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测定蛋白质分子量的方法
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1.凝胶过滤法 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积，从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量。2.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS（十二烷基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基。当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，使蛋白质分子带上大量的强负电荷，并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量。3.沉降法（超速离心法） 沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。
没意见，你想怎样我都随你-------《演员》我后来都会选择绕过那条街，又多希望在另一条街能遇见-------《你还要我怎样》
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蛋白分子量计算设计专题简介
本专题为土木在线蛋白分子量计算专题，全部内容来自与土木在线论坛精心选择与相关的资料分享，土木在线为国内最大最专业的土木工程垂直站点，聚集了1700万土木工程师在线交流，土木在线伴你成长，更多相关资料请访问!
蛋白分子量计算
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现在上土方量计算~老师讲的时候还能懂~自己一算就束手无策~哎``烦恼啊~~我该怎么办啊~ 请大家帮帮我吧~~~
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本人刚开始做预算，今遇到问题请大家帮忙解决，谢谢！ 市政管道安装中土方量如何计算？包括挖土量（类别不同放坡也不同吧？）如何根据管径确定，放坡多少，回填量计算以及垫层如何算量？！ 谢谢大家了！！！ :'( :'(
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土方量计算
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桥梁伸缩量计算.
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高中生物必修一蛋白质知识点
学习啦【高一生物】 编辑：文娟
　　学习需要讲究方法和技巧，更要学会对知识点进行归纳整理。下面是学习啦小编为大家整理的必修一生物蛋白质知识点，希望对大家有所帮助!
　　高中生物必修一蛋白质知识点
　　1、元素组成：除C、H、O、N外，大多数蛋白质还含有S
　　2、基本组成单位：氨基酸(组成蛋白质的氨基酸约20种)氨基酸结构通式： ：氨基酸的判断： ①同时有氨基和羧基②至少有一个氨基和一个羧基连在同一个碳原子上。(组成蛋白质的20种氨基酸的区别：R基的不同)
　　3.形成：许多氨基酸分子通过脱水缩合形成肽键(-CO-NH-)相连而成肽链，多条肽链盘曲折叠形成有功能的蛋白质二肽：由2个氨基酸分子组成的肽链。多肽：由n(n&3)个氨基酸分子以肽键相连形成的肽链。蛋白质结构的多样性的原因：组成蛋白质多肽链的氨基酸的种类、数目、排列顺序的不同;构成蛋白质的多肽链的数目、空间结构不同
　　4.计算：一个蛋白质分子中肽键数(脱去的水分子数)=氨基酸数 - 肽链条数。一个蛋白质分子中至少含有氨基数(或羧基数)=肽链条数
　　5.功能：生命活动的主要承担者。(注意有关蛋白质的功能及举例)
　　6.蛋白质鉴定：与双缩脲试剂产生紫色的颜色反应双缩脲试剂：配制：0.1g/mL的NaOH溶液(2mL)和0.01g/mL CuSO4溶液(3-4滴) 使用：分开使用，先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液。
　　有关蛋白质的计算练习及答案解析：
　　1、亮氨酸的R基为&C4H9，在一个亮氨酸分子中，含碳和氧的原子数分别是( )A.6，2 B.7，2 C.6 ，3 D.7， 3
　　【解析】 A
　　把R基带入到氨基酸通式中就得出答案
　　2、甲硫氨酸的R基是&CH2&CH2&S&CH3，它的分子式是( )A.C5H11O2NS B.C3H7S C.C4H11O2S D.C5H10O2N
　　【解析】A
　　把R基带入到氨基酸通式中就得出答案
　　3、有一种二肽的式是C8H14N2O5，水解后得到丙氨酸(R基为-CH3)和另一种氨基酸X，则X的化学式是( )A.C5H7NO3 B.C5H9NO4 C.C5H11NO5 D.C5H7NO4【解析】B
　　试题分析：根据氨基酸的通式可以知道丙氨酸的分子式是C3H7NO2，又因为二肽的化学式是C8H14N2O5，形成该二肽时脱去了一个水分子，所以一种氨基酸X则X的化学式是C5H9NO4,故B正确。
　　4、谷胱甘肽(C10H17O6N3S)是一种重要的三肽，它是由谷氨酸(C5H9NO4)、甘氨酸(C2H5NO2)和半胱氨酸缩合而成，则半胱氨酸可能的分子式为( )A.C3H3NS B. C3H5NS C. C3H7O2NS D. C3H3O2NS
　　【解析】C
　　三个氨基酸缩合，失去两个水分子，分子式为谷胱甘肽的-谷氨酸-甘氨酸的，再加上4个H2个O。应该是C3H7O2N2S
　　5、人体内的抗体IgG是一种重要的免疫球蛋白，由4条肽链构成，共有x个氨基酸，则其分子中肽键数为( )A. x 个 B. (x+1)个 C. (x-2)个 D. (x-4)个
　　【解析】D
　　蛋白质肽链的肽键数目=氨基酸数-条数，4条肽链，所以肽键数目为X-4个
　　6、牛胰岛素是由A、B两条肽链构成的蛋白质分子，其中A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸，则其失去水分子数及形成肽键数目分别为( )
　　A.51和51 B.50和50 C.50和49 D.49和49
　　【解析】D
　　解析：氨基酸在形成肽链的过程中，n个氨基酸，如果形成1条肽链，共失去n-1个水分子，共有肽键n-1个。由此可知，A链中有20个肽键，脱去20个水分子，B链中有29个肽键，脱去29个水分子。牛胰岛素分子的肽键和脱去水分子的个数就是A链加上B链即可，应该是20+29=49(个)，水分子也是49个。
　　7、某蛋白质分子式为C63H103O65N17S2，它最多可含有几个肽键?( )A.15个 B.16个 C.17个 D.18个
　　【解析】B
　　每个氨基酸至少有一个氨基，该结构中有17个氮元素，可最多有17个氨基酸，因此最多有16个肽键
　　8、人体内的抗体IgG由4条肽链构成，共有764个氨基酸，则该蛋白质分子中至少含有的氨基数和羧基数分别是( )A. 764、764 B. 760、760 C. 762、762 D. 4、4
　　【解析】B
　　蛋白质每条肽链的首尾两端都肯定含一个游离氨基和一个游离羧基，4条肽链，所以至少含有4个游离的氨基和4个游离的羧基。
　　9、某蛋白质含n个氨基酸，由m条肽链组成，该蛋白质至少含氧原子数为( )A.n-m B.n+m C.2n+m D.2n-m
　　【解析】B
　　首先,肽链中共有肽键数是 N-M,每个肽键中含一个O原子,其次,每条肽链至少含一个游离羧基,每个羧基含2个O , 所以,N-M+2M=N+M
　　11、现有1000个氨基酸，其中氨基有1020个，羧基有1050个，则由此所合成的4条肽链中氨基数和羧基数分别为( )
B. 4、4 C. 24、54 D.
　　【解析】C
　　根据氨基酸中氨基和羧基的数目，可知这些氨基酸的R基中共有20个氨基、50个羧基，该蛋白质中肽键数=氨基酸数-肽链数=996，氨基数=肽链数+R基中氨基数=24，羧基数=肽链数+R基中羧基数=54。
　　12、现有氨基酸800个，其氨基总数为810个，羧基总数为808个，则由这些氨基酸合成的含有2条肽链的蛋白质，共有肽键、氨基、羧基的数目依次为( )、( )、( )。
　　【解析】798、12、10
　　氨基酸数=肽键数+肽链数可知，肽键数为798个;由题意800个氨基酸，氨基总数810个，羧基总数808个可知：有10个氨基酸R基上有氨基，8个氨基酸R基上有羧基。每条肽链的末端分别还有一个氨基和一个羧基，2条肽链共2个氨基，2个羧基，故氨基总数为12个，羧基总数为10个
　　13、现已知构成蛋白质的氨基酸共20种，他们的平均分子量为128，由50个氨基酸形成的某蛋白质的一条多肽链的分子量是( )A. 6400 B. 2560 C. 5518 D. 2218【解析】C试题分析：形成此蛋白质共脱去50-1=49个水，所以此蛋白质的一条多肽链的分子量是50&128-49&18=5518
　　14、已知20种氨基酸的平均相对分子质量128，某蛋白质分子由两条肽链组成，共有肽键98个，则该蛋白质的相对分子质量最接近于( )A. 12800 B. 12544 C. 11036 D. 12888
　　【解析】C
　　每N个氨基酸组成一个单肽链产生N-1个肽键，因此两条肽链共肽键98个，一共是100个氨基酸;另产生一个肽键生成一个水分子，需要100个氨基酸，产生98个水分子，所以蛋白质的相对分子量=128 x 100 - 98 x 18=11036
　　15、某种蛋白质由两条多肽链构成，共有肽键500个，缩合成两条肽链的氨基酸分子数和生成的水分子数分别为( )
　　A. 498、498 B. 500、500C. 502、500 D. 501、500
　　【解析】C
　　500+2=502个所以氨基酸分子数是502个 水分子数等于肽键数，所以是500个
　　16、多个氨基酸分子脱水缩合成含有2条多肽链的蛋白质时，相对分子量减少了90　　0，由此可推知：此蛋白质分子所含有的氨基酸数和肽键数分别是( )A. 52、52 B. 50、50 C. 52、50 D. 50、49【解析】C17、由丙氨酸、甘氨酸和亮氨酸各一分子组成的三肽有( )
　　A.6种 B.5种 C.4种 D.3种【解析】A试题分析：三肽是由三个氨基酸脱水缩合形成，第一个氨基酸有3种，由于不能氨基酸不
　　能相同，因此第二个氨基酸有两种，第三个氨基酸只有1种，故形成的三肽有6种，答案A正确。
　　18、甘氨酸和丙氨酸数量不限时，其能形成的二肽种类最多是( )A. 1 B. 2 C. 4 D. 6
　　【解析】C
　　19、由4种氨基酸(每种氨基酸数量不限)最多能合成不同结构的三肽有多少种?A. 4种 B. 4&4&4 种 C.3&3&3&3 种 D. 12种
　　【解析】B
　　第一个氨基酸有4个选择的机会，由于每种氨基酸的数量不限所以，第二个第三个也一样的有4个选择的机会，那就是4&4&4
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【求助】如何推算蛋白质分子量大小？
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各位老师：我最近做蛋白质的SDS-PAGE电泳，我的蛋白是构建的融合蛋白，知道它的氨基酸数目总共是188个aa，请问如何根据已知氨基酸数目推算它的分子量大小啊？
还有就是看到有文献上说根据凝胶测距离，然后再用一个什么公式来推算目的蛋白的分子量大小。
请问，这两种方法哪一种是准确的？具体怎么推算啊？
谢谢各位老师指点一二！！查看完整版本请点击这里：
yonger ( 20:05:52)
这是一个经典网站。搞基因工程的常用。有不少工具。
chenshuanhe ( 20:06:17)
去这个地方看看,可以直接输蛋白序列查询计算.
vcve ( 20:06:41)
已经没有PI/MW的标志了，怎么办？
loli ( 20:07:09)
平均一个氨基酸分子量为126.7 D
04906 ( 20:08:07)
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已经没有PI/MW的标志了，怎么办？
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04906 ( 20:08:34)
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进入之后，找到Primary structure analysis这一栏，然后在下面找到Compute pI/Mw ，点击进入即可。
luoliqiong ( 20:09:48)
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