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【求助】活性厌氧污泥保存方法
本人是本科大四学生，专业为生物技术。因对环境生物技术感兴趣，毕业试验选择的课题为“活性厌氧颗粒污泥保存方法的初步研究”，但因专业差别太大，至今仍无头绪，求前辈指教一二。必感激涕零
成熟的颗粒污泥直接装桶里密封不就是了么。。 呵呵，如果能培养好了，直接放冰箱就好了，还用研究？ 导师说需要大量且长期保存的方法，谢谢您！还有没有其他的方法呀？ Originally posted by sky_pele at
成熟的颗粒污泥直接装桶里密封不就是了么。。 导师说需要大量且长期保存的方法，谢谢您！还有没有其他的方法呀？ 冷冻吧，我猜……我记得师兄姐们放假回家都会保存一些…… Originally posted by realrice at
冷冻吧，我猜……我记得师兄姐们放假回家都会保存一些…… 有没有查厌氧颗粒污泥保存方面的资料网站啥的？
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问题提出时间： 15:26:07
严格厌氧菌用什么方法长期保存？
各位专家好！
像产气荚膜梭菌、丁酸梭菌这类的严格厌氧菌用什么方法可以进行长期保存呢？我们平时用的甘油管可以吗？有没有更合适的简便方法？谢谢！
行业分类：生物、医药
回答时间： 16:20:23
厌氧菌的菌种保存，一般以下三种方法： 1。革蓝阳性芽孢杆菌可用蒸馏水低温保存。 2。革蓝阳性球菌或杆菌采用血液低温保存。-40度
3。冷冻干燥保存适用于所有厌氧菌。
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回答时间： 16:34:01
一、厌氧细菌的甘油保藏方法：
厌氧甘油的制备： 厌氧瓶或厌氧管中放置一定量的甘油，甘油的量根据需要加入，不要多加，因为厌氧甘油制备好以后不能反复灭菌，反复灭菌甘油会变性而呈黄色，且有一股芳香味道。加入终浓度为0.04 %的 L-cysteine和 1 %的5 %的 N2S母液。往厌氧瓶中通N2，通气时间和配制培养基时时间相同。盖上塞子和盖子。121 ℃， 20 min 灭菌后备用。
取新鲜菌液（对数期），在通N2 的情况下，用针筒和针头往有菌液的厌氧管中加入终浓度为15-20 %的厌氧甘油，再通一会N2，目的是赶走在转移甘油过程中带进去的O2。盖上塞子和盖子，混匀，冻于-80 ℃。
活化：用针头和针头吸取一定甘油保藏的菌液，加到培养基当中，加的量一般要多于1 %，因为厌氧菌的生物量比较小，一般2到5 %左右。目测加完甘油菌液的培养基是否浑浊，并作记录。如果加入的菌液太多，造成一开始培养基就比较浑浊，会干扰我们对菌是否生长的判断，而且甘油太多也会抑制菌的生长。
二、厌氧细菌的冷冻干燥保藏方法：
1、厌氧牛奶的制备：先配置 10 % Difco Skim Milk（BD）的母液。和厌氧甘油配制方法一样，转移到厌氧瓶中，加入加入终浓度为0.04 %的 L-cysteine和 1 %的5 %的 N2S母液。通N2，盖上塞子和盖子。113 ℃， 15 min 灭菌后放置过夜，于4℃ 放置备用。放置过夜后牛奶不结块，溶液均匀，不沉淀才可以用，否则牛奶变性，需要重新配制。同样，厌氧牛奶只能灭菌一次，反复灭菌牛奶会变性。
2、准备冷冻干燥用的安瓿管，管口要用棉花封住，棉花缠在牙签上，这样拔出比较方便，灭菌并烘干后备用。
3、新鲜菌液离心，尽量除去上清，根据菌量加入10 % 的厌氧牛奶，一般大拇指盖大小的菌体能做15-20支安瓿管左右。将菌体打散后，迅速分装到安瓿管中，每支安瓿管 0.2 ml，并用棉花封住管口，防止杂菌污染。
4、将分装好菌液的安瓿管竖直放置，可以用橡皮筋扎成捆，4℃ 冰箱预冷 30 min；然后-20 ℃ 预冷1 hour； -80 ℃ 预冷2 hours；最后放入真空干燥机，-80 ℃ 冷冻干燥过夜。冻干后菌体和牛奶混在一起，呈粉末状。
5、抽真空，封口，标记。封口后的安瓿管内呈真空状态，可在4 ℃保存。
6、活化：用镊子夹住安瓿管底部，另一端用酒精灯外焰灼烧30 Sec，在灼烧部位滴几滴水，玻璃会因突然受冷而出现裂痕。用另一支镊子敲打裂痕部位至玻璃破裂。迅速向安瓿管中通入N2，吸取0.5ml的培养基注入管中，轻轻搅动几下并放置1-2 min，待粉末溶解后，2-5% 接种量接入到培养基中。注意：培养基可能会因为牛奶变浑浊，要做好观察和记录，以判断菌株是否长出。
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回答时间： 17:17:23
厌氧菌的菌种保存，一般以下三种方法： 1。革蓝阳性芽孢杆菌可用蒸馏水低温保存。 2。革蓝阳性球菌或杆菌采用血液低温保存。-40度 3。冷冻干燥保存适用于所有厌氧菌。
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回答时间： 18:04:13
厌氧菌的菌种保存，一般以下三种方法： 1。革蓝阳性芽孢杆菌可用蒸馏水低温保存。 2。革蓝阳性球菌或杆菌采用血液低温保存。-40度 3。冷冻干燥保存适用于所有厌氧菌。
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回答时间： 21:02:44
冷冻干燥保存
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回答时间： 09:34:12
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回答时间： 10:03:04
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回答时间： 11:08:54
厌氧菌的菌种保存，一般以下三种方法： 1。革蓝阳性芽孢杆菌可用蒸馏水低温保存。 2。革蓝阳性球菌或杆菌采用血液低温保存。-40度 3。冷冻干燥保存适用于所有厌氧菌。
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，还可以通过厌氧颗粒污泥的快速培养技术及保活储存方法研究--《西北农林科技大学》2008年硕士论文
厌氧颗粒污泥的快速培养技术及保活储存方法研究
【摘要】：
在废水生物处理的实际生产中,应用于高效厌氧反应器的颗粒污泥培养速度较慢,从而导致升流式厌氧污泥床(UASB)、内循环(IC)等厌氧反应器从启动到稳定运行需要较长地时间,短者两三个月,长者甚至半年。本实验正是基于这个实际应用中遇到的难题,从三个方面展开实验研究工作。
首先从反应器的运行控制条件入手,研究污泥负荷这一运行参数在加快厌氧颗粒污泥培养过程中起到的作用,并总结出适合于颗粒污泥快速培养的参数范围。另外,对比研究了有机高聚物、惰性载体颗粒物、无机金属盐三大类颗粒化促进剂的各自典型代表物:聚丙烯酰胺(PAM)和壳聚糖(CHI)、颗粒活性炭(GAC)、氯化钙的促颗粒化效果,并查明它们对厌氧污泥的产甲烷毒性影响及污泥的活性恢复情况,并在此研究结果的基础上提出一种利用絮状厌氧活性污泥在反应器以外快速制备厌氧颗粒污泥的新工艺方法。最后,出于利用保活储存后的颗粒污泥启动反应器的考虑,研究了影响厌氧颗粒污泥活性的三个因素:含水率、温度、溶解氧,并根据影响结果研究总结出厌氧颗粒污泥保活储存的条件和方法。从这三方面的实验研究中得出了下面的结论:
(1)UASB中适宜的高污泥负荷有利于厌氧颗粒污泥的快速形成,当污泥负荷达到0.29-0.51kg COD/kgVSS·d时颗粒污泥开始大量出现和形成,这一污泥负荷范围最有利于颗粒污泥的快速形成。采用合适高污泥负荷的反应器R2中培育出的1mm以上颗粒污泥占污泥总量的42.4%,而低污泥负荷条件的反应器R1中这一比例仅为14%。两反应器培养出的颗粒污泥沉降性能较好,0.5mm以上的颗粒沉降速率为20-147m/h。较高的污泥负荷培养出的颗粒污泥VSS/TSS值也较大。
(2)综合分析受促进剂影响的累计产甲烷量和颗粒粒径分布情况,可得出四种促进剂促颗粒化效果的比较结果:作用效果最好的是聚丙烯酰胺,壳聚糖和颗粒活性炭效果次之,CaCl_2作用效果最弱。通过产甲烷毒性实验结果,可排序四种颗粒化促进剂对厌氧污泥的产甲烷毒性:颗粒活性炭壳聚糖氯化钙聚丙烯酰胺。通过活性恢复实验表明,浓度22ml/L的颗粒活性炭产生的抑制,污泥活性下降不能恢复;其余受试样的抑制为代谢毒素型抑制,活性可恢复。
(3)本文新提出的厌氧颗粒污泥制备工艺步骤为:预处理絮状厌氧活性污泥、添加聚丙烯酰胺絮凝反应、卧式螺旋离心机絮凝脱水、颗粒筛分、反应器中熟化培养。制备工艺过程没有对厌氧污泥的最大比产甲烷活性(SMA)造成较大损害,制备得到的厌氧颗粒污泥SMA较原料污泥提高了18%。絮凝反应和离心脱水工艺使粒径大于0.25mm的颗粒污泥达到污泥总量的一半,颗粒筛分工艺使1mm以上的颗粒组分由38%跃升至80%,熟化培养工艺使厌氧颗粒污泥趋向成熟。计算最终产率为:原料污泥中总污泥量35.7%的絮状污泥可转变成最终的粒径大于1mm厌氧颗粒污泥,总污泥量的17.8%可转变成粒径大于4mm的厌氧颗粒污泥。
(4)脱水颗粒污泥含水率高于80%时,污泥产甲烷活性受到的不利影响较小;短时间内处于好氧培养环境不会对厌氧颗粒污泥活性产生较大损害;35℃以下时温度越低产甲烷活性越低,影响显著,5℃可使厌氧颗粒污泥处于休眠状态。综合分析三个指标(保存后污泥SMA、短期恢复培养后污泥SMA、颗粒完整度保持情况),对不同保存方法的保存效果排序(由好到差):低温5℃脱水(含水90%)保存低温5℃未脱水保存室温脱水(含水90%)保存室温未脱水保存。低温5℃脱水保存和低温5℃未脱水保存效果比较理想,可以在实际生产中应用于厌氧颗粒污泥的保活储存。-16℃速冻保存不适合于厌氧颗粒污泥的保活储存。氧气的存在使颗粒污泥SMA值降低,所以隔氧保存措施是必要的,可采用抽真空或通入惰性气体(如甲烷)的方式隔氧。
【关键词】：
【学位授予单位】：西北农林科技大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：X703.1【目录】：
ABSTRACT6-11
第一章 文献综述11-27
1.1 高速厌氧反应器的发展概述11-16
1.1.1 厌氧反应器的发展历程11-12
1.1.2 UASB 反应器的结构和特性12-14
1.1.3 IC 反应器的结构和特性14-16
1.2 厌氧颗粒污泥的性质及形成机理16-22
1.2.1 厌氧颗粒污泥的性质16-19
1.2.2 厌氧颗粒污泥的形成过程与机理19
1.2.3 厌氧颗粒污泥形成的影响因素19-22
1.3 国内外加速厌氧污泥颗粒化的研究进展22-25
1.3.1 投加有机高聚物22-23
1.3.2 投加惰性载体颗粒物23-24
1.3.3 同时投加惰性载体颗粒物和有机高聚物24-25
1.3.4 添加金属无机盐25
1.3.5 高速搅拌法25
1.4 本课题的研究方向及意义25-27
第二章 污泥负荷对UASB 中厌氧颗粒污泥快速形成的影响27-35
2.1 实验装置与材料27-28
2.1.1 实验装置27
2.1.2 实验废水27-28
2.1.3 接种污泥28
2.2 实验方法28-29
2.2.1 反应器运行控制方法28
2.2.2 分析测试项目及方法28-29
2.3 结果与讨论29-33
2.3.1 反应器的运行过程29-31
2.3.2 颗粒污泥的粒径分布31
2.3.3 颗粒污泥形态特征31-32
2.3.4 VSS/TSS32-33
2.3.5 沉降性能33
2.4 污泥负荷影响颗粒污泥形成的机理初探33-34
2.5 本章小结34-35
第三章 不同类型污泥颗粒化促进剂作用效果比较研究35-48
3.1 实验装置与材料35-36
3.1.1 实验装置35
3.1.2 主要实验试剂35-36
3.1.3 实验废水36
3.1.4 接种污泥36
3.2 实验方法36-38
3.2.1 反应瓶填装设计36-37
3.2.2 促颗粒化比较试验37
3.2.3 产甲烷毒性试验方法37
3.2.4 分析测试项目及方法37-38
3.3 产甲烷毒性与产甲烷活性恢复试验结果与分析38-42
3.3.1 产甲烷毒性试验38-40
3.3.2 产甲烷活性恢复实验40-42
3.4 促颗粒化效果比较试验结果与分析42-46
3.4.1 累计产气量42-44
3.4.2 颗粒污泥粒径分布44-46
3.5 投加物促颗粒化作用机理分析46-47
3.6 本章小结47-48
第四章 利用厌氧絮状活性污泥制备厌氧颗粒污泥的新工艺48-55
4.1 实验材料与设备48
4.2 颗粒污泥制备工艺流程48-49
4.3 制备过程污泥颗粒粒径变化情况49-52
4.4 制备过程颗粒污泥产甲烷活性变化情况52-53
4.5 制备方法机理分析与探讨53
4.6 制备工艺效益分析53-54
4.7 本章小结54-55
第五章 厌氧颗粒污泥活性影响因素与保活储存方法研究55-73
5.1 实验材料55
5.2 实验方法55-57
5.2.1 颗粒污泥活性影响因素实验方法55-56
5.2.2 分析测试项目及方法56-57
5.3 厌氧颗粒污泥活性影响因素研究57-62
5.3.1 含水率对颗粒污泥活性的影响57-59
5.3.2 溶解氧对颗粒污泥活性的影响59-60
5.3.3 温度对颗粒污泥活性的影响60-62
5.4 厌氧颗粒污泥保活储存方法研究62-71
5.4.1 颗粒污泥自然保存62-64
5.4.2 颗粒污泥脱水保存64-66
5.4.3 保存后颗粒污泥的活性恢复测试66-67
5.4.4 保存方法对污泥颗粒完整度的影响67-69
5.4.5 氧气在厌氧颗粒污泥保存过程中产生的影响69-70
5.4.6 不同方法的综合保存效果比较70-71
5.5 本章小结71-73
第六章 结论与建议73-75
6.1 结论73-74
6.2 问题与建议74-75
参考文献75-81
作者简介82
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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库
朱邦辉;[D];南昌大学;2010年
【参考文献】
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