锅柄PCR授人以柄是什么意思么

  说一些本人两次考病毒所的经验,希望对你们有点借鉴,但如有说的不对的也请你们自己斟酌!
  每年考完试,考生都会觉得只要英语不出问题肯定能上,可是近几年所里划线基本上在330左右,而且近几年报考病毒所的人越来越多,今年300分以上就有100多人,325以上有70多人,最终只要40人进复试,五分砍掉三十多人不是件容易事,所以只能靠单科卡线了,今年的线是总分330英语政治各55,专业课每门90。每年差不多推免名额扣除后只剩20多一点名额,所以40名左右进复试基本上是规律。一般政治60上下,当然如果你报班,或者能像今年能弄到答案那另当别论,英语今年绝对是个例外,哪能都70,80的,这种事还是不要期盼他会再出现。所以按常人英语55分,去年英语线是45。那还剩215分留给专业课了。
  先来说下微生物,只要你把武大沈萍那本微生物搞透,基本上110不成问题,但要想再高点就有难度了,而且每年微生物最后一大题都会考免疫方面的(10-15分),这对有医学背景的有优势,但他们前面照样吃亏,所以说这个差别不是很大。你若实验技能很强,做过很多实验可能会好点。还有105分就是生化了。我为什么说到最后才说生化,因为它难!生化一直都是病毒所老师自己命题的,而且每年改的会非常严,考完你觉得自己120没问题,但分数下来你可能82都没。我可以很负责的告诉你,每个大题你答得不是很有条理很有逻辑的话,而且还要缜密的实验思维(这个跟你本科做的实验多少有关了),你可能只能拿个零头的分数,还有一个重要的因素是你的专业知识面了。这就是为什么会出现上面的反差了。每年分数下来都有好多考生去查生化,接受不了这现实啊,呵呵!
  生化考王镜岩那两本,每本都六百多页,加起来比本牛津大字典还要厚,这该怎么复习这门课呢?上册前面几章讲糖和脂质,这里面会经常考些名词解释,简答之类的,但也考过大题,比如2010年考的是几种糖的鉴定方法,去年就考了糖链的生物学功能。后面开始讲氨基酸,蛋白质,这里面考的也非常多,2010年考了氨基酸的几种电离形式要求写化学式,今年考了个BCA法定量蛋白质原理(这个没做过实验很难注意到这个知识点)。接下来就到核酸了,2011年考SDS在电泳中作用,你可能知道一两点,但这是个大题。下册一开始讲糖和脂质代谢,什么三羧酸循环啊,代谢途径啊,这些东西既难记,还繁琐,不过有好多年没考过这些方面的内容了,我个人建议在这方面不要花太多时间,浏览各大概,包括什么氨基酸的合成分解代,这些途径老师自己回去记吗?想通了这个道理就行了。再到后面就是讲基因工程了,这个绝对是重中之重,而且这才是你将来上研究生要做的东西。去年考的是基因工程一般步骤,今年考了单克隆抗体,以及几种PCR技术,今年考的是反向PCR和锅柄PCR,书上后面都是有的。今年微生物上还考了个载体上一些元件是什么,全都是大题,基本上这一块每年不会低于50分的,这还不算微生物。写这么多不知道你们心里可有点底,至少该有个轮廓吧!写的有点多了。呵呵
  最后介绍一下所里几位牛叉的老师吧,首先当推胡志红,原所长。杰青,实验室大,条件好,,更重要的是老师很负责,技术成熟,出文章也快,每年三四篇J.V是不成问题的,自然竞争的人也多了。第二位的是陈新文,现任所长,做HIV的,现在国内做HIV的都有钱,杰青。第三位是肖庚富,他以前是武大老师的,实验室建的也比较早。第四位王华林,去年新评上的杰青。杨荣阁副所长,做HIV的,老有钱了。还有胡勤学,石正丽,罗敏华,张波,陈则(做流感的,还是上海生物制品研究所的老师)等老师都比较不错。
  应该说病毒所的实力还是相当强的!如果你有目标就早点努力,一分耕耘一分收获,这句话一百年不会变质的!加油!
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【原创】ABI7500 FAM和TAMRA通道是什么意思?
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这个帖子发布于3年零238天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
实验室用的ABI7500实时荧光定量PCR仪,一直不太明白为什么检测系统要用FAM和TAMRA“两个”通道?一个信号通道不能分析么?这两个信号通道各在荧光信号分析中起的什么作用?求详解,谢谢了
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FAM都是标记5’端的,是报告基团。TAMRA一般是标记3‘端的,是淬灭基团。
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同样作为新手,学习了,谢谢楼上
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1. FAM和TAMRA通道其实指的是ABI7500里的两个不同波长的滤光器。ABI7500内有5个滤光器,对应了5个通道,波长都分布在520~650nm之间,FAM和SYBR Green位于第一通道,TAMRA位于第三通道,常用的参比染料ROX位于第四通道。具体的通道是由每种荧光染料的发射波长决定。2. FAM一般用来做报告荧光基团,而TAMRA为粹灭基团,分别在探针的5'和3'端,靠Taq酶的5'→3‘双链外切酶活性降解探针而释放荧光基团。3. FAM荧光值是监测扩增的,TAMRA作为粹灭基团对扩增的监控没有多大意义,可以不考虑。
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什么是PCR试剂?
黎约将夜の3502
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PCR试剂简单的理解就是用于做PCR的试剂.实际做PCR的试剂很多,在这儿可以理解为达到PCR级别的试剂.试剂中不应该存在对PCR反应有影响的杂质.象核酸、核酸酶,如果是水的话,盐离子尽可能的小,最好是超纯水.象一些盐类,分析纯的就可以达到要求.如果想做PCR,买点TAQ酶,dNTP就够了,引物找公司合成,模板自己提取.
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数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于,数字PCR可让你能够直接数出的个数,是对起始样品的绝对定量。
数字PCR简介
在时,我们常常纠结一个问题,究竟是还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如不平衡表达)、二代测序结果验证、表达分析、单细胞分析等。[1-2]
数字PCR技术发展
20 世纪末,Vogelstein 等提出数字PCR( digitalPCR,dPCR) 的概念,通过将一个样本分成几十到几万份,分配到不同的反应单元,每个单元至多包含一个拷贝的目标分子( DNA 模板) ,在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR 扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。
数字PCR技术不断发展,Bio-Rad、LIFE Technologies及RainDance等厂家相继推出技术较为成熟的数字PCR产品。
QuantaLife公司开发出的微滴数字PCR技术。该产品还获得了2011年度Frost & Sullivan北美新产品创新奖。2011年10月,Bio-Rad了QuantaLife和ddPCR技术,相继推出了QX100、QX200微滴式数字PCR系统。
与其他数字PCR技术不同,Bio-Rad对样品进行微滴化处理。据该公司部门的销售经理Richard Kurtz介绍,他们的独特优势是能够产生非常均一、重复的1纳升液滴。这样的好处是每个样品形成20,000个液滴,而其他系统只能分成760-3,000个部分。分得越多,则意味着分析越准确。[1]
数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;(Real Time PCR)基于,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是最新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种绝对定量的方法。主要采用当前分析化学热门研究领域的或微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。
数字PCR原理
PCR实际上是一个在、引物(模板片段两端的已知序列)和四种等存在的情况下,依赖的酶促,扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。
数字PCR(Digital PCR)仪器  伯乐生命bio-rad QX200
(ddPCR) 系统可对DNA或RNA分子进行绝对定量分析,适用于 EvaGreen 或基于探针的数字PCR应用领域。  QX200 Droplet数字PCR(Digital PCR) 系统的应用领域:  癌症研究和拷贝数变异分析  以卓越的灵敏度和准确度测量癌症突变的变异程度、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。  病原体检测  精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。  与新一代测序 无缝对接  无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行绝对定量分析。  基因表达分析  可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性极佳的检测。  环境监测  使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。  食品检测  采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。[4]
.生物谷[引用日期]
.生物通[引用日期]
.生物通[引用日期]
.搜狐[引用日期]

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