试述结核菌分枝杆菌属培养特性。

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-01-19 20:25 标签： 注射用母牛分枝杆菌
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本试题来自：（2007年医学微生物学模拟试题，）单项选择：一、A1型题
每一道考试题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。有关结核菌素试验下述错误的是A．属于皮肤迟发型超敏反应B．可检测机体对结核分枝杆菌的免疫状况C．皮肤反应程度以局部红肿，硬结的直径为标准D．可检测机体细胞免疫功能状况E．12～18小时观察结果正确答案：有， 或者
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结核分枝杆菌致病性免疫性
18:06　来源：&　　　　【
】【】【】
结核分枝杆菌
生物学特性
致病性免疫性
微生物学检查原则
人类对结核分枝杆菌感染率高，发病率低，说明人体对结核分枝杆菌的感染有较强的免疫力，细胞免疫为主。细胞免疫与迟发性超敏反应并存，像干酪样坏死和液化空洞的形成都与迟发性超敏反应有关。
取标本&涂片染色&分离培养&动物实验/核酸或抗体检测
接种疫苗预防，治疗早期联合大量使用抗结核药物。结核菌素试验：
■原理：人类感染过结核分枝杆菌后，产生免疫力的同时也会产生迟发性超敏反应，将结核菌素注入皮内，观察有无超敏反应的发生，判断对结核分枝杆菌有无免疫力。
■试剂两种：①旧结核菌素（OT）
②纯蛋白衍生物（PPD）&PPD&C，BCG&PPD
■方法：前臂皮肤注射，48-72h后观察结果
&红肿硬结＞5mm，阳性（＞15mm，强阳性）
&红肿硬结＜5mm，阴性
&阳性：感染过，或BCG成功，有免疫力
&强阳性：现在活动性
&阴性：没有感染过/未接种BCG
①感染初期，老年人，严重结核合并其它
②使用免疫抑制剂
③艾滋病等免疫功能低下者
接种疫苗预防，治疗早期联合大量使用抗结核药物
结核分枝杆菌
菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在，易发生L型，抗酸染色阳性。呈单个或分枝状排列，无鞭毛、无芽孢。
专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.5-6.8
■营养要求高，罗氏培养基（蛋黄、甘油、天门冬素、马铃薯、无机盐、孔雀绿等）
■生长缓慢，18h分裂一次，2-4W形成R型菌落，&菜花样菌落&，乳白色干燥不透明，表面呈颗粒结节，边缘不整医学教育网|搜索整理。
抗干燥，抗酸碱，抗化学消毒剂，对湿热和紫外线敏感，对抗结核药（链霉素、异烟肼、利福平等）敏感，但易产生耐药性。结核杆菌多种性状可发生变异如：菌落变异、毒力变异等。菌落变异由粗糙型变成光滑型
菌体成分。
1、脂质&&存在细胞壁，占菌体干重的20-40%，
①磷脂②脂肪酸（索状因子）③蜡质D（分枝菌酸+肽糖脂）④硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖
作用：引起结核结节，慢性肉芽肿及组织细胞干酪样坏死等病变
其中最重要的是结核菌素，结核菌素+蜡质D&&迟发型变态反应。
3、多糖、核酸和荚膜
■所致疾病：
■传染途径：呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜。
结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤黏膜进入机体，引起相应器官的结核病，以肺结核最为常见。（一）肺部感染（1）、原发感染：常见于儿童，也称外源性感染。结局：机体抵抗力强：形成结核结节&纤维化&钙化&自愈（但病灶内常有细菌的潜伏）
机体抵抗力差：活动性肺结核&干酪样坏死
全身播散&粟粒样结核
（2）继发感染&&常见成人（原发病灶&&内源性感染）
特点：局部病变重，但不易扩散
一般局限于肺部，易发生干酪样坏死，可形成空洞和开放性肺结核 （二）肺外感染
部分肺结核患者体内的结核分枝杆菌可经血液、淋巴液侵入肺外器官，引起相应的脏器结核，如脑、肾、骨等。痰菌被消化道咽入，可引起肠结核等。
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医学微生物试验指导
棒状杆菌与分枝杆菌
课程名称&&& 医学微生物学
棒状杆菌与分枝杆菌
授课重点、难点
(一)结核分枝杆菌：抗酸染色法，液体、固体培养&&&&&&&&&&&&&&
（示教）(二)麻疯杆菌：抗酸染色&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
(三)白喉棒状杆菌：Albert染色法& G氏染色法&&&& &&&&&&&&&&&&（示教）
&&&&&& 吕氏血清&&& 亚碲酸盐平板&
&&&&&&&&&&&&&&&（示教）
(四)病人痰液（结核分枝杆菌）抗酸染色法&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
(五)白喉棒状杆菌 Albert染色法&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
授课内容、教具与时间分配
时间分配（一）讲解及示教&& 25’
（二）操作&&&&&&&& 40’
（讲授内容：
（一）棒状杆菌
菌体的一端或两端膨胀呈棒状，如白喉棒状杆菌，可引起急性呼吸道传染病，患者整个咽喉部呈白色（一层假膜覆盖），产外毒素，入局部或全身，有毒性作用，可脱落引起窒息导致死亡。
白喉棒状杆菌：G+，棒状，排列成字母状。
Albert 染色，菌体淡染，内有深染的颗粒（异染颗粒，具有鉴定意义）；当细菌鉴定为使此特征显著，一般接种于吕氏血清斜面培养基；此外，可将菌种接种于含亚碲酸盐平板上（亚碲酸盐可抑制杂菌生长），白喉棒状杆菌生长形成黑色菌落（亚碲酸盐&&&&&
元素碲）。&&&&&&&&&&
（二）分枝杆菌
&&&&& 结核――引起结核病；麻风分枝杆菌――引起麻风病，体外不能培养
结核分枝杆菌：镜下呈细长，抗酸染色阳性，无芽胞、鞭毛、荚膜
培养特点――专性需氧，在液体培养基中表面生长，固体培养时呈菜花状菌落，干燥；
营养要求高：血清，蛋黄、马铃薯、甘油等、
生长慢：18小时一代，4―6周出现肉眼可见的菌落
微生物学检查原则：
&&& 首先要熟悉其抵抗力特性：四抗――干、酸碱、染料、一般消毒剂
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
四怕――湿热、紫外线、酒精、抗痨病药
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
以便正确处理标本提高阳性检测率；
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
标本&&&& &直接镜检&&&& 涂片、染色、镜检
（痰液、尿、脑脊液）&&&& 浓缩集菌，后再涂片、染色、镜检
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
提高阳性率
培养：接种于特殊培养基中，4―6天后观察
动物试验：观察动物发病及局部解剖
麻风分枝杆菌：麻风病，体外不能培养，诊断依靠标本涂片染色及病理组织切片检查；细胞内抗酸阳性的短、粗杆菌。
（三）白喉棒状杆菌的Albert染色
从吕氏血清斜面上取白喉棒状杆菌涂于玻片上，干燥后加热固定，以Albert染液中的甲液染5分钟，再以乙液（碘液）染1分钟，吸干，油镜检查。
结果；菌体呈蓝绿色，异染颗粒为蓝黑色
（四）结核病人痰液的抗酸染色；
环取痰液&&&&&&& 涂片（略厚）&&&&&
干燥&&&&&& 固定&&&&&&&
插入石炭酸复红染色缸中&&&&&&& 70℃-80℃水浴箱中&&&&&&&&&&&
8-10分钟后取出&&&&&&&&&&&
用3%的盐酸酒精脱色约1―2分钟，脱色时轻摇玻片，直到涂片颜色几乎脱去或稍呈粉红色为止&&&&&&&&&
水洗后，用碱性美蓝复染1分钟&&&&&&&&&&&
水洗，待干 &&&&&&&&&&&&镜检
染色结果：结核分枝杆菌呈红色，非抗酸菌及背景为蓝色。
（五）小结&& 结核分枝杆菌抗酸染色的原理:结核分枝杆菌含脂质多,不易着色,先用石炭酸复红初染,染色时间要稍长,且需要加温。一旦细菌染上颜色，由于脂质的存在，即使强脱色剂也不能使之脱色,其它细菌均脱色,经碱性美兰复染,所以结核分枝杆菌呈红色,其它呈蓝色.
& 凡抗酸染色阳性，化验报告只能写找到抗酸菌,交给临床医生分析。在上呼吸道中抗酸阳性多是结核菌(在尿道中有非致病性分支杆菌――耻垢杆菌)。只有当痰液中含菌量》十万条/ml，才能在视野中找到结核分枝杆菌，即使未找到，也不能说明就没有结核分枝杆菌。由于结核分枝杆菌生长缓慢，一般为四星期，所以一般只在涂片未找到，而又怀疑是肺结核时，或需要做药敏及动物接种时，才做结核分枝杆菌的培养。
注意事项：
（一）白喉棒状杆菌Albert染色：染色液用后放回原处，菌种要集中消毒
（二）抗酸染色：染色液用后放回原处，结核病人痰液标本集中存放。细菌各论-5_百度文库
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