九条带的maker依次大小都是多少？跑page凝胶电泳跑dna时候用的maker

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-06-09 08:19 标签： 电泳maker
MAKER总是跑不好，求助各位高手帮忙(电泳,琼脂糖凝胶电泳,电泳条件,条带) - PCR实验 - 生物秀
标题: MAKER总是跑不好，求助各位高手帮忙(电泳,琼脂糖凝胶电泳,电泳条件,条带)
摘要: [MAKER总是跑不好，求助各位高手帮忙(电泳,琼脂糖凝胶电泳,电泳条件,条带)] 我是刚刚开始学习pcr的，也是刚学会琼脂糖凝胶电泳，跑了前后能有两个星期的电泳，但是几乎每次的maker都有问题（条带不是长条的而是带弧度？），希望各位高手帮我看看！不胜感谢！！我的电泳条件是1 2％，100V，30min
关键词:[琼脂糖凝胶电泳 电泳 条带 电泳条件]……
我是刚刚开始学习pcr的，也是刚学会琼脂糖凝胶电泳，跑了前后能有两个星期的电泳，但是几乎每次的maker都有问题（条带不是长条的而是带弧度？），希望各位高手帮我看看！不胜感谢！！我的电泳条件是1.2％，100V，30min
回复为什么总是弯的，不是资料上面很好看的长条形状的呢？？？？？回复你把你配的琼脂糖凝胶的配方写出来的。问题有可能出来配方上。回复25ml的0.5倍TBE缓冲液＋0.3g琼脂，微波炉加热，沸腾三次，液体都澄清了凉置，差不多50度时候加入EB，然后倒胶。这个方法是实验室人教我的，他们之前也是这么做的，但是没有出现这种情况，我还请他们帮我加过MAKER，但是还是有这种问题。。。回复应该是胶凝的不好，延长凝胶的时间试试。回复这个的胶我室温凝了有3个小时才跑的电泳呢。回复我以前也做过，用的是0.6%的琼脂糖。只有做胶回收时才用1.0%的。0.6%的是沸腾溶解后每100ml加入5ul的EB。每次用前凝一个小时就可以了。没发生过楼主说的这种情况。回复是不是电泳电压太大了的原因回复25ml的0.5倍TBE缓冲液＋0.3g琼脂，微波炉加热，沸腾三次，液体都澄清了凉置，差不多50度时候加入EB，然后倒胶。这个方法是实验室人教我的，他们之前也是这么做的，但是没有出现这种情况，我还请他们帮我加过MAKER，但是还是有这种问题。。。把TBE重新配一遍吧。还有电泳用的TBE也换一次。通常电泳图飘是因为某种原因引起了染料的跑动速度不一致。而这种原因，1. 配凝胶的时候，没有用TBE或TAE缓冲液 而误加了水2. 胶没有凝好3. 电泳槽里面的时间过久，变脏了，有乱七八糟的东西在里面。等等。这些是几个可能的原因。请参考。回复谢谢各位帮忙，我会把各位提的意见好好整理一下，逐一改进试验的^_^回复我最近也出现这种现象了啊我摸索了一下，好险降低电压会好一点！80V试试看！回复我有时也会遇到这个问题，尤其是高分子的marker条带会变成U形，低分子量的还比较整齐，我用的是GelRed作为EB的替代物，不知道会不会是染料的问题，请高手指教！谢谢！回复
1、首先检查 一下buffer 系统有没有问题，我常用1X TBE从来没有出现过问题，配方如下2、0.6g胶与70ml TBE在加热瓶中混合好，注意瓶盖不要太紧，微波炉加热4分钟后约20ml水分蒸发掉，可制成1.2%胶。3、预先在一200ml量杯内加一滴TBE液并加入4.5ul 10mg/ml EB，将加热后的胶与EB手摇充分混匀，千万注意要在通风的hood里进行，不要吸入气体。4、迅速倒入制胶槽内，用干净的tip头将气泡拨到阳极端，以免影响带型。插入梳齿后静置1小时。5、将胶从制胶位取下后顺入跑胶位置，注意loading孔在阴极端，取出梳齿。6、加入TBE液并高出胶面约2mm7、loading，注意pipette吸取sample时要有多余的空余量，如sample 10ul,pipette 设为12ul,吸完sample后在tip头会多出2ul空间，在加样前可轻轻按下并挤出空气，然后探入加样孔内再吸入2ul TBE液，再将sample轻轻挤出至加样孔。这样做的好处是防止tip头有压力或粘上胶后将tip头堵住，加样时用力过大会突然喷出来，至使sample loading不匀或损失。8、80V/400mM 用80分钟跑胶。你的胶对会非常漂亮的。附图在后。回复我以前跑的也这样的。原因是刚开始电压太大了。你可以先50V跑十分钟。然后100V跑25分钟看看。结果应该好一点回复其实我有个体会，也许很简单，就是胶没有完全混合均匀。我们实验室目前经费紧张，所以我们回收了所有的胶包括跑过的，我们原本担心胶会有很多的杂质，但是没有而且由于二次溶胶，又再次加入少量的EB，跑的条带很亮很直，而且原本不平整 的胶孔也平整没有条带的弯曲，非常的漂亮。可以试一试！回复电压太高了
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电话：021-电泳maker条带依次大小都是多少_百度知道PCR MAKER 月牙形PCR扩增以后,加MAKER跑琼脂糖凝胶电泳,1.8%的胶,电压为50V,MAKER的条带为什么部分成月牙形的,而PCR的则不是月牙形的,都是一起跑的呀
博凌科为生物科技-为你终于找到跟我一样问题的同志了,我的也是marker弯,P出来的条带不弯.marker有时弯的厉害,有时好一点.还是等等高人的回答吧~找到答案记得共享一下哦.
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扫描下载二维码DNA Ladder_百度百科
DNA Ladder
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DNA Ladder
细胞凋亡时DNA在核小体间断裂 (DNA fragmentation ) 形成一些DNA片断， 经过提取和纯化后在凝胶电泳上产生n条带，由于这些DNA条带经染色并成像之后的整体类似于梯子上的一个个踩踏板， 故称之为DNA Ladder
DNAladder的形成与细胞调亡密不可分 同时也是判断细胞凋亡的重要标准
DNA ladder的形成是连接间的DNA被切割，形成质量不同的片段，由于切割是随机的，各片段的质量不同，但都是一个所含DNA的倍数，形成梯度，经过，从而使分子量不同的部分形成梯度……
DNA Ladder是一种即用型(ready for use)DNA分子量标准(DNA Molecular Weight Marker)。
包含了1 Kb DNA Ladder和100bp DNA ladder，可满足各种常规DNA的分子量参照需要
Broad-Way五色蛋白Marker具有七条带：213kDa、144kDa、97kDa、58kDa、35kDa、24kDa和16kDa，为一些纯化好的蛋白混合物，这些蛋白混合物与染料共价偶联，在蛋白凝胶电泳和Western-blot转膜时肉眼可见五色条带，因而使电泳过程中蛋白的迁移情况直观可见，用于实时观察SDS-PAGE胶的蛋白分离状况和Western-blot的转移效率。已加入上样缓冲液，可直接
企业信用信息1kb dna ladder条带跑不开是什么原因大家好,我用琼脂糖凝胶电泳,加了2ul的marker,maker条带跑的不好,只是在最前面的两三个条带跑出来了,后面的几乎都没有分开,电泳条件是150v,时间跑了20min,琼脂糖浓度1.5%,谢谢,是不是参数有问题啊我是在跑pcr的产物，所以maker都跑不好很郁闷，这样我决定采用1%的琼脂糖150v多跑一会，另外我用的是TAE的缓冲液，如果还是不行的话就要换缓冲液了，谢谢回答，再去试试看
结婚时代042
建议你把电泳图片贴上,便于分析.1.5%浓度太高了.1%试试.电泳槽不同,跑相同时间DNA运动距离也不同.说时间不准确,你说你的dna跑了多少厘米吧.太近了就会分不开.况且150v跑1.5%胶电压太小.电压大了又怕琼脂糖化了,DNA扩散也严重,带会粗.所以建议：首先去别的实验室让他们按他们的条件给你跑一下,看看效果如何.可以把他们的条件copy过来试试.如果想自己摸索,你可以：1 把胶浓度调至1%,溴酚蓝跑到一半以上基本就可以分开了.2 如果还不行,把胶调至0.7%.3 还是不行就到一块长胶,延长电泳时间 4 如果还不行,那就是你购买的MARKER问题,有可能切割得不好,有可能PCR扩增非特异条带多,有可能提纯不好.建议换一个公司的marker再试试.TAE应该没问题.如果缓冲液有问题,那么不会出现任何一条成型的条带,都是歪歪扭扭或者模糊的.既然前面有几条带清晰就不是缓冲液的问题.实在不行重新配置一下缓冲液.新缓冲液,新胶,应该没问题.
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没分开就说明电泳条件不对，marker都跑不开别说目的条带了。建议电泳条件做以下调整：1、电压调高，但要防止电泳温度过高导致电泳条带热运动扩散；2、时间延长；建议首选采纳3、琼脂糖浓度降低。
电压高了，胶融化了？我以前碰到过这种情况
时间太短了吧,浓度太高了吧
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