啤酒糟为基质的液体发酵培养基中，20~30℃、120~200r/min条件下培养4~8天，于发酵液中得到所述富硒虫草菌丝体；所述液体发酵培养基按如下组成配制：啤酒糟10~50g/L，Na2SeO3 10~30mg/L，溶剂为水，pH4~8。所得发酵液可进一步按常规方法进行分离获得所述富硒虫草菌丝体。与现有技术相比，本发明方法反应条件温和、生产成本低、设备投资少，易于实现工业化，获得的菌丝体具有较强的生物学活性，从而有望在动物疾病的预防和治疗上取得突破。
★ 一种灵芝液体发酵菌丝体提高产量及微量元素富集的方法&&& 摘要：本发明涉及到灵芝液体发酵菌丝体领域，是一种灵芝液体发酵菌丝体提高产量及微量元素富集的方法。其特征在于将斜面灵芝菌种接种到液体种子培养基，培养基中添加含有微量元素物质经过紫外和钴60伽马射线诱变选育驯化，再到发酵罐逐级扩大培养，经过液体深层发酵后，灵芝菌丝体分离过滤、真空微波干燥、粉碎得到产品；本发明所根据培养基中微量元素组成和分布，采用pH值稳态反馈分阶段控制的发酵工艺，更有利于提高多种微量元素转化效率，工艺高效可控，菌丝体附加值较高，适于工艺生产；本发明中菌丝体的干燥方法采用热风联合真空微波干燥技术，保持了菌丝体中有效成分的生物活性。
★ 一种虫草菌丝体及制备方法&&& 摘要：本发明公开了一种虫草菌丝体及制备方法，包括如下步骤：蝙蝠蛾拟青霉菌种接种恒温培养、种子罐培养、发酵罐培养、超低温真空浓缩、冷冻干燥、粉碎。本发明所述方法制得的虫草菌丝体较现有技术生产的虫草菌丝体，产品中钙含量提高90～120倍；镁含量提高1～2倍；铁、锌、虫草酸、虫草素含量提高20～50％；SOD酶活力提高20～30％。显著提高了产品的保健功效。
★ 一种高产三萜类化合物的樟芝菌丝体发酵方法&&& 摘要：本发明涉及真菌液体发酵培养领域，提供了一种高产三萜类化合物的樟芝菌丝体发酵方法，包括以下步骤，斜面菌种活化，摇瓶液体种子制备，液体种子扩培，三萜条件发酵，三萜条件发酵时间大大缩短，最短为2天，三萜条件发酵培养基的成分为：玉米淀粉10-60g/L，麸皮10-60g/L，硫酸镁0.5-2.0g/L，橄榄油2-10ml/L。本发明所述樟芝菌丝体发酵方法大大提高了樟芝液体发酵产物中三萜类化合物的产量，三萜类化合物含量与椴木培植方法生产的樟芝菌丝体中三萜类化合物含量相当，但成本降低千倍，即使与现有液体发酵工艺相比，三萜类化合物产量也是显著提高，成本降低十分明显，为樟芝产业化奠定了坚实的基础。
1、&一种灵芝菌丝体及其制备方法2、&一种桑黄菌丝体的制备方法3、&一种高产酸性多糖的虫草菌丝体的培养方法及酸性多糖4、&一种基于膜技术提取蜜环菌丝体的方法5、&冬虫夏草菌丝体发酵物及其应用6、&一种提高灵芝液体发酵菌丝体灵芝酸含量的方法7、&一种富铬锰锌硒硼灵芝菌丝体液体发酵的方法8、&桑黄菌丝体活性多糖的制备方法9、&一种灵芝液体发酵菌丝体提高产量及微量元素富集的方法10、&灵芝菌丝体生产工艺11、&一种虫草菌丝体及制备方法12、&一种冬虫夏草菌丝体固体发酵水提液在调节免疫功能方面的应用13、&一种冬虫夏草发酵菌丝体活性组分的发酵及提取方法14、&一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法15、&一种高产三萜类化合物的樟芝菌丝体发酵方法16、&一种富硒冬虫夏草菌丝体的制备方法17、&一种富硒蛹虫草的液体菌丝体发酵培养基配方的制作方法18、&荷叶离褶伞菌丝体中试发酵工艺19、&一种基于膜技术提取虫草被孢菌丝体的方法20、&一种基于膜技术提取虫草头孢菌丝体的方法21、&药用猴头菌菌丝体液体深层发酵培养方法22、&药用猴头菌菌丝体固体液体混合培养的方法23、&玉芝固态菌丝体的制备方法及其应用24、&青芝固态菌丝体的制备方法及其应用25、&赤芝固态菌丝体的制备方法及其应用26、&小豹斑鹅膏菌丝体快速繁殖的方法27、&一种抑制牛肝菌菌丝体褐化的培养方法28、&加速黄柄鹅膏菌丝体生长的优化培养方法29、&一种通用型灵芝菌丝体发酵培养基组合30、&一种利用血红铆钉菇液体发酵生产菌丝体的方法31、&一种香菇菌丝体固体培养基及用其培养香菇菌丝体的方法32、&一种菌丝体抗旱种衣剂及其制备方法33、&一种提高虫草素含量的蛹虫草菌丝体的人工培养方法34、&一种蛹虫草菌丝体的生产工艺35、&添加火麻仁培养虫草菌丝体的方法36、&一种利用黄酒糟作为液体培养基来生产药用或药食兼用菌丝体的方法37、&松乳菇菌丝体固体发酵方法及其固体发酵提取物的应用38、&一种平菇菌丝体袋的夏季贮藏法39、&含有桑黄菌丝体发酵液的花期延长剂40、&一种食用菌菌丝体培养用温房方法及装置41、&用生产淀粉产生的渣糟水制备灵芝菌丝体液的方法42、&固体繁育冬虫夏草菌丝体及产品的方法与装备43、&一种富硒毛头鬼伞菌丝体及其菌粉的制备方法44、&一种提高纯正冬虫夏草真菌&蝙蝠蛾被毛孢菌丝体生物量的方法45、&一种深层液态发酵生产樟芝菌丝体的方法46、&利用纤维素酶发酵废菌丝体和沼渣生产生物钾肥的方法47、&一种富锗蛹虫草菌丝体的培养方法48、&添加山药促进培养拟黑虫草菌丝体有效药用成分的方法49、&桑黄菌丝体培养基及采用该培养基发酵桑黄菌丝体的工艺50、&一种含有桑黄菌丝体发酵液的叶面肥及其制备方法51、&利用底锅水生产大秃马勃菌丝体的方法52、&一种冬虫草菌丝体的生产工艺53、&白灵菇、虫草菌丝体口服液及其生产方法54、&冬虫夏草菌丝体和子实体的栽培方法55、&一种高抗癌活性的朴菇菌丝体56、&一种基于固态表面培养生产樟芝菌丝体的方法57、&一种樟芝菌丝体的新颖培养方法58、&一种以石斛纤维为基质的羊肚菌菌丝体的制备方法59、&一种利用真菌诱导子提高桑黄黄酮产量的桑黄菌丝体液体发酵方法60、&菌丝体蛋白粉制作方法及含有该蛋白粉的水稻抗寒蛋白肥61、&一种灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方和优化方法62、&金针菇菌丝体发酵工艺63、&富锗灵芝菌丝体的生产方法64、&培养双孢蘑菇菌丝体的方法和用于培养其的培养基65、&一种利用菌丝体生产有机-无机复混肥料的方法66、&一种液体发酵培养富硒、锌元素的金针菇菌丝体的方法67、&冬虫夏草菌丝体麦片及其制备68、&蔷甘菌人工培养形成子实体和菌丝体的方法69、&黑柄炭角菌仿生态工业化培养菌丝体工艺和培养基配方70、&双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法71、&大规模液体深层发酵生产亮菌菌丝体菌粉及其多糖工艺72、&高产SOD云芝菌丝体深层培养方法73、&一种雷蘑菌丝体及其培养方法和用途74、&利用谷物培养菌丝体的方法,其产物的培养产物的用途75、&蘑菇菌丝体的生产方法及其用途76、&胶陀螺或其菌丝体人工培育方法及应用77、&菇状蛹虫草菌丝体的制备方法78、&从含菌丝体的培养基中提取有用成分的方法79、&食用菌菌丝体悬浮饮料及其生产方法80、&液体发酵生产鸡菌菌丝体的方法81、&一种灵芝菌丝体的生产方法82、&培养基和菌丝体生产金菇粉的方法83、&食用菌丝体生产法84、&一种液体发酵生产富含锗的灵芝菌丝体的方法85、&作为土壤助剂的菌丝体的应用86、&一种用深层培养菌丝体制作蘑菇栽培种的工艺&&&&&&&&&&&&
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