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ctab法提取dna
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【名师一号】学年高中生物 DNA粗提取与鉴定双基限时练 新人教版选修1
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DNA粗提取与鉴定 一、选择题 1.在提取DNA的过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是(
) A.不易破碎
B.减少DNA的损失 C.增加DNA的含量
D.容易刷洗 解析 由于玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。 答案 B 2.DNA粗提取实验中0.14 mol/L的NaCl溶液的作用是(
) A.溶解含DNA的核物质 B.使DNA分子析出 C.进行DNA鉴定 D.保持DNA分子的完整性 解析 DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,故在操作过程中稀释NaCl溶液至0.14 mol/L,以使DNA分子析出。 答案 B 3.某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是(
) A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 解析 在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行轻缓搅拌和研磨,而不能用力快速,这样会加快DNA的断裂,A项错;对于过滤后的研磨液中的DNA仍需用蛋白酶处理纯化,B项正确;加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌以防止破坏DNA,C项正确;加入二苯胺摇匀后要在沸水浴中加热进行鉴定,D项正确。 答案 A 4.在混合物中提取DNA分子的基本思路是(如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒,如何去除DNA? - 实验交流 - 生物秀
标题: 如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒,如何去除DNA?
摘要: [如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒,如何去除DNA?] 转基因植物(transgenic plant)鉴定需提取微量的DNA,植物微量提取DNA用到小的塑料研磨棒,如果想重复利用,为防止污染,如何完全去除DNA?我们是水清洗加酒精清洗,但清洗很难保证完全去除,湿热灭菌好像只能使其变性,使用酶用量多又太贵。大家去除DNA都有什么高招呀? 关键词:[研磨 电泳 转基因 缓冲液 氢氧化钠 降解 液氮]……
转基因植物(transgenic plant)(transgenic plant)鉴定需提取微量的DNA,植物微量提取DNA用到小的塑料研磨棒,如果想重复利用,为防止污染,如何完全去除DNA?我们是水清洗加酒精清洗,但清洗很难保证完全去除,湿热灭菌好像只能使其变性,使用酶用量多又太贵。大家去除DNA都有什么高招呀?回复我们实验室用这些,一般清水洗了,干了就能用了或者湿灭一下。不过目前大家都开始用机器提取了。回复氢氧化钠泡一会,让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。回复我们有大量的转基因苗要鉴定,小塑料棒清水洗了干了再用存在风险,很有可能会出现弱的目的条带,形成交叉污染。我们有机器提取血液DNA的,但没有试过提取植物的,可能是因为样少,需要液氮研磨,机器也不理想。回复
氢氧化钠泡一会,让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE缓冲液中跑2个小时电泳。DNA就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。 谢谢 你的方法是比较彻底 但太复杂了 一次性使用相对这么处理还更划算了回复如果你的研磨棒不是塑料的就好了,我的是陶瓷的,我用酒精烧,很方便也很彻底回复我觉得洗洗然后冲冲后,用酒精灯稍微烤会,注意别化了,就可以吧,都变性了回复1%
泡过夜,酒精梯度洗到水里,湿灭。回复那些本来就是哟次性的啊回复
氢氧化钠泡一会,让DNA变性并且带上足够的负电。同时RNA会降解。然后TBE中跑2个小时电泳。就会离开研磨棒。再用DEPC水冲洗。 我们是提拟南芥(Arabidopsis thaliana)的,如果只是用来鉴定转基因苗,用机器粗提就可以了,我们实验室也每天都在做转基因苗的鉴定,没什么问题的。用不着液氮。那样工作量太大了,太慢了回复恩 拟南芥(Arabidopsis thaliana)是可以不用液氮。
直接取几平方毫米叶子也可以进行PCR 但水稻(Rice)不行回复想立刻用?
用酸浸泡,然后再水冲洗,皆可~回复亲啊,,你们的塑料研磨棒是从哪里订的呀??拜托了~~3Q!!!回复
亲啊,,你们的塑料研磨棒是从哪里订的呀??拜托了~~3Q!!! 网上搜索“提取 研磨棒”就能出来好多。
我们的是采购部门提供的,具体哪买的不清楚回复不知道放入超声波振荡机里用洗衣粉或者洗洁净水振荡一个小时是否可行,要么干脆高温高压灭菌
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DNA的粗提取与鉴定
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高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
16:37:18 来源:网络整理
为了帮助学生们了解高中学习信息,爱智康分享了高二生物重要实验:DNA的粗提取与鉴定,供您参考!
考点提示:
(1)鸡血能用猪血代替吗?为什么?不能,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核,不能提取DNA。
(2)鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?
防止血液凝固;因为上清液是血浆,不含细胞和DNA。
(3)胀破细胞的方法?能用生理盐水吗?
向血细胞中加入蒸馏水,使细胞大量吸水而胀破;不能用生理盐水,因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。
(4)该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯?为什么?最好用塑料烧杯,因为玻璃烧杯容易吸附DNA。
(5)前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?
第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。
(6)若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么?第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布。
(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?
第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度,有利于DNA有析出。
(8)实验中搅拌溶液时,为何总要沿一个方向搅拌?防止DNA分子受到损伤。
(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?
第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液。
(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?
第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液,第三次用的是0。015mol/L(或2mol/L)的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0。14mol/L时,DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0。015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。
(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?
其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色,另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。
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