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上海百蕊生物科技有限公司
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【简单介绍】
小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒 小OVA sIgE试剂盒灵敏度高，权威酶联免疫技术服务，提供专业代测服务，享受零运费运输，售后完善。小OVA sIgE试剂盒ELISA试剂盒,品质保证!售前售中售后全程提供技术指导,有质量问题免费包退包换，免除您实验的后顾之忧。欢迎来电索要说明书。
【详细说明】
产品中文：小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒产品英文：Mouse ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA kit货号：XF03027B规格：48T/96T保质期：6个月保存条件：2到8度小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒,小OVA sIgE试剂盒ELISA技术原理：以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来.1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记 的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。6. 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量 与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），并且重复性好。小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒,小OVA sIgE试剂盒ELISA试剂盒,品质保证!售前售中售后全程提供技术指导,有质量问题免费包退包换!提供免费代测服务,代测时间为5-7天,提供原始数据,分析数据!样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒,小OVA sIgE试剂盒购买本公司ELISA试剂盒，提供专业代测服务，享受零运费运输！ELISA试剂盒品质保证、权威酶联免疫技术服务。了解产品详情，欢迎来电咨询。&操作步骤1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为30ng/L，20ng/L ，10ng/L，5ng/L， 2.5ng/L）。2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.&10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6． 底物请避光保存。7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9． 本试剂不同批号组分不得混用。小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒,小OVA sIgE试剂盒相关产品：人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒人基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒人瘦素(LEP)ELISA试剂盒人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒&人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒
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小鼠（OVA sIgG）小鼠卵清蛋白特异性IgG（OVA sIgG）ELISA试剂盒
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厦门慧嘉生物科技有限公司
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小鼠（OVA sIgG）小鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒
产品详细信息
小鼠（OVA sIgG）小鼠卵清蛋白特异性IgG（OVA sIgG）ELISA试剂盒&实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。&标本的采集及保存<span style="color:#.&&&&&&&&&血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000&x&g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。<span style="color:#.&&&&&&&&&血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2&-&8&&C&1000&x&g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。<span style="color:#.&&&&&&&&&细胞培养物上清或其它生物标本：1000&x&g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。最后计算浓度时，稀释了&N&倍，标本的浓度应再乘以&N&。标准品的稀释原则：<span style="color:#瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300&pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300&pg/ml，150&pg/ml，75&pg/ml，37.5&pg/ml，18.5&pg/ml，9&pg/ml，4.5&pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0&pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制150&pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300&pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则：临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100&l），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10&l生物素标记抗体加990&l生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100&l），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10&l辣根过氧化物酶标记亲和素加990&l辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液&的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。<span style="color:#.&&&&&&&&&加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100&l，余孔分别加标准品或待测样品100&l，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。<span style="color:#.&&&&&&&&&弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液&100&l（取1&l生物素标记抗体加99&l生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。<span style="color:#.&&&&&&&&&温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350&l/每孔，甩干。<span style="color:#.&&&&&&&&&每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）&100&l，37℃，60分钟。<span style="color:#.&&&&&&&&&温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350&l/每孔，甩干。<span style="color:#.&&&&&&&&&依序每孔加底物溶液90&l，37℃避光显色（<span style="color:#分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。<span style="color:#.&&&&&&&&&依序每孔加终止溶液50&l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。<span style="color:#.&&&&&&&&&用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。&在加终止液后15分钟以内进行检测。注：<span style="color:#.&用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。<span style="color:#.&每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N&H<span style="color:#SO4。测量时先用此孔调OD值至零。<span style="color:#.&为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。<span style="color:#.&未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。<span style="color:#.&建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。洗板方法手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项<span style="color:#.&当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。<span style="color:#.&洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。<span style="color:#.&一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。<span style="color:#.&请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。<span style="color:#.&如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。<span style="color:#.&在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。<span style="color:#.&底物请避光保存。<span style="color:#.&不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。&慧嘉生物您实验身边的好伙伴为客户提供&最高品质的产品&和&最优质的服务&&详细说明书或技术咨询联系电话：<span style="color:#&陈先生Q&Q：&&&&&&邮箱：&&
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