您所在位置： &
 &  & 
牛分枝杆菌tb0.4重组蛋白的克隆表达及生物活性研究.pdf54页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
文档加载中...广告还剩秒
需要金币：280 &&
牛分枝杆菌tb0.4重组蛋白的克隆表达及生物活性研究
你可能关注的文档：
··········
··········
摘要 牛结核病 bovine boy趣M Mycobacteriumboris 感染引起，可以通过吸入含菌的气溶胶或食用未经消毒的牛奶传染
给人。牛结核病的防治和彻底根除需要灵敏、有效的诊断方法，目前广泛应用的皮内变态反应试
验和IFN吖释放试验均依赖于PPD作为刺激源，存在检测特异性不高的缺陷。近年来，为了提高
检测的特异性，寻找PPD替代刺激源的研究成为了热点，通过比较致病性分枝杆菌和非致病性分
枝杆菌基因组，人们发现RD区摹因存在差异，因此RD区蛋白有望替代PPD用于区分致病性分
枝杆菌与非致病性分枝杆菌感染。 TBl0．4为牛分枝杆菌RD区蛋白，本研究根据AF2122-座机电话号码．4的基凶序列分别设计包含
Vailee 10．4．2 不
rTBl0．4-2以可溶性表达，rTBl0．4．3以包涵体形式表达，大小分别为30ku、30ku和12ku，与
理论值相符。用AKTAPurifier对可溶性蛋白纯化，用尿素对包涵体蛋白进行洗涤变性复性处理，
得到纯度超过90％的r，rBl0．4．1、rTBl0．4．2、rTBl0．4．3重组蛋白。 l 分别通过IFN吖释放试验、荧光定量PCR试验羽I豚鼠皮试试验二种方法检测TB0．4重组蛋
菌感染牛和3头健康牛。1 经颈静脉采集全血，肝素抗凝，分装于48孔细胞培养板中，以等摩
PPD作为刺激源，37℃培养20
量rTBl0．4一l、rTBl0．4．2、rTBl0．4．3、32a、疋E和牛PPD刺激6h，’限IZoL法提取PBMC总 h、48
进行重组蛋白与rCE等质量比混合后的皮试试验，在刺激24 h和72h分别测量各检测点
的皮肤肿胀部位直径。试验结果表明：重组蛋白rTBIOA能刺激lFN．YmRNA的转录和表达，因
白单独使用时无明显反应，与rCE混合应用时，在24h时可见与PP胁B刺激后类似的红肿变态
反应，表明在皮内变态反应时，可能需要几种或多种蛋白的协同作用。 通
正在加载中，请稍后...高中生物人教版里面有提到：提高植物的抗病能力可以通过DNA复制酶基因,蛋白质外壳基因.这两个不是加快病毒的复制么?
（1）病毒外壳蛋白基因：在植物中表达病毒外壳蛋白基因可以阻止病毒的侵染或症状的产生.病毒外壳蛋白的抗性机理：一种假说认为,当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后,它们立即被细胞中的自由病毒外壳蛋白所重新包裹,从而阻止了入侵病毒核酸的翻译和复制.在离体条件下,附加自由病毒外壳蛋白能够抑制末装配病毒的翻译的实验结果支持了上述假说；另一假说认为,抗性机制是在病毒外壳蛋白水平上抑制病毒脱壳,此说法最有力的证据是转基因植株可抗完整病毒的侵染．但不能抵御裸露病毒RNA的入侵；还有一种观点认为病毒外壳蛋白的抗性机制不是外壳蛋白在起作用,而可能是它的RNA转录物与入侵病毒RNA之间的相互作用（2）病毒复制酶基因：RNA病毒（如烟草花叶病毒）的复制酶是依赖于RNA的RNA聚合酶.病毒复制酶一般是在病毒核酸进入寄主细胞并结合到寄主核糖体之后形成的.在植物中表达不完整的病毒复制酶基因可以显著提高植物对病毒的抗性,作用机制还不十分清楚,可能与基因转录后沉默有关.
为您推荐：
其他类似问题
病毒分DNA，RNA，和朊病毒，提高植物抗病能力是说的通过基因工程导入能够产生抗病毒的蛋白质的基因。
扫描下载二维码布氏杆菌外膜蛋白D15的克隆表达及生物学活性分析--《中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集》2012年
布氏杆菌外膜蛋白D15的克隆表达及生物学活性分析
【摘要】：本实验通过PCR技术扩增牛型布氏杆菌外膜蛋白基因D15,将D15全长克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-D15,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下表达大小约为130Ku的融合蛋白His-D15。Western Blot检测结果表明,His-D15能与布氏杆菌阳性牛血清发生特异性反应,表明D15具有免疫原性。此外,对D15的亚定位结果表明,D15为膜蛋白;对His-D15的纤连蛋白结合活性及纤连蛋白溶酶原结合活性实验结果表明,His-D15具有纤连蛋白溶酶原结合活性,但不具有纤连蛋白结合活性。本研究通过对D15免疫原性及相关生物学活性的研究,为进一步研究D15在牛型布氏杆菌感染、诊断及亚单位疫苗的研制等方面的作用提供基础。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：S852.614【正文快照】：
布氏杆菌病(Brucellosis)是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种人兽共患慢性细菌性传染病,该病在世界范围内广泛流行并严重危害着人畜健康。布氏杆菌感染宿主后,在宿主的巨噬细胞内具有极强的繁殖能力[1-5],因其不具有经典的毒力因子且不能引起强烈的先天性免疫,因而给布氏杆菌
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【相似文献】
中国期刊全文数据库
张晓华,徐怀恕,RobertsonP,AustinB;[J];微生物学报;1997年06期
杨莉,吕华;[J];邯郸医学高等专科学校学报;2000年02期
林焕建,王继德,白杨,张亚历,周殿元;[J];中国微生态学杂志;2003年01期
高立慧,胡绪敬,徐丽;[J];中华微生物学和免疫学杂志;1997年06期
骆卫锋,胡志荣,赵凤兰,胡军,徐友梅;[J];河南医科大学学报;1999年02期
祁芝珍,于守鸿,祁美英,金丽霞,王秦宁,席亚芳,朱锦沁;[J];中国地方病学杂志;2002年06期
牛华,孙萍,周锡鹏,许金波;[J];中国输血杂志;2001年06期
王蓬勃;马悦;刘琴;张元兴;;[J];微生物学通报;2006年02期
;[J];微生物学免疫学进展;1994年02期
鱼艳荣,刘希成,张彦明,王晶钰;[J];动物医学进展;2000年02期
中国重要会议论文全文数据库
成进;谷文喜;李文蓉;沙依然古丽;依米提;;[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
刘燕;韦强;鲍国连;季权安;;[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
朱德康;程安春;汪铭书;;[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集[C];2004年
丁伯良;鄢明华;王英珍;李秀丽;黄金海;白朋勋;王东;张健;赵向华;;[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];2003年
林向民;张丹风;吴丽娜;王三英;彭宣宪;;[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
孙晓庆;韩先干;童永亮;宋军;丁铲;胡青海;于圣青;;[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
范泉水;邱薇;孙阳;李刚山;杨美峰;尹惠琼;李丽红;;[A];第十三次全国养犬学术研讨会论文集[C];2009年
徐常新;王三英;彭宣宪;;[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年
彭宣宪;;[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学学术大会论文集[C];2006年
郭晓雅;史皆然;邵成;师长宏;赵勇;吴昌归;;[A];中华医学会第七届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第三次大会论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库
北京友谊医院
北京房山中医医院
王艳芳;[N];中国医药报;2001年
叶依;[N];健康时报;2007年
江苏省滨海市睦邻开发区畜牧总站 张士权 江苏省滨海市睦邻开发区养殖基地 张闯;[N];河北科技报;2010年
山东省枣庄市山亭区
程洪花;[N];河北农民报;2006年
沈慧;[N];中国畜牧兽医报;2007年
北京兽药研究所
中青;[N];中国畜牧水产报;2001年
李大刚;[N];中国畜牧兽医报;2007年
;[N];湖北科技报;2006年
傅德明;[N];中国医药报;2004年
河北省畜牧兽医服务中心
王银钱;[N];河北科技报;2006年
中国博士学位论文全文数据库
王方昆;[D];中国农业科学院;2011年
邹凌云;[D];国防科学技术大学;2008年
赵燕;[D];四川大学;2004年
栗冬梅;[D];中国疾病预防控制中心;2009年
王斌;[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
董妍玲;[D];中国科学院研究生院（水生生物研究所）;2007年
王玉飞;[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
张丹凤;[D];厦门大学;2007年
张会东;[D];四川大学;2006年
王远志;[D];石河子大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库
顾宏伟;[D];南京农业大学;2004年
徐瑾;[D];郑州大学;2005年
王斌;[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
方夏云;[D];四川农业大学;2009年
赵飞骏;[D];南华大学;2005年
曾凤英;[D];浙江大学;2002年
梁昊宇;[D];中国药品生物制品检定所;2006年
张振华;[D];四川农业大学;2008年
张洪华;[D];厦门大学;2008年
臧大鹏;[D];山东农业大学;2008年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号小木虫 --- 500万硕博科研人员喜爱的学术科研平台
&&查看话题
求助设计一种克隆方法
& && &&&刚刚接手一个新课题，要克隆来源于一种植物的一段基因到宿主里面，但是这个植物没有被测过序，基因序列也不知道，只知道该基因编码蛋白N端的10个氨基酸序列和蛋白质的分子量大小(前人的工作)，新手第一次发帖，金币不多，大恩不言谢。
P.S：我个人认为应该要通过mRNA弄RT-PCR，但是这个引物不好设计啊，该怎么办呢？
打的肽指纹谱
能说具体一点吗
用已知的肽段设计简并引物，以cDNA为模板，扩增中间片段，测序后设计RACE引物，做RACE，得到全长。
那你这个引物当初是如何设计的呢？
研究生必备与500万研究生在线互动！
扫描下载送金币猪干扰素诱导蛋白IP-10和Mx1克隆、表达及生物活性检测--《山东农业大学》2011年硕士论文
猪干扰素诱导蛋白IP-10和Mx1克隆、表达及生物活性检测
【摘要】：研究表明,干扰素的众多生物学功能是通过其诱导的多种效应蛋白质来实现的。为了进一步研究干扰素抗病毒机理和研发抗病毒重组生物药物,本实验选取干扰素诱导产生的蛋白质中的两个——IP-10蛋白和Mx1蛋白进行研究。
1.猪干扰素诱导蛋白10(IP-10)的克隆表达及免疫活性检测
为了研究重组猪IP-10蛋白的生物学功能和对疫苗免疫活性的影响,采用反转录-聚合酶链式反应RT-PCR的方法从猪脾脏组织中扩增猪IP-10基因,分别克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和真核表达载体pcDNA3.1/V5-HisA。将原核表达质粒pGEX-IP-10转化到大肠杆菌株DH5α中,并用IPTG于37℃诱导培养获得表达,以纯化的蛋白做免疫原免疫小鼠,制备出抗IP-10蛋白的阳性血清。将真核表达质粒pcDNA3.1-IP-10转染至HEK293T细胞后,24h后经间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(western blot)检测IP-10的表达。体外微室跨膜迁移实验检测HEK293T细胞表达的IP-10产物对脾淋巴细胞的趋化活性,并将有活性的蛋白作为佐剂和疫苗一起免疫动物,测定其对疫苗免疫的调节作用。
结果显示,双酶切鉴定和核酸序列分析证实pGEX-IP-10和pcDNA3.1-IP-10表达质粒构建成功。免疫小鼠产生的阳性血清稀释到1:10万时A450的值大于未免疫小鼠血清的A450的值即P/N2.1,说明显示免疫小鼠产生了抗猪IP-10蛋白的抗体即得到了抗IP-10蛋白的高免血清。真核表达质粒转染HEK293T细胞后,IFA能够检测到IP-10蛋白的表达,Western blotting显示表达的融合蛋白分子量约为17KD。体外微室跨膜迁移实验和动物实验证明重组IP-10蛋白对猪脾淋巴细胞具有趋化活性,且能产生一定的免疫增强作用。
2.猪Mx1基因的克隆与真核表达
根据已发表的Mx1蛋白的cDNA基因序列,设计一对特异性引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7小时的PK15细胞的总RNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK15细胞系Mx1 cDNA序列中3’端缺失的11bp,成功获得Mx1蛋白完整基因的克隆。构建了重组真核表达质粒pRetroQ-sMx1,转染HEK293T细胞并表达Mx1蛋白,绿色荧光检测和免疫印迹(western blot)检测重组蛋白的表达,然后利用微量细胞病变抑制法测定其抗病毒活性。
结果显示,双酶切鉴定和核酸序列测定证实pRetroQ-sMx1真核表达质粒构建成功,转染HEK 293T细胞后,能够检测到绿色荧光,Western blotting证实为目的蛋白。微量细胞病变抑制法测定重组蛋白具有一定的抗VSV及PRRSV的活性。结果表明,重组Mx1具有一定的抗病毒活性。
【关键词】：
【学位授予单位】：山东农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2011【分类号】：S852.4【目录】：
中文摘要9-11
ABSTRACT11-13
1 前言13-29
1.1 IP-10 基因及蛋白13-18
1.1.1 IP-10 蛋白的结构13-14
1.1.2 IP-10 的表达14
1.1.3 IP-10 的受体CXCR314-15
1.1.4 IP-10 趋化作用的信号转导机制15
1.1.5 生物学功能及意义15-18
1.1.5.1 在炎症反应中的作用15-16
1.1.5.2 抗病毒免疫16-17
1.1.5.3 抑制血管新生和抗肿瘤作用17-18
1.1.5.4 其他18
1.2 Mx 基因及其蛋白18-29
1.2.1 Mx 蛋白的分子结构18-19
1.2.2 Mx 蛋白抗病毒机理19-22
1.2.3 人及不同动物的Mx 基因和蛋白22-23
1.2.4 猪Mx 蛋白的研究状况23-24
1.2.5 Mx 蛋白的表达及调控24-25
1.2.6 Mx 蛋白的生物工程25-26
1.2.6.1 原核表达系统25
1.2.6.2 真核表达系统25-26
1.2.6.3 Mx 基因的转基因表达26
1.2.7 Mx 蛋白与临床应用的关系及其展望26-29
1.2.7.1 Mx 蛋白表达与病毒感染26-27
1.2.7.2 Mx 蛋白与抗-IFN 中和抗体(neutralizingantibodies，NAb)27
1.2.7.3 Mx 基因与单核苷酸多态性27-28
1.2.7.4 Mx 蛋白的应用和展望28-29
2 材料与方法29-51
2.1 试验材料29-33
2.1.1 菌株、细胞29
2.1.2 载体29
2.1.3 主要试剂及试剂盒29
2.1.4 主要仪器29
2.1.5 试验所用溶液及其配制29-33
2.2 试验方法33-51
2.2.1 IP-10 基因的克隆33-35
2.2.1.1 设计引物33
2.2.1.2 组织RNA 的提取33
2.2.1.3 IP-10 基因的RT-PCR 扩增33-35
2.2.1.4 IP-10 基因片段PCR 产物的纯化回收35
2.2.2 目的基因的连接、转化及鉴定35-38
2.2.2.1 目的基因与pMD18-T 载体的连接体系35
2.2.2.2 大肠杆菌感受态细胞（E.coli DH5α）的制备35-36
2.2.2.3 连接产物转化36
2.2.2.4 重组质粒DNA 的提取36-37
2.2.2.5 重组质粒的鉴定37
2.2.2.6 阳性克隆序列测序37-38
2.2.3 阳性血清的制备38-44
2.2.3.1 IP-10 基因片段的回收38
2.2.3.2 原核表达载体质粒pGEX-6p-1 的回收38-39
2.2.3.3 原核表达载体重组质粒的构建和鉴定39
2.2.3.4 诱导物浓度选择39
2.2.3.5 表达蛋白存在形式确定39
2.2.3.6 重组蛋白的诱导表达39-40
2.2.3.7 包涵体的分离与纯化40
2.2.3.8 包涵体的复性40-41
2.2.3.9 GST 融合蛋白的纯化及特异性测定41-42
2.2.3.10 重组蛋白免疫小鼠42-43
2.2.3.11 检测三免后血清抗体效价43-44
2.2.4 IP-10 蛋白的表达44-46
2.2.4.1 引物设计及PCR 扩增44
2.2.4.2 纯化的目的基因和pcDNA3.1/V5HisA 载体的双酶切44
2.2.4.3 真核表达载体重组质粒的构建和鉴定44
2.2.4.4 重组质粒pcDNA3.1-IP-10 的提取44-45
2.2.4.5 真核表达载体的转染45
2.2.4.6 IFA 检测猪重组IP-10 蛋白的瞬时表达45
2.2.4.7 表达的重组IP-10 蛋白的Westernblot 鉴定45-46
2.2.5 表达IP-10 蛋白的活性试验46-47
2.2.5.1 微室跨膜迁移实验检测表达的重组IP-10 蛋白的趋化活性46-47
2.2.5.2 重组IP-10 蛋白免疫佐剂活性试验47
2.2.6 pRetroQ-sMx1 重组质粒的构建47-49
2.2.6.1 Mx1 蛋白的诱导47-48
2.2.6.2 细胞总RNA 的提取及RT-PCR48
2.2.6.3 RT-PCR48-49
2.2.6.4 回收的PCR 产物与克隆载体pMD18-T DNA Vector 的连接49
2.2.6.5 缺失基因的修复49
2.2.6.6 pRetroQ-sMx1 重组质粒的构建与鉴定49
2.2.7 pRetroQ-sMx1 重组蛋白的表达49-50
2.2.7.1 重组质粒转染HEK293T 细胞和荧光检测49-50
2.2.7.2 重组蛋白的表达与Western blotting 检测50
2.2.8 细胞病变抑制试验50-51
2.2.8.1 VSV-CEF 细胞病变抑制试验50-51
2.2.8.2 PRRSV 在MARC-145 细胞病变抑制实验51
3 结果与分析51-60
3.1 IP-10 基因的克隆51-52
3.2 原核表达载体的构建结果52
3.3 原核表达重组质粒在大肠杆菌中的表达结果52-53
3.4 表达IP-10 蛋白的Westen-blot 结果53
3.5 间接ELISA 方法测定鼠血清的抗体水平53
3.6 真核表达质粒pcDNA3.1-IP-10 的构建与鉴定53-54
3.7 质粒pcDNA3.1-IP-10 瞬时表达的IFA 检测54
3.8 纯化的IP-10 融合蛋白的Western blotting 检测54-55
3.9 重组IP-10 蛋白趋化活性的检测55
3.10 重组IP-10 蛋白免疫佐剂活性试验结果55-56
3.11 Mx1 基因的RT-PCR 扩增56
3.12 克隆质粒pMD-sMx1 的酶切鉴定56-57
3.13 重组表达质粒pRetroQ-sMx1 的构建与鉴定57
3.14 重组质粒pRetroQ-sMx1 瞬时表达的检测57-58
3.15 表达蛋白的Western Blotting 检测58
3.16 抗病毒活性试验58-60
3.16.1 鸡胚成纤维细胞-水疱性口炎病毒系统上测定表达产物的抗病毒作用58-60
3.16.2 MARC-145 细胞-猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)系统上测定表达产物的抗病毒作用60
4 讨论60-63
5 结论63-64
参考文献64-73
研究生期间发表论文76-77
硕士学位论文内容简介及自评77
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式
【参考文献】
中国期刊全文数据库
吴妹英;;[J];国外医学(微生物学分册);2001年01期
周钢;[J];国外医学(免疫学分册);2004年04期
程德云,陈文彬,颜浩;[J];四川医学;1998年06期
喻三红,熊思东;[J];生命的化学;2002年05期
吴圣龙;包文斌;鞠慧萍;陈国宏;李碧春;程金花;朱国强;;[J];遗传;2007年06期
谭复善;李文超;崔雷;刘丹;秦红刚;孟庆文;;[J];中国预防兽医学报;2009年05期
杨秀利;储以微;邓富刚;熊思东;;[J];中国免疫学杂志;2006年02期
;[J];World Journal of G2005年30期
中国博士学位论文全文数据库
李刚;[D];四川大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库
李晓丽;[D];华中农业大学;2005年
【共引文献】
中国期刊全文数据库
牛永东,许丽艳,李恩民;[J];癌变.畸变.突变;2003年01期
刘烈刚,刘恭平,姚平,郝丽萍,杨雪峰,孙秀发,朱清华;[J];癌变.畸变.突变;2003年03期
安兰敏,杨军,徐兵;[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
李涛,石年,吴又桐,周丽,董洁,王素青,陈亮;[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
连京华,秦卓明,黄波;[J];山东农业科学;2000年01期
钱凤芹,刘长梅,任红梅,李爱芹,庄文忠;[J];山东农业科学;2001年03期
东野传现;史玉颖;黄中利;刘玉山;亓丽红;傅剑;;[J];山东农业科学;2007年02期
李子剑;李云龙;陈苏;艾武;宋敏训;李玉峰;;[J];山东农业科学;2008年03期
史冬燕;程在全;;[J];安徽大学学报(自然科学版);2009年03期
中国重要会议论文全文数据库
张浩;;[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
田永强;张荣意;朱中元;;[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
庄金秋;梅建国;沈志强;;[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
庄金秋;梅建国;沈志强;;[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集（下册）[C];2011年
梁权;毛培菊;罗春贞;王缦;;[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
朱勤勋;严雪;韩友斌;;[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
李新民;党琦;;[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库
赵冬敏;[D];山东农业大学;2010年
赵鹏;[D];山东农业大学;2010年
刘栋;[D];山东农业大学;2010年
张青婵;[D];山东农业大学;2010年
王庆莲;[D];山东农业大学;2009年
郭爱疆;[D];甘肃农业大学;2010年
宋翠平;[D];中国海洋大学;2010年
郑小坚;[D];苏州大学;2010年
王发明;[D];福建农林大学;2010年
黄馨;[D];北京协和医学院;2010年
中国硕士学位论文全文数据库
韩秀萍;[D];华中农业大学;2010年
许媛媛;[D];华中农业大学;2010年
余姣姣;[D];华中农业大学;2010年
李爽;[D];华中农业大学;2010年
张先波;[D];华中农业大学;2010年
黄潘;[D];华中农业大学;2010年
徐珊珊;[D];华中农业大学;2010年
胡智斌;[D];华中农业大学;2010年
王萍萍;[D];华中农业大学;2010年
曹晶;[D];南京医科大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
段子渊;[J];黄牛杂志;1999年05期
钟金城;[J];草食家畜;1997年01期
李西峰,吴庆鹉;[J];山东畜牧兽医;1995年03期
熊远著;[J];中国工程科学;2000年09期
杨景培;[J];广东畜牧兽医科技;1999年01期
施启顺;[J];国外畜牧科技;1999年04期
唐国庆,王金勇,李学伟;[J];中国畜牧兽医;2002年06期
刘剑锋,王立贤,张沅,苏振环;[J];中国畜牧兽医;2003年05期
张祖兴;李明云;陈炯;邬勇;;[J];海洋与湖沼;2006年04期
卿柳庭,袁宗辉;[J];华中农业大学学报;2001年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
李刚;江元森;Jenny L CLynda TEric DA D'STony R C姚集鲁;Berwyn E C;[J];世界华人消化杂志;2002年08期
周爱民,杨开宇;[J];科学通报;1986年16期
毛明光;刘宗柱;张培军;;[J];海洋科学;2008年02期
;[J];遗传学报;1977年04期
李刚,田聆,魏于全,文艳君,肖飞,姚兵,张伶,张汝,梅开;[J];生物医学工程学杂志;2005年03期
李洲，范启修;[J];生物化学与生物物理进展;1994年05期
陈国栋,刘玉兰;[J];中华肝脏病杂志;2005年01期
陈国栋,刘玉兰;[J];胃肠病学和肝病学杂志;2004年03期
赵菁;陈建明;邱明;应奇才;;[J];杭州师范大学学报(自然科学版);2009年05期
喻三红,熊思东;[J];生命的化学;2002年05期
中国重要会议论文全文数据库
田青云;张燕君;杜一;曹慧仁;孔维华;;[A];中国生理学会2007年消化内分泌生殖学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
楼叶江;潘晓蓉;贾培敏;张长林;许桂平;童建华;;[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
张伟;徐荣臻;张旭照;于晓方;;[A];2008年浙江省病理学学术年会论文汇编[C];2008年
周伟强;宋今丹;;[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
孙成三;蔡贞;陈立南;陈晴;张进禄;于恩华;徐群渊;;[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
贺宇飞;张桂梅;冯作化;;[A];湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编[C];2004年
傅佳鹏;吴其恺;;[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
石小玉;李克强;饶泽昌;李文林;赵林;;[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
戴莹;胡俊;陈晓;王璐璐;董长垣;;[A];2006年度学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
严建良;郑敏;;[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库
;[N];医药经济报;2001年
;[N];农村医药报（汉）;2007年
开封县范村乡许墩兽医站
李明臣;[N];河南科技报;2007年
何春权;[N];光明日报;2001年
王伟;[N];石家庄日报;2005年
北京兽药研究所副研究员
支海兵;[N];中国畜牧水产报;2000年
月光;[N];广东科技报;2000年
;[N];中华工商时报;2002年
本报记者 董映璧;[N];科技日报;2003年
张蕾;[N];科技日报;2001年
中国博士学位论文全文数据库
李进让;[D];中国协和医科大学;1995年
陈粤;[D];厦门大学;2004年
鲁重美;[D];中国协和医科大学;1994年
王珍;[D];中国医科大学;2007年
应松成;[D];浙江大学;2007年
高波;[D];复旦大学;2008年
梅开;[D];四川大学;2005年
娜日苏;[D];中国农业科学院;2010年
王笑丹;[D];广州中医药大学;2011年
孟醒初;[D];吉林大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库
赵协;[D];山东农业大学;2011年
陈蕾;[D];山东农业大学;2006年
安佳佳;[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
胡美容;[D];扬州大学;2012年
崔少强;[D];复旦大学;2007年
苗亮;[D];中国医科大学;2009年
王冬;[D];中国医科大学;2010年
康安定;[D];中南大学;2007年
贺育兰;[D];中南大学;2008年
苏娟;[D];广东工业大学;2011年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号
