12g样品一般需要多少硅胶量和样品量（粗分）

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-03-12 05:29 标签： 硅胶量和样品量
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保存至快速回贴使用硅胶柱层析的硅胶分离同样的样品,洗脱结束后,可以在此硅胶柱上继续上样吗?能重复上样几次
实验室实在没条件,我觉得可以重复使用的,但是在使用前我觉得应该用极性高于洗脱液极性的洗脱剂清洗,好洗脱上次样品中的杂质.
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硅胶柱层析样品与装柱硅胶的比例
一直纠结装柱应该用多少硅胶，一般小柱子装的硅胶量是样品伴完硅胶后总重的15倍，但是大柱子如果加太多硅胶跑可能会比较慢，而且死吸附多，不知道一般装大柱子用多少硅胶好。
20cm会不会太少，我说的大柱子是指直径10cm左右的那种哦。
应该要有个径高比吧，我的样品可能有100多g，柱子可能得用直径10cm左右的。12cm肯定太小。
100多g用直径10cm的柱子是不是有点小啊。
100g是指伴完样后的，实验室只有9cm的和12cm柱子，因为跑了几次，感觉大柱子要是加太高的话东西可能不好出来，所以想是不是能弄短点，知道那个样品和上柱硅胶的比例
那你样品也就不到50g吧。12cm柱高可以。8cm有点太短了，不比几百毫克的。你要是就一个点，就冲个柱子8cm也够了
我准备7倍左右，上个9厘米直径的柱子
话说，我们实验室拌硅胶量都是样品质量的两倍，装柱的话是拌好样的硅胶体积的3到5倍，我们公司都是这样做的
我觉得还差不多是这样，也有同学说装柱是拌好样后的7到10倍，但由于我大柱子只能算粗分，不想装太多硅胶，免得跑太慢了，所以想用少一点。
也不能太少了，不然东西很容易过交叉的，按之前说得那个比例差不多了，我过的个100多克的柱子就是那样搞得
嗯，我觉得也是
嗯，细分确实要多一点。
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【求助】硅胶柱分离效果差
查看完整版本请点击这里：
最近打算用硅胶柱粗分一批石油醚萃取的样品。点板选择洗脱剂时发现除了前面几个点外 后面的点拖尾严重，后来加了几滴氨水拖尾现象不明显了。
点板确定梯度洗脱剂极性后，先试了几根小柱子，感觉分离效果不怎么理想，条带总是弥散的。分出来的组分点板也交叉严重。
是不是洗脱的时候在洗脱剂里也要加些氨水或者三乙胺才行？ 过了很多次感觉分离效果都好差，希望大虾给点建议或者改进的方法。查看完整版本请点击这里：
tianmei001 ( 11:07:18)
QUOTE:原帖由 shenkunjie 于
11:06 发表
首先你要注意了，考察一下加氨水是否会对你的目标成分有影响；另外，拖尾严重一般可选择加少量的酸，拖尾还是严重的话，你得选择换溶剂系统。
想学习一下，什么时候需要加点氨水呢？我们这边一般都加酸的，化合物偏碱性？
shenkunjie ( 11:07:42)
QUOTE:原帖由 tianmei001 于
11:07 发表
想学习一下，什么时候需要加点氨水呢？我们这边一般都加酸的，化合物偏碱性？
我做了3年天然药物分离纯化 从未加入氨水。
feima+ ( 11:08:48)
QUOTE:原帖由 shenkunjie 于
11:06 发表
首先你要注意了，考察一下加氨水是否会对你的目标成分有影响；另外，拖尾严重一般可选择加少量的酸，拖尾还是严重的话，你得选择换溶剂系统。
现在用的是石油醚乙酸乙酯体系。点板的时候加酸还是会拖尾，加碱会好点。要是换溶剂体系的话，用石油醚丙酮体系可以吗？
feima+ ( 11:09:36)
QUOTE:原帖由 shenkunjie 于
11:07 发表
我做了3年天然药物分离纯化 从未加入氨水。
那加三乙胺呢？我做的是未知产物，文献介绍有挥发油类，酚酸类物质。用硅胶柱应该可以分开的，但洗脱的时候柱子条带拉的很长，后来整个柱子都是一个颜色了。什么原因可以引起这种情况呢？洗脱剂体系不对，还是硅胶的问题呢？最初过柱子硅胶在110℃活化半小时，后来有的说可以不用活化直接用，那种用着好些呢？
刚接触这方面的好多都不太懂，希望高手可以多给点建议。
dodoit ( 11:10:29)
QUOTE:原帖由 feima+ 于
11:09 发表
那加三乙胺呢？我做的是未知产物，文献介绍有挥发油类，酚酸类物质。用硅胶柱应该可以分开的，但洗脱的时候柱子条带拉的很长，后来整个柱子都是一个颜色了。什么原因可以引起这种情况呢？洗脱剂体系不对，还是硅胶的问题呢？最初过 ... 试试氯仿-甲醇体系。
feima+ ( 11:11:39)
QUOTE:原帖由 dodoit 于
11:10 发表
试试氯仿-甲醇体系。 石油醚萃取的组分，用氯甲体系是不是极性过大了。现在氯仿不好买，用二氯甲烷可以代替吧。
dodoit ( 11:12:05)
QUOTE:原帖由 feima+ 于
11:11 发表
石油醚萃取的组分，用氯甲体系是不是极性过大了。现在氯仿不好买，用二氯甲烷可以代替吧。 分离之前，你应该用小板先预摸一下分离情况和Rf值，才决定是否上柱分离。也不一定要用硅胶层析柱，尝试下用凝胶色谱。
zzzz ( 11:12:34)
再洗脱剂中加入千分之一的氨水，否则好像样品会吸附在柱子上，导致样品浪费。柱子装的长些，慢慢加流动相的比例。
feima+ ( 11:12:49)
QUOTE:原帖由 zzzz 于
11:12 发表
再洗脱剂中加入千分之一的氨水，否则好像样品会吸附在柱子上，导致样品浪费。柱子装的长些，慢慢加流动相的比例。 现在准备换其他洗脱体系试下，谢谢啦。
nn255 ( 11:13:21)
那加三乙胺呢？我做的是未知产物，文献介绍有挥发油类，酚酸类物质。用硅胶柱应该可以分开的，但洗脱的时候柱子条带拉的很长，后来整个柱子都是一个颜色了。什么原因可以引起这种情况呢？洗脱剂体系不对，还是硅胶 ...
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柱子不要只看颜色，要看tlc板。而且你如果不确定加酸还是加碱，那就拿三个展缸，一个加酸一个加碱一个什么都不加去展开去，一定要同时展开，你再对比一下就都清楚了。此外展开剂中要是没有水的话加碱我建议加三乙胺。而且走柱子的洗脱剂最好和小板摸好的条件一致，比如小板加酸了，走柱也加酸。
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硅胶柱层析，过成大波浪
过硅胶柱分段，应该是柱材没压紧实和样品含水导致有段时间柱子堵了，所以走梯度分离时，发现分离出来的效果是大波浪。
现在打算多走极性小的溶剂试试。求教好的补救措施≥﹏≤交叉的太厉害，柱子就等于白过了吧
是干法装的。样品和硅胶1：1.2比例拌样，用来做分离的硅胶和拌样硅胶比例2：1，用的所有溶剂都用无水硫酸钠脱水。装好柱后加了保护硅胶，保护硅胶上又加了无水硫酸钠。
柱子堵了，正好在拌样品的硅胶层。分析是拌样后没干燥后就装柱了
过着或者柱子出现了气泡，就是您说的我贪图加快实验速度没做好准备工作，没把它们抽紧实了
你好，有哪些相关的关于柱层析方面的书推荐的吗？
请问正丁醇部位，湿法装的柱，出现了交叉，怎么办呢？样品没有了
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