wright giemsaa染料为何染出来颜色为紫红

为何染料颜色调好会出现自然光与节能灯不一样的色_百度知道
为何染料颜色调好会出现自然光与节能灯不一样的色
节能灯的显色指数通常为良,85到95为优。因为,50到70为一般。人工光源,95到100为“同自然光”,要在色温接近的自然光下比较,70到85为良,例如节能灯,人工光源下调的颜色,显色性好坏用显色指数来评价其优劣。其次。显色指数50以下为劣,不同色温的自然光下,颜色也是有差异的主要是节能灯的显色性不是很好
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出门在外也不愁那种给染色体染色的试验,比如Giemsa染色,为什么染的都是中期的?
樊老湿30149
从必修一开始看起.脂肪的检测要染色,苏丹三染成橘黄色,苏丹四染成红色.然后.是DNA与RNA在细胞中的分布试验要染色.甲基绿将DNA染成绿色,吡罗红将RNA染成红色.观察线粒体的试验中,用健那绿将线粒体染色.观察植物细胞有丝分裂的时候,有龙胆紫溶液或醋酸洋红液将染色质染色.大概高中生物试验中要染色的就这些.而要用试剂的就不止这些了,有颜色反应的液不止.不知道你问的是哪种,如果你要补充问题的话,我再来回答.
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因为中期的染色体排列整齐有序,染色很清晰
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【求助】关于中性粒细胞计数染色方法
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这个帖子发布于4年零95天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
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最近做腹腔灌洗液中性粒细胞计数。需要用灌洗液沉淀涂片。我们实验室的老师建议用的是HE染色。可是我看到的文献上大多数用的是基姆萨染色,或者是瑞氏染色。想请问大家,这两几种方法谁好?这可以用HE染色吗?谢谢~
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这几种方法都是可以的,根据个人或者实验室习惯不一样,可能他们选择的染色方法 不一样。
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HE染色:  苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。瑞特(Wright)染色法 :为发观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须嘲行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法。 瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白,嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。 吉姆萨(Giemsa)染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更为清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min。或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。另外,PH对细胞染色有影响,同时制备厚薄适宜,分布均匀的涂片也很重要。具体到中性粒计数,推荐还是用瑞特染色,或者用复合染色。希望以上对你有所帮助。
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【求助】亚甲基蓝-伊红染色为什么染出来的都是红色的?
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这个帖子发布于10年零351天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位高手:
我最近在亚甲基蓝-伊红染色过程中,发现染出来的细胞都是红色的。不知是什么原因?各位高手可否告诉我亚甲基蓝-伊红染色的过程和技巧???
另外我做的是哮喘模型,肺泡灌洗液离心后要染色数嗜酸性粒细胞的绝对数和在白细胞中的百分比,我不知道用亚甲基蓝-伊红染色和 瑞氏染色哪个更好???
希望得到你们的指导,谢谢!!!
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xiaoba_008 edited on
瑞氏染色使用的是碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄色伊红(Eostm Y),因此也称美蓝-伊红Y染色。步骤:肺泡灌洗液离心后取沉渣涂片,可先用甲醇固定2-3分钟,用蜡笔在两端各划一道横线,以防染液外溢。滴瑞氏染液于血片上,直至将涂片浸盖为止,待染1~2min后,滴加等量缓冲液或蒸馏水,轻轻吹动,使之混匀,再染4~10min,用蒸馏水冲洗、吸干、油镜观察。?嗜酸性粒细胞对酸性染料具有亲和力,颗粒为红色,中性粒细胞和淋巴细胞既能和酸性染料又能和碱性染料结合,为紫红色,当你的染料过酸性时,所有的细胞染色就会偏红,影响判断。染液pH6.4~6.8为佳
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或许我表述的还不够清楚,那么我就直说了吧,亚甲基蓝. 产品英文名, Methylene blue(原先拼写有误,:-P)又称美蓝,所以ysjuliet提到的亚甲基蓝-伊红染色其实就是我写的瑞氏染色(美蓝-伊红染色),不存在两者哪个更好的问题。不知这个回答满意否?
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关于丁香园吉姆萨(Giemsa)染色法原理
吉姆萨(Giemsa)染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏三性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。配制顼特液必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。
一般性操作技术血涂片制备;细胞染色;显微检查;血液病诊断;染色不良;瑞特(Wright)染色法;酸性染料;伊红;碱性染料;亚甲蓝;吸附作用;PH对细胞染色的影响;甲醇;吉姆(Giemsa)染色法春天要常用润肤剂,它含有松香油脂酸和丰富维生素a,常用可加快皮肤血液循环,剌激面部细胞分泌,有效改善皮肤生理环境,减少气候对皮肤的危害。
第二节 血涂片的制备和细胞染色
血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,非凡是对于各种血液病的诊断具有重要的价值,近年来血细胞分析仪的广泛应用,血涂片的观察也可作为判定仪器结果的简易方法。比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量,借以作为仪器结果分析后质控的参考。
但积压涂片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。例如,血膜过厚细胞重叠缩小,血膜太薄白细胞多集中于边缘,细胞分布不匀;染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。因皮制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要革本技术之一。
血涂片制备方法及注重事项将在实习指导中具体介绍。
1.瑞特(Wright)染色法:为发观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须嘲行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法。
(1)瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝。美蓝轻易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红通常为钠盐。即伊红和伊混合后,产生一种憎液性胶体伊红美蓝中性沉淀,即瑞特染料。
(2)细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白,嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
(3)PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏三性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。配制顼特液必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。
新鲜配制的染料偏碱,须在室温或是37℃下贮存一定时间,待染料成熟,主要是美蓝逐渐转变为天青B后才能使用,贮存时愈久,染色效果愈好。EAM
GILLILAND等采用吸光度比值作为顼特染液的质量规格。rA测定方法如下:取瑞特染液15-25μl(视染液浓度而定),加甲醇10ml稀释,混匀后以甲醇为空折管,分别以波长650nm和25nm比色。Ra=a650/a525.因为美蓝吸收峰小组长为650nm,伊红吸收峰波长为525nm
;天青B吸收峰也为650nm但吸光度A约为美蓝的一半。所以新配染料rA接近2,随着美蓝逐渐氧化为天青B,RA也相应下降。RA下降到1.3±0.1时即可使用。瑞特染液贮存过程中,必须塞严,以防止甲醇挥发和被氧化成甲酸。有人主张在配方中加入甘油30ml,防止甲醇挥发,关可合细胞染色清楚。甲醇必须纯净,如甲醇中丙酮含量过多,染色偏酸,使白细胞着色不良。
2.吉姆萨(Giemsa)染色法:吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更不清楚,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min。或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。
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