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酵母RNA的提取和组分鉴定
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内容提示：酵母RNA的提取和组分鉴定
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H3PO4和HNO3哪个显碱性?如题.
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h3po4是磷酸（弱酸）,hno3是硝酸（强酸）.如果让我选,我选h3po4.是不是问那种酸产生的盐是碱性啊?肯定是.一定要选h3po4
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酵母核糖核酸的分离和鉴定.实验原理
萌小殇9477
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一、\x09实验目的1、掌握酵母RNA提取的方法.2、了解核酸的组成.3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作.二、\x09实验原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%.RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,由此即可得到RNA制品.但是用碱液提取的RNA有不同的降解.RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分,加入硫酸煮沸可使其水解,从水解液中可以测出上述组分的存在(见实验内容)三、\x09实验步骤1、\x09用托盘天平称1g干酵母于研钵中,加入少许石英砂,再加入2ml 0.04mol/LNaOH溶液,在研钵中充分研磨至少5min.2、\x09再加4ml 0.04mol/LNaOH溶液于匀浆液中,混匀后,将匀浆液转移到大试管中,再用4ml 0.04mol/LNaOH溶液洗涤研钵,洗涤液并入匀浆液中.3、\x09将大试管小心在沸水浴中加热30min,冷却后倒入离心管中,与另一组同学的离心管在托盘天平上平衡,然后两组的离心管对称地放入离心机中,2000r/min下离心15min.4、\x09吸取10ml酸性乙醇溶液于小烧杯中,将离心管上清液小心倒入小烧杯中,边倒入边搅拌,直到RNA沉淀完全.5、\x09将小烧杯中的液体倒入2个干净的离心管,平衡、离心（2000r/min）3min.6、\x09弃去两离心管上清液,各离心管中加入95%乙醇2.5ml,振荡、混匀、平衡、离心（2000r/min）3min.7、\x09弃去两离心管上清液,各离心管加入3ml 1.5mol/L硫酸,混匀、倒入同一个大试管中,贴上标签,放在试管架上,备用.8、\x09将水解液在沸水浴中加热至少10min,使沉淀RNA充分水解.9、\x09取一支试管A,加入1ml 0.1mol/L硝酸银溶液,再逐滴加入浓氨水至沉淀消失,然后加入1ml水解液放置片刻,观察有无白色嘌呤碱的银化合物沉淀.10、\x09另取一支试管B,加入水解液1ml,三氯化铁浓盐酸溶液2ml和地衣酚乙醇溶液0.2ml（约4滴）,混匀,用试管夹夹好后放到沸水浴中3~5min,注意观察溶液是否变成绿色,说明核糖的存在.11、\x09再取一支试管C,加入水解液1ml和定磷试剂1ml,混匀,在沸水浴中加热,注意观察溶液颜色的变化,溶液变蓝,说明磷酸存在.注意事项：离心一定要平衡对称放入离心机中,离心机达到设置转速时才能离开.四、\x09实验结果第6步中离心管底部有不少的RNA沉淀.试管A：出现白色浑浊现象.有嘌呤碱存在.试管B：加热后,出现鲜绿色,且随着加热时间延长,颜色越来越深.有核糖存在.试管C：加热后,出现蓝色,且随着加热时间延长,颜色越来越深.有磷酸存在.说明RNA的组分中有嘌呤碱、核糖、磷酸.分析：本实验选用酵母,是因为酵母中RNA含量较多,且价格便宜.RNA可溶于碱性溶液,所以本实验用0.04mol/LNaOH溶液来提取.RNA不溶于乙醇,可用酸性乙醇使RNA从溶液中沉淀出来,再用乙醇洗涤沉淀,可得到RNA粗制品.研磨和NaOH使酵母细胞破裂,RNA主要存在于细胞质中,所以RNA被释放出来,同时,NaOH使蛋白质变性.加入酸性乙醇,一方面可以中和NaOH,另一方面,使RNA从溶液中沉淀下来.RNA含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸等组分,加入硫酸煮沸可使其水解,从水解液中可以测出上述组分的存在.（1）、强酸使核酸分子的有机磷消化为无机磷,使之与钼酸铵结合成磷钼酸铵（黄色沉淀）PO43- + 3NH4+ + 12MoO42- + 24H+ ===(NH4)3PO4.12MoO3.6H2O + 6H2O当有还原剂（如维生素C）存在时,Mo6+被还原成Mo4+,再与试剂中的其它MoO42-结合成Mo（MoO4）2,呈蓝色,称钼蓝.所以试管C中会出现蓝色.（2）、RNA与硫酸共热,生成的核糖进而脱水转化为糠醛,三氯化铁作为催化剂,可与地衣酚反应,生成绿色化合物,所以试管B中出现绿色.（OR苔黑酚）（3）、嘌呤碱可与硝酸银反应产生白色的飘零银化合物沉淀.所以试管A中出现浑浊现象.（4）、不检测嘧啶碱,是因为与嘌呤碱相比,它难以被水解下来,同时它难检测且现象不明显.
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酵母核酸中RNA含量较多，DNA 则较少。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA的粗制品。核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱、磷酸，加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可测出其组成成分。
酵母核酸中RNA含量较多，DNA 则较少。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA的粗制品。
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实验四 RNA的提取及其组分的鉴定
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职称：主治医师
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碱性磷酸酶（ ALP 或 AKP ）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶，而是一组同功酶。目前已发现有 AKP1 、 AKP2 、 AKP3 、 AKP4 、 AKP5 与 AKP6 六种同功酶。其中第 1 、 2 、 6 种均来自肝脏，第 3 种来自骨细胞，第 4 种产生于胎盘及癌细胞，而第 5 种则来自小肠绒毛上皮与成纤维细胞。 　　碱性磷酸酶主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查。患这些疾病时，肝细胞过度制造ALP，经淋巴道和肝窦进入血液，同时由于肝内胆道胆汁排泄障碍，反流入血而引起血清碱性磷酸酶明显升高。但由于骨组织中此酶亦很活跃。因此，孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松、肝脓肿、肝结核、肝硬变、白血病、甲状腺机能亢进时，血清碱性磷酸酶亦可升高，应加以鉴别。 　　碱性磷酸酶也是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶（HRP)相比，ALP用作标记酶的优点是，稳定性高、灵敏度高，缺点是成本高，标记困难。
　　1．生理性增高：儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。
　　2．病理性升高：
　　(1)骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等；
　　(2)肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等；
　　(3)其他疾病如甲状旁腺机能亢进。
　　3．病理性降低：见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。
职称：副主任医师
专长：内科、消化内科
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你好！增高见于肝胆疾病如胆道堵塞。肝炎，骨骼疾病等
问碱性磷酸酶是什么
职称：医师
专长：医学影像学（X线、CT、磁共振、B超）及内、外、儿科常见病
&&已帮助用户：6821
您好：碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中，其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和胎盘等组织； 口腔溃疡，又称为“口疮”，是发生在口腔粘膜上的表浅性溃疡，大小可从米粒至黄豆大小、成圆形或卵圆形，溃疡面为凹、周围充血。
问碱性磷酸酶174
职称：医师
专长：肿瘤内科 、乙肝等
&&已帮助用户：217740
问题分析：你好，看你说的这次化验的结果，那看碱性磷酸酶有点高的，看化验结果方面到不是特别高，不过也怕是会有缺钙方面的原因引起的意见建议：那像你这种情况，到是可以补充一下钙剂来调理看看也好，平时也可以在饮食上多吃些含钙高的食物也是会比较好的
问碱性磷酸酶偏低？
职称：医师
专长：急性胆囊炎,致死性肝内胆汁淤积综合征,肝损伤
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病情分析： 你好，去医院做个血液检查，如果血清中的乳酸脱氢酶长期偏高，意见建议：就有可能疾病的原因造成。乳酸脱氢酶升高常有急性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬化、肝癌、肝胆肿瘤、急性心肌梗塞、运动肌肉营养不良、多发性肌炎、肺癌、急性白血病、恶性贫血、肠梗阻等病症。
问碱性磷酸酶偏高
职称：医师
专长：心血管内科、消化内科、呼吸内科
&&已帮助用户：272877
你好，只是偏高一些没有什么问题的，可以考虑适当的补补钙，有时缺钙也会引起这些指标增高的
问碱性磷酸酶高
专长：保健 妇科
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考虑为正常的，儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。鼻子流血注意检查血常规。
问宝宝碱性磷酸酶
专长：艾滋病、皮肤综合尖锐湿疣
&&已帮助用户：222281
2岁孩子要从食物补充营养而不是靠药物补充每天可以吃奶蛋鱼肝肉鸡鸭蔬菜水果米饭面食营养全面就不会缺铁缺钙-------血清碱性磷酸酶高达323以前292检查单位的正常是多少？如果在正常范围就没有差别
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