做ELISA的终止液不同显色系统的hmgb1 elisa试剂盒盒里的可以混用吗

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人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒,本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本浓度。产品名称:人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒。产品性状:液体产品用途:科研实验专用产品规格:96T/48T产品存储:4&保存注意事项:1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(&n&5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6. 底物请避光保存。7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9. 本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒,抗原抗体反应:抗原或抗体在适当的介质下可进行特异的抗原抗体反应。(1)酶反应:酶可以通过共价键与抗原或抗体连接形成结合物,当抗原抗体反应的时候,被检测靶目标中也结合了酶分子。(2)ELISA试剂盒底物反应:结合在抗原抗体中的酶分子,可以促使底物发生颜色反应,检测人员可以裸眼观察,可以通过颜色来判定是否有免疫反应的存在,通过颜色的深浅判断标本中相应抗原或抗体的含量,也可借用酶标仪在适当的波长读取吸光度值。人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒,双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.短妓嵫伟换撼逡航固逑∈椭恋鞍字屎课1~10&g/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过液。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。5. 终止反应:于各反应孔中加入2M0.05ml。6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以&+&、&-&号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒,部分相关产品,如需更多,请联系我们:E-10410&& &人系统性红斑狼疮(SLE)Elisa试剂盒&& &Human systemic lupus erythematosus,SLE ELISA KitE-10411&& &人抗神经节苷脂抗体(GM1)Elisa试剂盒&& &Human anti-ganglioside antibody,GM1 ELISA KitE-10412&& &人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAGAb)Elisa试剂盒&& &Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA KitE-10413&& &人抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)Elisa试剂盒&& &Human anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA KitE-10414&& &人抗中性粒细胞抗体(ANA)Elisa试剂盒&& &Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA KitE-10415&& &人抗载脂蛋白抗体A1(ApoA1)Elisa试剂盒&& &Human anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA KitE-10416&& &人抗胰岛素受体抗体(AIRA)Elisa试剂盒&& &Human anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA KitE-10417&& &人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)Elisa试剂盒&& &Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA KitE-10418&& &人抗网硬蛋白抗体(ARA)Elisa试剂盒&& &Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA KitE-10419&& &人抗网硬蛋白抗体(ARA)Elisa试剂盒&& &Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA KitE-10420&& &人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)Elisa试剂盒&& &Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody,MCV ELISA KitE-10421&& &人抗髓磷脂抗体IgA(AMAIgA)Elisa试剂盒&& &Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA KitE-10422&& &人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)Elisa试剂盒&& &Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA KitE-10423&& &人抗髓磷脂抗体IgA(AMAIgA)Elisa试剂盒&& &Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA KitE-10424&& &人抗腮腺管抗体(anti-parotidductAb)Elisa试剂盒&& &Human anti-parotid duct antibody ELISA KitE-10425&& &人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)Elisa试剂盒&& &Human anti-cartilage-antibody ELISA KitE-10426&& &人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)Elisa试剂盒&& &Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit&
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14:31:58&&&来源:&&&评论:&&
[Elisa实验用TMB显色剂试剂盒显色后,加终止液后颜色能稳定多少时间啊?(试剂盒,显色,显色剂,酶标仪)] 我是新手,没做过ELISA。自己实验室又没有酶标仪,要到别人实验室去读数。想请教一下,我能不能在自己实验室做完实验,再拿到别人那里去读数啊?路上约需要20-30分钟时间。这样读数对实验结果会有什么影响吗?
谢谢大家! 关键词:[试剂盒 显色 显色剂 酶标仪]…
我是新手,没做过ELISA。自己实验室又没有酶标仪,要到别人实验室去读数。想请教一下,我能不能在自己实验室做完实验,再拿到别人那里去读数啊?路上约需要20-30分钟时间。这样读数对实验结果会有什么影响吗?
谢谢大家!
回复对于数值影响较大回复我是新手,没做过ELISA。自己实验室又没有酶标仪,要到别人实验室去读数。想请教一下,我能不能在自己实验室做完实验,再拿到别人那里去读数啊?路上约需要20-30分钟时间。这样读数对实验结果会有什么影响吗?
谢谢大家!主要看你的显色底物和终止液的质量如何!如果质量较差的话强阳性很快就出现沉淀(几分钟内),显色值下降!质量好的话四度保存数天室温存放24小时显色值下降不大于15%!回复谢谢了。我再想想办法。回复向上面哥们说的,影响还是有的。底物质量好,终止可以坚持一段时间10-20分钟,变化在0.1-0.2个范围,你还是把后面的显色过程拿到有酶标仪的房间显色。一般室温就可以了20-24度就可以,如果温度低时间可以长一点。如果你有眼药水的瓶子(小的),装上2M硫酸,终止就可以了。哈哈。有点粗。不过还可以。回复我想用分光光度计测量,不过太麻烦了.测几个孔就好了.不知怎么样?回复把后面显色步骤拿到有酶标仪的实验室作,一般37度显色十分钟左右,终止,直接在有的实验室测量。因前面步骤作完后,板子不显色可在冰箱过夜,第二天再显色也问题不大。所以只有20分钟对结果影响不大。比终止后再拿走测量好得多。回复影响是有,但我做的第一天和第二天的数值没有多大变化,主要还是看你的系统。回复谢谢各位,特别是免疫从业者的方法可行,我这样做做看.
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& 小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒说明书
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒说明书
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【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒试剂盒组成】备注:1&6482412631.5 &mol/L.&【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】137℃【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒操作步骤】130220350&L10&L40&L5437℃水浴锅或恒温箱温育30min51min4650&L737℃水浴锅或恒温箱温育30min81min49A 50&LB 50&L30s30s37℃避光显色15min。10、终止:50&L11、测定:15450nmOD12根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒注意事项】12、3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。45551.5-48&mol/L1.5-48&mol/L6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;;不得重复使用。89B&【小鼠一氧化氮合成酶(NOS)Elisa试剂盒操作程序总结】准备试剂,样品和标准品 &&加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟&洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟&洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟&加入终止液&15分钟之内读OD值&计算&&欢迎咨询:,公司主页:&
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以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,中国化工仪器网对此不承担任何保证责任。&小鼠转化生长因子(TGF)ELISA试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。药品名称:通用名:小鼠转化生长因子(TGF)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因子(TGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠转化生长因子(TGF)水平。用纯化的小鼠转化生长因子(TGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子(TGF),再与HRP标记的TGF抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子(TGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠转化生长因子(TGF)浓度。试剂盒组成
20倍浓缩洗涤液
标准品(360ng/L)
酶标包被板
标准品稀释液
样品稀释液
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.&&&&&&&& 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100&l,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50&l,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100&l分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50&l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50&l弃掉,再各取50&l分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50&l分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50&l,混匀后从第七、第八孔中分别取50&l加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50&l,混匀后从第九第十孔中各取50&l弃掉。(稀释后各孔加样量都为50&l,浓度分别为240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)。2.&&&&&&&& 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40&l,然后再加待测样品10&l(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.&&&&&&&& 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。&& 4.&&&&&&&& 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.&&&&&&&& 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.&&&&&&&& 加酶:每孔加入酶标试剂50&l,空白孔除外。7.&&&&&&&& 温育:操作同3。8.&&&&&&&& 洗涤:操作同5。9.&&&&&&&& 显色:每孔先加入显色剂A50&l,再加入显色剂B50&l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.&&&& 终止:每孔加终止液50&l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.&&&& 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。&计算&&以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.&请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(&n&5)。5.&封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。检测范围:10ng/L -300ng/L规格:96人份/盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月厦门慧嘉生物科技有限公司专业代理众多国际生命科学领域的知名品牌。致力于各种、、细胞因子、生物试剂、移液器、耗材的销售推广及服务工作。咨询电话:&&&& 欢迎QQ
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