&您现在的位置：&>&&>&&>&
共有&7&人回复了该问答总氮空白值老是高怎么降下来啊
我做水质分析，总氮空白值老是高，尤其是在220nm处的吸光度高都0.2到0.3之间，有时也0.3几，而275nm处由比较小，矫正后的ΔAbs都0.1几，做了好多试验都没找到原因，在这里请教各位了知道的帮帮忙，先谢谢了
回复于： 20:13:41275nm校准的基本都0.0几，你的太高了。查水和试剂是否有问题我发了个帖子，同事刚开始做也高，后来提纯了过硫酸铵，现在空白合格了
回复于： 15:22:33注意试剂空白，还有仪器检测限是否达到检测要求
回复于： 16:52:43试剂纯度、纯水质量、实验条件等原因往往造成空白试验吸光度偏高，严重影响测定结果的准确可靠,甚至无法测定。
快速回复【花三五分钟，帮别人解决一个问题，快乐自己一天！】
回复于： 16:52:43
试剂纯度、纯水质量、实验条件等原因往往造成空白试验吸光度偏高，严重影响测定结果的准确可靠,甚至无法测定。
回复于： 17:21:39
措施：1.使用试验用水和碱性过硫酸钾试剂不仅要注意其纯度，而且还需注意防尘措施和存放时间，最好现配现用。2.在操作过程中，应严格规范操作，尤其注意消解过程中的消解时间、压力和温度。3.对所有需用的玻璃器皿和其他用具选择适宜的洗涤方法，达到洗净的目的。洗净后用纯水淋洗三次，然后妥善保管以防新的污染。4.保持实验室洁净环境。
回复于： 21:17:31
按《水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法 -- HJ 636―2012 代替GB 11894―89》中的方法测一下氢氧化钠和过硫酸钾的含氮量。
回复于： 22:08:24
改用不含有机物的纯水和上海国药的过硫酸钾试剂，能获得较好的空白试验结果。
回复于： 15:22:33
注意试剂空白，还有仪器检测限是否达到检测要求
回复于： 20:13:41
275nm校准的基本都0.0几，你的太高了。查水和试剂是否有问题我发了个帖子，同事刚开始做也高，后来提纯了过硫酸铵，现在空白合格了
回复于： 14:43:48
原文由 bbhhy(bbhhy) 发表:我做水质分析，总氮空白值老是高，尤其是在220nm处的吸光度高都0.2到0.3之间，有时也0.3几，而275nm处由比较小，矫正后的ΔAbs都0.1几，做了好多试验都没找到原因，在这里请教各位了知道的帮帮忙，先谢谢了过硫酸钾要用进口的试剂，国产的不给力！国产的含氨量太大，影响TN测定。我们实验室都是用进口的，阿拉丁的。以前是德国的，具体牌子不记得了。希望对你有所帮助，呵呵！
问答用户推荐 回答数：0
未解决问题您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
血清总蛋白和白蛋白测定实验方案.doc 4页
本文档一共被下载：
次 ,您可全文免费在线阅读后下载本文档。
下载提示
1.本站不保证该用户上传的文档完整性，不预览、不比对内容而直接下载产生的反悔问题本站不予受理。
2.该文档所得收入(下载+内容+预览三)归上传者、原创者。
3.登录后可充值，立即自动返金币，充值渠道很便利
需要金币：150 &&
血清总蛋白和白蛋白测定实验方案
你可能关注的文档：
··········
··········
血清中总蛋白和白蛋白测定的实验方案血清总蛋白的测定：实验原理??血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。实验器材分光光度计实验试剂??1.6mol/LNaOH溶液称取NaOH240g，溶于新鲜制备的蒸馏水约800ml中，定容至1L，贮于有盖塑料瓶中。??2.双缩脲试剂?称取硫酸铜结晶(CuSO4·5H2O)3g溶于新鲜制备的蒸馏水500ml中，加入酒石酸钾钠(NaKC4H406·4H2O），用以结合Cu2+，防止CuO在碱性条件下沉淀)9g和KI(防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu2O的离析)5g。待完全溶解后，在搅拌下加入6mol/LNaOH溶液100ml，并用蒸馏水定容至1L，置塑料瓶中盖紧保存。此试剂室温下可稳定半年，若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。??3.60～70g/L蛋白质标准液可用定值参考血清或标准白蛋白作标准。实验操作??取试管3支，混匀，置25℃30min或37℃10min，在波长540mm处比色，用空白管调零，测各管吸光度。参考范围??60～80g/L。注意事项??1.黄疸血清，严重溶血，葡萄糖，酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本空白管来消除。但如标本空白管吸光度太高，可影响测定的准确度。??2.高脂血症混浊血清会干扰比色，可采用下述方法消除：取2支带塞试管或离心管，各加待测血清0.1ml，再加蒸馏水0.5ml和丙酮10ml，塞紧并颠倒混匀10次后离心，倾去上清液，将试管倒立于滤纸上吸去残余液体。向沉淀中分别加入双缩脲试剂及双缩脲空白试剂，再进行与上述相同的其他操作和计算。方法评价??1.双缩脲显色反应仅和蛋白质中肽键数成正比关系，与蛋白质的种类、分子量及氨基酸的组成无明显关系，各种蛋白质的显色程度基本相同。??2.本法重复性好，RCV为4%，CCV为3.9%；线性范围为0～140g/L；本法干扰少，并且大多可以避免；使用单一的稳定试剂，操作简便、快速，既适于手工操作，也便于自动化分析，已被推荐为测定血清总蛋白的参考方法。??3.唯一的缺点是灵敏度较低，比酚试剂法低约100倍。但本法的检出限为0.2～1.7g/L，这相当于70g/L的血清3～24μl，已能满足临床生化检验的需要。??4.本法是临床测定血清总蛋白质首选最方便、最实用的常规方法。??5.临床上常见的血清蛋白定量法主要有双缩脲法、临床折射计法、染料结合法、BCA法和免疫比浊法。临床意义血清总蛋白浓度受到血容量变化的影响，脱水时蛋白浓度相对增加，水潴留时则降低。在生理情况下，体位、运动等也可使血蛋白浓度发生轻微变化。1.血清总蛋白浓度升高（1）各种原因失水所致的血液浓缩：如呕吐、腹泻、烧伤、糖尿病酮症酸中毒、急性传染病、急腹症等。（2）网状内皮系统疾病：如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、单核细胞性白血病等；（3）风湿性疾病：如系统性红斑狼疮、多发性硬化。（4）慢性传染病：如结核、梅毒等2.血清总蛋白浓度降低（1）各种原因引起的血清蛋白丢失或摄入不足：如肾病综合征、营养不良、消耗增加；（2）蛋白质合成障碍，如肝脏疾病。血清白蛋白测定血清白蛋白溴甲酚绿法测定实验：实验原理：在pH4．2的缓冲液中，白蛋白作为一种阳离子，结合阴离子染料溴甲酚绿（BCG）形成蓝绿色化合物，在波长630nm处有吸收峰，其吸光度与白蛋白浓度成正比例，与同样处理的白蛋白标准液比较可求得血清中白蛋白含量。实验试剂1、0．5mol／L琥珀酸缓冲贮存液（PH4．0）溶解Na0H?10g琥珀酸56g于800m1蒸馏水中，用1mol／L氢氧化钠调至pH4.1＋0.05加水稀释至1000ml此液置4℃冰箱保存．2、BCG已存液（10mol／L）：溶解BCG（MW＝720.22）1.80g于5m1?Na0H中用蒸馏水稀释至250ml．3、叠氮钠贮存液：溶解叠氮钠40g于1000ml蒸馏水中。4、聚氧化乙烯月桂醚（BYij－35）贮存液溶解2.5g聚氧化乙烯月桂醚于80ml蒸馏水中，加热助溶然后加蒸馏水至10ml．5、BCG试剂：与1L容量瓶中盛蒸馏水约400m1，加琥珀酸缓冲贮存100ml，用吸管准确加入BCG贮存液8．0m1，并用蒸馏水将吸管壁上残留的少量染料冲洗到液体中加叠氮钠25ml，聚氧化乙烯月桂醚25ml最后用蒸馏水稀释到刻度，配好BCG试剂应为4.15土0.05。6、40g／L白蛋白标准应
正在加载中，请稍后...The page is temporarily unavailable
nginx error!
The page you are looking for is temporarily unavailable.
Please try again later.
Website Administrator
Something has triggered an error on your
This is the default error page for
nginx that is distributed with
It is located
/usr/share/nginx/html/50x.html
You should customize this error page for your own
site or edit the error_page directive in
the nginx configuration file
/etc/nginx/nginx.conf.双缩脲试剂的使用方法
双缩脲试剂的使用方法
范文一：斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑斐林试剂与双缩脲试剂的使用释疑王升友(江苏省赣榆县城头中学，222131)中学生物教学，2003年第6期在教学过程中，发现许多学生对于用斐林试剂鉴定可溶性还原糖与用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验中存在着许多疑难问题，为便于学生理解和掌握，现归纳总结如下：1可溶性还原糖鉴定及蛋白质的鉴定原理不同1 1可溶性还原糖鉴定原理可溶性还原糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖等的分子内都含有游离的具有还原性半缩醛羟基，当与新配制的一定浓度的Ｃｕ(ＯＨ)2悬浊液混合后，在加热的条件下，将Ｃｕ(ＯＨ)2还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ沉淀，而还原性糖本身则被氧化为相应的有机酸。以葡萄糖为例的反应式如下：1 2蛋白质的鉴定原理在碱性溶液中，双缩脲能与Ｃｕ2+作用，形成紫色或紫红色的络合物。故双缩脲试剂可鉴定双缩脲的存在，而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键。因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。2斐林试剂与双缩脲试剂的配制与使用不同2 1斐林试剂的配制甲液：质量浓度为0 1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液乙液：质量浓度为0 05ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液使用时临时配制，将4滴～5滴乙液滴入2ｍＬ甲液中，振荡混合均匀后即可使用。2 2双缩脲试剂的配制取10ｇＮａＯＨ放入量筒内加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1ｇ·ｍＬ-1的ＮａＯＨ溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ａ。取1ｇＣｕＳＯ4放入量筒中，加水至100ｍＬ，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.01ｇ·ｍＬ-1的ＣｕＳＯ4溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂Ｂ。使用时，先向试管中加入2ｍＬ试剂Ａ，摇荡均匀，再向试管中加入3滴～4滴试剂Ｂ，摇荡均匀即可。3反应过程中，出现的颜色变化及原因不同3 1用斐林试剂鉴定还原糖的实验因先加入刚配制的Ｃｕ(ＯＨ)2，故溶液变成浅蓝色;加热后，部分Ｃｕ(ＯＨ)2被还原为砖红色的Ｃｕ2Ｏ，因二者混合故呈现棕色;随着反应的继续进行，Ｃｕ(ＯＨ)2被全部还原为Ｃｕ2Ｏ，故而出现砖红色的沉淀。颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。3 2用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验加入双缩脲试剂Ａ，溶液为无色;加入双缩脲试剂Ｂ，因有Ｃｕ(ＯＨ)2生成，故呈现浅蓝色;振荡均匀后，由于反应的进行，出现紫色的络合物。颜色变化为：无色→浅蓝色→紫色。4实验过程中，应熟练掌握的问题4 1斐林试剂为何要现配现用?因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色Ｃｕ(ＯＨ)2沉淀，所以应将甲液、乙液分别配制储存，使用时再临时配制。4.2用斐林试剂鉴定时，为何不能先加入ＮａＯＨ，后加入ＣｕＳＯ4，而必须混合后再加入?因为若先加入ＮａＯＨ，还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入ＣｕＳＯ4后不能产生Ｃｕ2Ｏ沉淀，只有将其先配成Ｃｕ(ＯＨ)2悬浊液，才可产生砖红色沉淀。4 3在做该实验时，为何一般不选用双子叶植物的叶子和单子植物(如韭菜、鸢尾)的叶片?在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储存在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶片作实验材料;在单子叶植物如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的可溶性还原糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此也不选用单子叶植物的叶子。5应注意的问题5 1在使用双缩脲试剂时，为什么要先加入试剂Ａ，后加入试剂Ｂ?先加入试剂Ａ，造成碱性环境，而只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Ｃｕ2+发生颜色反应。5 2若加入试剂Ａ后，为什么只能加入3滴～4滴双缩脲试剂Ｂ，而不能加入过量?因为若加入过量的双缩脲试剂Ｂ，ＣｕＳＯ4在碱性溶液中生成大量的蓝色Ｃｕ(ＯＨ)2沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。原文地址：
范文二：浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用浅议斐林试剂与双缩脲试剂的使用在教学过程中，发现许多同学对于用斐林试剂鉴定可溶性还原糖与用双缩脲试剂鉴定蛋白质的实验中存在着许多疑难问题，为便于学生理解和掌握，现归纳总结如下：1 可溶性还原糖鉴定及蛋白质的鉴定原理不同1．1可溶性还原糖鉴定原理可溶性还原糖如葡萄糖、果糖、麦芽糖等的分子内都含有游离的具有还原性半缩醛羟基，当与新配制的一定浓度的Cu（OH）2悬浊液混合后，在加热的条件下，将氢氧化铜还原为砖红色的氧化亚铜沉淀，而还原性糖本身则被氧化为相应的有机酸。以葡萄糖为例的反应式如下：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2 Cu（OH）2
CH2OH—（CHOH）4—COOH+ Cu2O↓+2H2O1.2蛋白质的鉴定原理在碱性溶液中，双缩脲（H2NOC—NH—CONH2）能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的混合物。故双缩脲试剂可鉴定双缩脲的存在，而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键。因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。2斐林试剂与双缩脲试剂的配制与使用不同2．1斐林试剂的配制甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液使用时临时配制，将4—5滴乙液滴入2mL甲液中，振荡混合均匀后即可使用。2．2双缩脲试剂的配制取10g NaOH放入量筒内加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂A。取1gCuSO4放入量筒中，加水至100mL，待充分溶解后倒入试剂瓶中配制成质量浓度为0.1g/mL的CuSO4溶液，瓶口塞上胶塞，贴上标签，写上试剂B。使用时，先向试管中加入2mLA，摇荡均匀，再向试管中加入3—4滴B，摇荡均匀即可。3反应过程中，出现的颜色变化及原因不同3．1斐林试剂鉴定还原糖的实验因先加入刚配制的Cu（OH）2故溶液变成浅蓝色；加热后，部分Cu（OH）2被还原为砖红色Cu2O，因二者混合故呈现棕色；随反应的继续进行，Cu（OH）2被全部还原为Cu2O，故出现砖红的沉淀。3．2双缩脲试剂鉴定还原糖的实验加入双缩脲试剂A，溶液为无色；加入双缩脲试剂B，因有Cu（OH）2生成，故呈现浅蓝色；振荡均匀后，由于反应的进行，出现紫色的络合物。颜色变化为：无色 → 浅蓝色 → 紫色4实验过程中，应熟练掌握的问题不同4．1在斐林试剂的使用过程中应掌握以下几点：（1）斐林试剂为何要现配现用？因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色的Cu（OH）2沉淀，所以应将甲液、乙液分配配制储存，使用时再临时配制。（2）用斐林试剂鉴定时，为何不能先加入NaOH，还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性，再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O沉淀，只有将其先配成Cu（OH）2悬浊液，才可产生砖红色沉淀。（3）在做该实验时，为何一般不选用双子叶植物的叶片和单子叶植物（如韭菜、鸢尾）的叶片？在双子叶植物，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储存在子叶内，因此最好不用双子叶植物和叶片作实验材料，在单子叶植物如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内集含有大量的可溶性还原糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此也不选用单子叶植物的叶子。4．2双缩脲试剂的使用过程中，应注意的问题：（１）在使用双缩脲时，为什么要先加入试剂Ａ，后加入试剂Ｂ？ （先加入试剂Ａ，造成碱性环境，而只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Cu2+发生颜色反应。）（２）若加入试剂Ａ后，为什么只能加入３—４滴双缩脲试剂Ｂ，而不能加入过量？因为若加入过量的双缩脲试剂Ｂ，CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu（OH）2沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。阅读详情：
范文三：双缩脲试剂（一）实验原理双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速 ，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。（二）试剂与器材1. 试剂：（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4&O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6&O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。2. 器材：可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。（三）操作方法1. 标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。2、样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。阅读详情：
范文四：对两篇涉及双缩脲试剂使用文章的讨论第２ ６卷 第 ５期２ ０年 　 ０１中学 生物学Ｍｉｄｅ Ｓ ｈ ｏ　 ｏｏ ｙ ｄ ｌ　 ｃ ｏ ｌＢｉｌｇＶｏ ．６ Ｎｏ ５ １ 　 ．　 ２ ２ ０ ０ｌ文件 编号 ： ０ ３—７ ８ （０ ０ ０ １０ ５ ６ ２ １ ）５—０ ４ ０ ２—０ 　 ２对 两篇 涉及双缩 脲试剂 使 用文章 的讨论王 源　 （ 苏扬 州 中学教 育集 团树人 学校 江 江苏扬 州 ２５ ０ ） 　 ２ ０ １《 生物学通报）０ ９ ） ０ 年第 ７ ２ 期上一篇文章 ：细胞　 “ 大小与物质运输的关系” 模拟实验的改进探究。笔者非常欣赏作者在新课程倡导探究性学习理念指导下 。 　 引导学 生对 实验进 行 的改进 。 在 原文 ２２中有 这样　 但 ． 的一 段叙 述 ：配制 双 缩 脲试 剂 ： “ 取较 大 的试 管 ， 加入　 双缩脲试剂 Ｂ ０ ５ｇ Ｅ Ｃ Ｓ ４ 　Ｌ 逐滴加人双缩　 （． 　 ｍ 　 ｕ Ｏ ） ｍ ， ０ ／ ２脲 试 剂 Ａ （．ｇｍ 　 ａ Ｈ）开始 观察 到 蓝色 絮 状沉　 ０１ ／ Ｌ Ｎ Ｏ 　 在 久 置之后 ， 会发 生相 同 的分 解 反应 。判 断此 处蓝 色絮状沉淀是不会溶解的， 学生也不能理解氢氧化铜沉　 淀溶解的原因 ， 中学中氢氧化铜是被作为碱性氢氧化　 物的 ， 高中学生只要求知道氢氧化钠与硫酸铜反应生　 成 氢氧化 铜沉 淀 和硫 酸钠 。 　 ２ 其他 相关 问题 的探 究关 于双缩 脲试 剂 的 Ａ液 、 Ｂ液配 制浓 度和 加液顺淀， 再不断滴加双缩脲试剂 Ａ直到沉淀完全溶解 ， 稍　 偏碱性 ，即配制成双缩脲试剂 ”《 （生物学通报）０９ ） ０　 ２ 年０ ７期 Ｐ ８ 。 ３ ）　 １ 对 该篇 文章此 处描 述 的疑 问１１ 对 双缩脲 试 剂的 配制 浓度疑 问 ．序， 也有文章讨论过 ， 生物学通报）０ ７ 如《 ２０ 年第 ７ 期中“ 再谈 斐林 试剂 和双缩 脲试 剂 的应 用” 文 ， 为 在　 一 认 试 验 中“ 只要 注意 用 量 ， 斐林 试 剂 和双 缩 脲试 剂 加 入的顺序和互用都不影响试验结果” 为弄清情况 ， 。 笔者　 也 对该 问题进 行 了一 系列探究 和分析 。２１ 实验 探 究　 ．笔者查阅了人教版、 苏教版、 浙科版高中教材《 生物 １， 》发现人教版、 苏教版 中双缩脲试剂 Ａ液都是质　 量分数 ０ 　 ｍ 　 ａ Ｈ溶液 ， ： ．ｇ ＬＮ Ｏ １／ Ｂ液 质量分数 ０ １ ／Ｅ ．　ｍ 　 ０ｇ ＣＳ ４ ｕ Ｏ 溶液。浙科版未提到浓度。也查 阅了一些高等　 教材 ，都 跟高 中教材 浓度一样 。原文 中 ０ ５ ／ Ｅ ．　ｍ． ０ｇＣＳ 　 ｕ Ｏ 恰好 是斐 林 试剂 乙液 的浓度 ， 处 双缩 脲 试剂　 此 Ｂ的浓度 是 否有不 当？１ 对双 缩脲 试 剂 的加 液 顺序疑 问 ． ２用 蛋 清 稀 释 液 、 ． ｓ 　Ｎ Ｏ ００　 ／ 　 ０１ ／ 　 ｍＥ ａ Ｈ、 ．１ ｇｍＬＣ Ｓ 　００　／ 　 ｕＯ 做 以下 探究 实验 （ １表 ２　 ｕＯ 、．５ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 表 、 ）表 ｌ 双 缩 脲试 剂 不 同加 液 顺 序 和 用■ 鉴定 蛋 白质 的 结 果试管　 滴加 试剂顺序和浓度１ ＩｍＬ ０ １ｓ ｍＬ Ｎａ 　 　 　 ． ／ 　 ＯＨ实验过程 中观察到的现象① 向 ２ｍＬ蛋清稀释液 中加②加 ４滴 ｏ ｌ ＬＣ Ｓ ４ ． ｇｍ 　ｕ ０　 ｏ溶液无明显 变化溶液显 紫色几种教材中给的双缩脲加液顺序都是先加 Ａ液１ Ｅ 苏教 版 ２ｍ 、摇 匀 ， 　 （ ｍ 　Ｅ ， ） 再加 Ｂ液 ４滴 ， 摇匀 。 察　 观 颜 色变化 。而原文 中是先 加 Ｂ， 逐 滴加入 Ａ， 再 且对 现①向 ２ Ｌ ｍ 蛋清稀释液 中加２ ４ 滴 Ｏ０ 　／ 　 ｕ Ｏ　 　 ．１ ｍＬ Ｃ Ｓ ４ ｇ溶液成乳 白色 　 溶液显紫色溶液蓝 色浑浊② 加 １ Ｌｏ 香ｍ 　 ａ Ｈ 　 　． ｍ １ ＬＮ Ｏ①４滴 ＯＯ ｇ ｍ 　 ｕ ０ 和　 ．ｌ／ Ｌ Ｃ Ｓ ４１ 　 ． ｍＬＮａ ｍＬ ０１ 　 ＯＨ 混合３象描述是开始观察到蓝色絮状沉淀 ， 再不断滴加双缩　 脲 试剂 Ａ直到沉 淀完 全溶解 。按 作者叙 述进 行试 验 ， 　 沉淀并不溶解 ，只是 随着 Ｎ Ｏ ａ Ｈ溶液的量越来越多 ， 　 沉淀被稀释。从化学角度分析， 氢氧化钠与硫酸铜反　 应会 出现三种 情况 ， 如果 氢氧化钠较 少 ， 会生 成碱　 式 硫 酸 铜 沉 淀 和 硫 酸 钠 ，反 应 式 ：Ｃ Ｓ ４６ ａ Ｈ＝ ４ Ｕ Ｏ＋ Ｎ Ｏ②将 上述混合液加入 ２ｍ 　 　Ｌ 蛋 清稀释液 中 　 ① ｌ Ｌ０ １ ／ Ｌ Ｃ Ｓ ４ 　 　． 　 ｍ 　 ｕ Ｏ 和　 ｍ ０ｇ１ Ｌ ０１ ｍ 　 ａ Ｈ 混合 　 　 　． ｍ 　 ＬＮ Ｏ振荡后溶液显紫 色　 溶液蓝 色浑 浊４Ｃ ４Ｏ ６ 　，３ 　 Ｏ ； ｕ（ Ｈ） ０ Ｊ Ｎ 　 ｓ ＋ 如果氢氧化钠适 当， 会生成　 氢氧化铜沉淀和硫酸钠 ，Ｎ Ｏ ＋ ｕＯ＝ ｕ Ｏ ２，　 ２ ａ Ｈ Ｃ Ｓ ４Ｃ （ Ｈ）Ｊ 　＋Ｎ ２ 　如果氢氧化钠大大过量且较浓（ Ｏ ， ａ ０； ｓ ≥４ ％）会生　 成 四羟基合铜酸钠溶液和硫酸钠 ，反应式 ： ａ Ｈ 　 ４ Ｏ ＋ Ｎ Ｃ Ｓ ４Ｎ ２ｕ Ｏ ） Ｎ ： 　 ｕ０＝ ａ （ Ｈ ４ ａ Ｏ 。四羟基合铜酸钠是一种　 Ｃ ＋ ， Ｓ 相当不稳定的蓝 白色物质 ， 难溶于水 ， 它只有在碱性②将 上述混合 液加 入 ２ｍ 　 　 Ｌ 溶液 显紫色静置后 下层有　 蛋清稀释液 中 　 约１ ， 色絮 状沉淀　 ２蓝２２ 实验 分 析 和结 论 　 ．从 表 １ 以看 出使 用 ０Ｏ　／Ｌ Ｃ Ｓ ４在 Ｃ Ｓ ４ 可 ．１ ｍ 　 ｕ Ｏ ， ｕ０　 ｇ条件下才能存在 ， 溶液稀释后 ， 它即分解成氢氧化铜和　 氢氧 化钠 ， 应式 ： ａ ｕ Ｏ ４２ ａ Ｈ＋ ｕＯ ２，　 反 Ｎ ２ （ Ｈ） Ｎ Ｏ Ｃ （ Ｈ）Ｊ， Ｃ ＝一量少的情况下 ， 最后溶液都变成紫色 ， 如果 Ｃ Ｓ 　 ｕＯ 量　 大 ， ＮＯ 跟 ａ Ｈ等体积 （ ４号管 ）则最后在紫色溶液 中 ， 　 会有大量沉淀 。先加 Ｃ Ｓ ４ ｕ０ ， 后加 Ｎ Ｏ （ 号管 ）溶　 ａＨ２ ， 液会 由乳 白色再到紫色 。 ｕＯ 和 Ｎ Ｏ Ｃ Ｓ 　 ａ Ｈ混合后加人４ 一　 ２（）第 ２ ６卷第 ５期２１ ０ ０年中 学 生 物 学Ｍｉｄｅ Ｓ ｈ ｏ　Ｂ ｏｏ ｙ ｄ ｌ　 ｃ ｏ ｌ ｉｌｇＶｏ ．６ Ｎｏ５ １ 　 ．　 ２ ２ １　 ００文件 编 号 ： ０ ３—７ ８ （ ０ ０ ０ １０ ５ ６ ２ １ ）５—０ ４ ０ ３—０ 　 ２种植类探究活动设计初探袁 丫丫 张 　 殷　 （ 育部广 西师范大学基 础教 育课 程研 究 中心　 广西桂 林 教 ５ １０ ） ４ ０ ４摘　 要　 种植 类探 究活动 以恰 当的任 务 为 驱动 。 可以很 好地 激 发 学 生的 学 习兴趣 ， 进 学 生主 动建 构　 促 生物 生长相 关知识 ． 帮助 学生 学会提 出问题 、 分析 问题 、 决 问题 。 解关 键 词　 种 植 探 究 活 动　 植 物 生 长中图分 类号Ｑ ４　 一５文献 标识 码Ｂ１ 活 动选 题 的价值 与意 义植者要通过各种办法确保一种生物得 以在适宜的条件　 下正常的生长。养过花草鸟鱼的人都知道这是一件很　 有意思的事情 ， 与此同时也是一项极具挑战性的任务。 　 其次 ， 一个成功 的种植活动可以使参与者对种植　 科 学 与技术 领域 有 一个 深刻 的亲 身体 验 。 正是基 于 这　 种真实的体验 ， 动手种植 的过程才会使得学生对于植　 物或者真菌的生 长相关知识 主动进行建构 。正所谓　 “ 听过的我会忘记 ，看过 的我能记得 ，做过的我才理　 解” 。学生理解植物或真菌生长 的过程正是其知识进　 行 建构 的过 程 。 　 最后 ， 种植 活动 的开 展 实 际上提 供 了一 种真 实 的，对某 一生物 的种 植方 法进 行探 究 ， 理想 的探究　 最状态是重演这一野生物种的驯化过程。 但实际的情况　 却是 学生们 在活 动过 程 中会通 过查 阅资料 、调查 、 访　 谈 等 多种办 法替 代很 多科 学家 当时 的思考 、观察 、 反　 复实验等过程 ， 甚至很多常见生物的种植方法都相 当　 的成熟 ， 种植 者 基本 上可 以按 部就 班 的进行 。 由此看　 来， 似乎种植活动一不小心就可能沦为传统 的验证性　 实验 。通过 亲身 的教 学实 践发 现 ， 经过 精 心设 计 的种植类探究活动不但不会沦为验证性实验 ， 相反却具有　 不可替 代 的生物 教育 价值 与意义 。 　 ．， 　 首先 ， 种植某 一生 物的主题 一旦确 立 ， 际上是一　 实 个任 务驱动类 探究 活动 的开始 。 动的 目标 很 明确 ： 活 种表 ２ 用 斐 林 试 剂 不 同 加 液顺 序 和用 量 鉴 定 蛋 白质 的 结 果问题产生情境。 种植者为了确保生物的正常生长会 自 　 然 而然 的产 生很 多关 于植 物 或 真菌 生长 相关 的问题 ，试 管　 滴加 试 剂 顺 序 和 浓 度实验 过程 中观 察到 的现 象①向 ２ｍ 　 Ｌ蛋清稀释液 中加１ｍＬ Ｏ１ｓ ｍＬ Ｎａ 　 　． ／ 　 ＯＨ１溶液 无明显 变化蛋 白质溶液中（ 、 号管 ）则现象由蓝色浑浊变成紫　 ３４ ， 色。 而按课本介绍先加 Ｎ Ｏ ａ Ｈ后加 Ｃ Ｓ 　１ ｕ Ｏ（ 号管 ）溶　 ， 液直 接变 紫 色 。 　 从表 ２ 可以看出使用 ０ ５／ Ｌ Ｃ Ｓ ４即用斐林　 ． ｇ 　 ｕ０， ０ ｍ试 剂 鉴定 蛋 白质 时 ，最 终 溶 液 中都 出现 蓝 色 絮状 沉　 淀， ＣＳ， 且 ｕ Ｏ 用量 越 多 （ 管 ）溶 液 中蓝 色 絮 状 沉　 ４号 ，②加 ４滴 Ｏ．Ｏｇ ｍ 　ｕ Ｏ　 ｌ ＬＣ Ｓ ４溶液紫 色， 静置后 有少量蓝色 絮状 沉淀① 向 ２ｍ Ｌ蛋 清稀释液 中加４滴 Ｏ０ 　／ 　 ｕ ０ 　 ．５ｇ ｍＬ Ｃ Ｓ ４２溶液成乳 白色②加 １ｍＬＯ１ ／ Ｌ Ｎ Ｏ 　 　．ｓ ｍ 　 ａ Ｈ溶液 浅蓝 色变紫 色， 静置后少量 蓝 色絮 状沉 淀①４滴 ｏ ５／ 　 ｕ Ｏ 和　 ． ｇ ｍＬ Ｃ Ｓ 　 ｏ１ 　 ． ｍ 　 ａ Ｈ混 合　 　 ０１ ＬＮ Ｏ ｍＬ３溶液蓝 色浑浊淀量越多 。 ４ Ｃ Ｓ 　 Ｎ Ｏ 用 滴 ｕ Ｏ 与 ａ Ｈ混合（ 号管 ） 比　 ３ 要 先加 Ｎ Ｏ １ ａ Ｈ（ 号管 ） 或者 先加 Ｃ Ｓ ￣ （ 号 管 ）沉　 ｕＯ 时 ２ ， 淀量 大 。且先 加 Ｃ Ｓ 　后 加 Ｎａ Ｈ（ 管 ）溶 液 会　 ｕ Ｏ， Ｏ ２号 ， 由乳 白色再到紫色。 ｕ Ｏ 和 Ｎ Ｏ ＣＳ 　 ａ Ｈ混合后加人蛋 白 　 质溶液 中（ 、 号管 ）则现象由蓝色浑浊变成紫色。 ３４ ， 　 以上各组实验现象分析 ， 虽然用不 同浓度 ， 同 不 　 加液顺序的氢氧化钠、硫酸铜都可以发生紫色反应 。 　 但实验现象最明显的 、 最有利于学生观察的还应按教　 材给出的浓度和顺序进行操作 ， 否则就会出现中间现象 或最 后有 大量 沉 淀影 响实 验结 果和 学生 的观 察 。 双②将上述 混合液加入 ２ｍ 　 　 Ｌ溶液蓝 色变紫色静置后下　 蛋清稀释 液中　 层有 约 １ ／ 色絮状沉淀　 ４蓝 ① １ 　． 　／ Ｌ Ｃ Ｓ ４ 　 ００ ｇｍ 　 ｕ Ｏ 和　 ｍＬ ５１ｍＬ Ｏ １ ／ 　 ＯＨ 混 合 　 　 　 ． ｇ ｍＬ Ｎａ４溶液蓝 色浑浊② 将上述 混合液加入 ２ｍ 　 　 Ｌ 溶液蓝 色变紫色静置后下　 蛋清稀释液中　 层有 约 ３５蓝 色絮状 沉淀　 ／缩脲 的配制和使用还是教材 中所给的浓度和加液顺　 序最恰 当 。阅读详情：
范文五：对两篇涉及双缩脲试剂使用文章的讨论《生物学通报》2009年第7期上一篇文章：“细胞大小与物质运输的关系”模拟实验的改进探究。笔者非常欣赏作者在新课程倡导探究性学习理念指导下，引导学生对实验进行的改进。但在原文2.2中有这样的一段叙述：“配制双缩脲试剂：取较大的试管，加入双缩脲试剂B(0.05g/mL CuSO4)2mL，逐滴加入双缩脲试剂A(0.1g/mL NaOH)开始观察到蓝色絮状沉淀，再不断滴加双缩脲试剂A直到沉淀完全溶解。稍偏碱性，即配制成双缩脲试剂”(《生物学通报》2009年07期P38)。1　对该篇文章此处描述的疑问1.1　对双缩脲试剂的配制浓度疑问笔者查阅了人教版、苏教版、浙科版高中教材《生物1》，发现人教版、苏教版中双缩脲试剂A液都是质量分数0.1g/mL NaOH溶液，B液：质量分数0.01g/mLCuSO4溶液。浙科版未提到浓度。也查阅了一些高等教材，都跟高中教材浓度一样。原文中0.05g/mLCuSO4恰好是斐林试剂乙液的浓度，此处双缩脲试剂B的浓度是否有不当?1.2　对双缩脲试剂的加液顺序疑问几种教材中给的双缩脲加液顺序都是先加A液1mL(苏教版2mL)，摇匀，再加B液4滴，摇匀。观察颜色变化。而原文中是先加B，再逐滴加入A，且对现象描述是开始观察到蓝色絮状沉淀，再不断滴加双缩脲试剂A直到沉淀完全溶解。按作者叙述进行试验，沉淀并不溶解，只是随着NaOH溶液的量越来越多。沉淀被稀释。从化学角度分析，氢氧化钠与硫酸铜反应会出现三种情况，如果氢氧化钠较少，会生成碱式硫酸铜沉淀和硫酸钠，反应式：4CuSO4+6NaOH=Cu4(OH)6SO4↓+3Na2SO4；如果氢氧化钠适当，会生成氢氧化铜沉淀和硫酸钠，2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2↓+Na2SO4；如果氢氧化钠大大过量且较浓(≥40％)，会生成四羟基合铜酸钠溶液和硫酸钠，反应式：4NaOH+2uSO4=NaO2Cu(OH)4+NaO2O4。四羟基合铜酸钠是一种相当不稳定的蓝白色物质，难溶于水，它只有在碱性条件下才能存在，溶液稀释后，它即分解成氢氧化铜和氢氧化钠，反应式：Na2Cu(OH)4=2NaOH+Cu(OH)O2↓，在久置之后，会发生相同的分解反应。判断此处蓝色絮状沉淀是不会溶解的，学生也不能理解氢氧化铜沉淀溶解的原因，中学中氢氧化铜是被作为碱性氢氧化物的，高中学生只要求知道氢氧化钠与硫酸铜反应生成氢氧化铜沉淀和硫酸钠。2　其他相关问题的探究关于双缩脲试剂的A液、B液配制浓度和加液顺序，也有文章讨论过，如《生物学通报》2007年第7期中“再谈斐林试剂和双缩脲试剂的应用”一文，认为在试验中“只要注意用量，斐林试剂和双缩脲试剂加入的顺序和互用都不影响试验结果”。为弄清情况，笔者也对该问题进行了一系列探究和分析。2.1　实验探究用蛋清稀释液、0.1g/ml NaOH、0.01 g／mLCuSO4、0.05g/ml CuSO4做以下探究实验(表1、表2)2.2　实验分析和结论从表1可以看出使用0.01g/ml CuSO4，在CuSO4量少的情况下，最后溶液都变成紫色，如果CuSO4量大，跟NaOH等体积(4号管)，则最后在紫色溶液中会有大量沉淀。先加CuSO4，后加NaOH(2号管)，溶液会由乳白色再到紫色。CuSO4和NaOH混合后加入蛋白质溶液中(3、4号管)，则现象由蓝色浑浊变成紫色。而按课本介绍先加NaOH后加CuSO4(1号管)，溶液直接变紫色。从表2可以看出使用0.05g/mL CuSO4，即用斐林试剂鉴定蛋白质时，最终溶液中都出现蓝色絮状沉淀，且CuSO4用量越多(4号管)，溶液中蓝色絮状沉淀量越多。用4滴CuSO，与NaOH混合(3号管)要比先加NaOH(1号管)或者先加CuSO4时(2号管)，沉淀量大。且先加CuSO4，后加NaOH(2号管)，溶液会由乳白色再到紫色。CuSO4和NaOH混合后加入蛋白质溶液中(3、4号管)，则现象由蓝色浑浊变成紫色。以上各组实验现象分析，虽然用不同浓度，不同加液顺序的氢氧化钠、硫酸铜都可以发生紫色反应。但实验现象最明显的、最有利于学生观察的还应按教材给出的浓度和顺序进行操作，否则就会出现中间现象或最后有大量沉淀影响实验结果和学生的观察。双缩脲的配制和使用还是教材中所给的浓度和加液顺序最恰当。对两篇涉及双缩脲试剂使用文章的讨论王　源《生物学通报》2009年第7期上一篇文章：“细胞大小与物质运输的关系”模拟实验的改进探究。笔者非常欣赏作者在新课程倡导探究性学习理念指导下，引导学生对实验进行的改进。但在原文2.2中有这样的一段叙述：“配制双缩脲试剂：取较大的试管，加入双缩脲试剂B(0.05g/mL CuSO4)2mL，逐滴加入双缩脲试剂A(0.1g/mL NaOH)开始观察到蓝色絮状沉淀，再不断滴加双缩脲试剂A直到沉淀完全溶解。稍偏碱性，即配制成双缩脲试剂”(《生物学通报》2009年07期P38)。1　对该篇文章此处描述的疑问1.1　对双缩脲试剂的配制浓度疑问笔者查阅了人教版、苏教版、浙科版高中教材《生物1》，发现人教版、苏教版中双缩脲试剂A液都是质量分数0.1g/mL NaOH溶液，B液：质量分数0.01g/mLCuSO4溶液。浙科版未提到浓度。也查阅了一些高等教材，都跟高中教材浓度一样。原文中0.05g/mLCuSO4恰好是斐林试剂乙液的浓度，此处双缩脲试剂B的浓度是否有不当?1.2　对双缩脲试剂的加液顺序疑问几种教材中给的双缩脲加液顺序都是先加A液1mL(苏教版2mL)，摇匀，再加B液4滴，摇匀。观察颜色变化。而原文中是先加B，再逐滴加入A，且对现象描述是开始观察到蓝色絮状沉淀，再不断滴加双缩脲试剂A直到沉淀完全溶解。按作者叙述进行试验，沉淀并不溶解，只是随着NaOH溶液的量越来越多。沉淀被稀释。从化学角度分析，氢氧化钠与硫酸铜反应会出现三种情况，如果氢氧化钠较少，会生成碱式硫酸铜沉淀和硫酸钠，反应式：4CuSO4+6NaOH=Cu4(OH)6SO4↓+3Na2SO4；如果氢氧化钠适当，会生成氢氧化铜沉淀和硫酸钠，2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2↓+Na2SO4；如果氢氧化钠大大过量且较浓(≥40％)，会生成四羟基合铜酸钠溶液和硫酸钠，反应式：4NaOH+2uSO4=NaO2Cu(OH)4+NaO2O4。四羟基合铜酸钠是一种相当不稳定的蓝白色物质，难溶于水，它只有在碱性条件下才能存在，溶液稀释后，它即分解成氢氧化铜和氢氧化钠，反应式：Na2Cu(OH)4=2NaOH+Cu(OH)O2↓，在久置之后，会发生相同的分解反应。判断此处蓝色絮状沉淀是不会溶解的，学生也不能理解氢氧化铜沉淀溶解的原因，中学中氢氧化铜是被作为碱性氢氧化物的，高中学生只要求知道氢氧化钠与硫酸铜反应生成氢氧化铜沉淀和硫酸钠。2　其他相关问题的探究关于双缩脲试剂的A液、B液配制浓度和加液顺序，也有文章讨论过，如《生物学通报》2007年第7期中“再谈斐林试剂和双缩脲试剂的应用”一文，认为在试验中“只要注意用量，斐林试剂和双缩脲试剂加入的顺序和互用都不影响试验结果”。为弄清情况，笔者也对该问题进行了一系列探究和分析。2.1　实验探究用蛋清稀释液、0.1g/ml NaOH、0.01 g／mLCuSO4、0.05g/ml CuSO4做以下探究实验(表1、表2)2.2　实验分析和结论从表1可以看出使用0.01g/ml CuSO4，在CuSO4量少的情况下，最后溶液都变成紫色，如果CuSO4量大，跟NaOH等体积(4号管)，则最后在紫色溶液中会有大量沉淀。先加CuSO4，后加NaOH(2号管)，溶液会由乳白色再到紫色。CuSO4和NaOH混合后加入蛋白质溶液中(3、4号管)，则现象由蓝色浑浊变成紫色。而按课本介绍先加NaOH后加CuSO4(1号管)，溶液直接变紫色。从表2可以看出使用0.05g/mL CuSO4，即用斐林试剂鉴定蛋白质时，最终溶液中都出现蓝色絮状沉淀，且CuSO4用量越多(4号管)，溶液中蓝色絮状沉淀量越多。用4滴CuSO，与NaOH混合(3号管)要比先加NaOH(1号管)或者先加CuSO4时(2号管)，沉淀量大。且先加CuSO4，后加NaOH(2号管)，溶液会由乳白色再到紫色。CuSO4和NaOH混合后加入蛋白质溶液中(3、4号管)，则现象由蓝色浑浊变成紫色。以上各组实验现象分析，虽然用不同浓度，不同加液顺序的氢氧化钠、硫酸铜都可以发生紫色反应。但实验现象最明显的、最有利于学生观察的还应按教材给出的浓度和顺序进行操作，否则就会出现中间现象或最后有大量沉淀影响实验结果和学生的观察。双缩脲的配制和使用还是教材中所给的浓度和加液顺序最恰当。阅读详情：
范文六：再谈斐林试剂和双缩脲试剂的应用维普资讯 生物学通报２０ ０ ７年 第 ４ ２卷 第 ７ 期再谈 斐林试 剂 和双缩脲 试剂 的应用李　 华　（ 阳 第八中 　湖 岳 市 学 南岳阳 ４ ０ ） １０ 　 ４０摘 要　 在 中学 生物 学教 学 中斐林 试 剂 用 于 生物 组 织 中还 原糖 的 鉴 定， 加 热 的 条 件 下会 产 生 砖 红　 在 色的 Ｃ 　 沉 淀 ； 缩脲 试 剂 用 于生 物 组 织 中蛋 白质 的 鉴 定 ， 果 产 生 紫 色络 合 物 ， 紫 色现 象 生成 。 ｕ０ 双 结 有 　 但 两 者 的化 学 成 分 都 是 Ｃ Ｓ 　 Ｎａ ， 者 通 过 实验 探 究发 现 ， 实验 中只要 注 意 用 量 ， 剂 加 入　 ｕＯ 和 ＯＨ 笔 在 试 的顺 序 和 互 用 都 不 影 响 实验 结 果 。 　 生 物 学 是 一 门 实 验 科 学 ， 验 教 学 是 生 物 教 学 的　 实重 要 内容 ． 培 养 学 生 动 手 能 力 、 造 能 力 、 造 性 思　 是 创 创 维 和 发 散 性思 维 的重 要 手 段 。教 师 应尽 可 能 多地 让 学察 、 验 操 作 、 学 思 维 等方 面 能力 的 发 展 ， 能 促 进　 实 科 也 学 生 尊 重事 实 ． 持 真理 的科 学 态 度 的形 成 。 坚 　 连 续 ３年 ． 者 带 领 学 生 开 展 了 以 “ 林 试 剂 和　 笔 斐双 缩 脲 试 剂 应 用 的 探 究 ” 题 的研 究 性 实验 。 为 　 １ 实验 的设 计 和 实 验 结 果生 参 与 实验 和其 他 实 践 活 动 ， 及研 究 性 学 习活 动 ， 以 要　 让 学 生 亲 自动 手 ， 临 其境 。通 过 这 些 实践 活动 ， 助　 身 帮 学 生 更 好 地 理 解 和 掌 握 相 关 知 识 ，有 利 于 他 们 在 观表 １ 还 原 糖 的 鉴 定 实 验试 管　 １ 号２ 号　 ３ 号　 ４ 号　 ５ 号第 １次 加 入 物　 ２ ｍ 　 ． ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ Ｈ２ ｍ 　 ． ｇ ｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ Ｈ 　 ２ｍ 　 Ｌ苹 果 汁　 ２ ｍＬ ０ ０ 　 ／ 　 ｕ ０ 　 　 　 ． ５ ｇ ｍＬ Ｃ Ｓ ４ ２ ｍＬ ０ ０ 　 ／ Ｌ Ｃ Ｓ ４ 　 　 ．５ ｇ ｍ 　 ｕ Ｏ第 ２次 加 人 物　 ２ｍＬ００ 　／ 　 ｕ Ｏ　 　 　 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４２ｍ 　 Ｌ苹 果 汁　 ２ ｍＬ ０ １ ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 　． ／ 　 ａ Ｈ 　 ２ｍ 　 Ｌ苹 果 汁　 ２ ｍＬ ０ １ｇ ｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 　． ／ 　ａＨ第 ３次 加 人 物　 ２ｍＬ苹 果 汁２ ｍＬ ００ 　 ／ Ｌ Ｃ Ｓ ａ 　 　 ．５ ｇ ｍ 　 ｕ Ｏ 　 ２ ｍＬ ００ 　 ／ 　 ｕ ０ 　 　 　 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４ ２ ｍ 　 ． ｇ ｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ Ｈ 　 ２ｍ 　 Ｌ苹 果 汁加 热　 加 热加 热　 加 热　 加 热　 加 热颜 色 变 化　 砖 红 色砖 红色　 砖 红 色　 砖 红 色　 砖 红 色６ 号　 ７ 号２ｍＬ苹 果 汁　 　 ２ｍＬ苹 果 汁２ ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 　． ／ 　ａＨ 　 ２ｍＬ ０ １ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 　 　． ／ 　ａ４ ００　 ／ 　 ｕ Ｏ 滴 ．５ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 ４ 　 ．１ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 Ｎ ＂ ００　 ／ 　 ｕ Ｏ加 热　 加 热砖 红 色　 砖 红 色８ 号９ 号２ｍ 　 Ｌ苹 果 汁２ ｍＬ苹 果 汁２ｍＬ ０１ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 与 ２ｍＬ ００ ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 合　 　 　． ／ 　ａ 　 　 　 ．５ ／ 　 ｕ Ｏ 混２ ｍＬ ０．　ｇ ｍＬ Ｎａ 　 　 １ ／ 　 ＯＨ　 ２ ｍＬ ０． ５ ｇ ｍＬ Ｃｕ Ｏ 　 　 ０ 　 ／ 　 Ｓ加 热加 热砖 红 色不 变２ ｍＬ ０ １ ｇｍＬ ＨＣ　 　 　． ／ 　 １８号 试 管 ： ２ｍＬ ０１ｇｍＬ的 Ｎ Ｏ 与 ２ｍＬ００　／ 将 　 　． ／ 　 ａＨ 　 　　５ｇｍＬ的 Ｃ Ｓ 　 合 ， 夜 后 颜 色 变 成 黑 色 （ 化 生 成 了 氧 化 铜 Ｃ Ｏ） 分 别 在 １　 、４ｈ、 ｕＯ 混 过 氧 ｕ ， ２ｈ ２　 　 ３　 ４　 ６ 　 ７ 　 ６ｈ、８ｈ、０ｈ、２ｈ将 其 与 苹 果 汁加 热 ， 能 产 生 砖 红 色 沉 淀 。 都表 ２ 蛋 白 质 的 鉴 定 实 验试 管１ 号第 １次 加 入 物２ｍ 　 Ｌ蛋 白 稀 释 液第 ２次 加 入 物２ ｍＬ ０ １ ｇ ｍＬ Ｎａ 　 　 　 ． ／ 　 ＯＨ第 ３次 加 入 物４ ００　 ／ Ｃ Ｓ 　 滴 ． １ ｇｍＬ ｕ Ｏ颜 色 变 化紫 色２ 号　 ３ 号　 ４ 号２ｍＬ蛋 白 稀 释 液　 　 ４ ００　 ／ Ｌ Ｃ Ｓ 　 Ｎ　 ．１ｇｍ 　 ｕ Ｏ ２ｍＬ ０ １ｇｍ 　 Ｏ 　 　 　 ． ／ Ｌ Ｎａ Ｈ４ ０叭 ｇｍＬ ｕ Ｏ 滴 ． ／ Ｃ Ｓ　 ２ｍＬ蛋 白 稀 释 液　 　 ２ｍＬ蛋 白稀 释 液２ｍＬ ０１ｇｍＬ ａ Ｈ 　 　． ／ Ｎ Ｏ 　 　 ２ｍＬ ０１ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 　 ． ／ 　 ａＨ 　 ４ ０叭 ｇｍ 　 ｕ Ｏ 滴 ． ／ＬＣ Ｓ乳 白 色 变 紫 色　 乳 白 色 变 紫 色　 紫 色５ 号６ 号　 ７ 号８ 号２ｍＬ ０１ｇｍ 　 Ｏ 　 　 　 ． ／ Ｌ Ｎａ Ｈ４ ０叭 ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 滴 ． ／ 　ｕ Ｏ ２ ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 　． ／ 　ａＨ２ ｍ 　 ． ｇ ｍＬ Ｎ ＯＨ 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ４ ００　 ／ 　 ｕ Ｏ Ｎ　 ．１ｇｍＬ Ｃ Ｓ２ ｍ 　 ． ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ 　 　 ４Ｎ　 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 ＇ ００　 ／ 　 ｕ Ｏ２ ｍ 　 ．５ ｇ ｍＬ Ｃ Ｓ ４ 　 Ｌ ００　 ／ 　 ｕ ０２ ｍＬ蛋 白稀 释 液２ｍ 　 Ｌ蛋 白 稀释 液　 ２ｍ 　 Ｌ蛋 白 稀 释 液２ ｍＬ蛋 白 稀 释 液浅 蓝 色 变 紫 色浅 蓝 色 变 紫 色　 浅 蓝 色 变 紫 色浅 蓝 色９ 号　 １ 号　 ０２ ｍ 　 ． ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ 　 　 ２ｍＬ蛋 白 稀 释 液２ ｍ 　 ．５ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４ 　 Ｌ ００　 ／ 　 ｕ ０　 ２ ｍ 　 ． ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 　 Ｌ０１ ／ 　 ａ２ｍ 　 Ｌ蛋 白 稀 释 液　 ４ ００　 ／ 　 ｕ ０　 Ｎ　 ．１ｇｍＬ Ｃ Ｓ ４浅 蓝 色　 紫 色８号 试 管 ： 入 Ｎ Ｏ 至 一 定 量 时 ， 色 由浅 蓝 色 变 紫 色 。 加 ａＨ 颜 　 ９号 试 管 ： 水 稀 释 ， 能 变 成 紫 色 ， 终 有 蓝 色 沉 淀 物 出 现 。 加 不 始 　 １ ０号 试 管 ： 入 Ｈ １颜 色 由 紫 色 变 成 乳 白 色 ． 加 入 Ｎａ 到 一 定 量 时 又 变 成 紫 色 。 加 Ｃ， 再 ＯＨ维普资讯 ２０年 第 ４ ０７ ２卷 第 ７期生物学通报４　 ７表 ３ 还 原 糖 鉴 定 实 验 材 料 的 实 验实 验 材 料　 ５ｍＬ甘 蔗 汁　 　 ５ｍＬ马 铃 薯 汁　 　 ５ｍＬ 白萝 ｈ汁　 　 ５ｍＬ红 薯 汁第 １ 加 入 物　 次 ２ｍＬ０． ｇｍＬ Ｎ ＯＨ 　 　 １ ／ 　ａ 　 　 ２ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 ． ／ 　 ａ Ｈ　 　 ２ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 ． ／ 　 ａ Ｈ　 　 ２ ｍＬ０ １ｇｍＬ Ｎ Ｏ 　 　 ． ／ 　 ａ Ｈ第 ２次 加 入 物　 ５ Ｏ０　 ／ 　 ｕ Ｏ 滴 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 ５ Ｏ０　 ／ 　 ｕ Ｏ 滴 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 ５ Ｏ０　 ／ 　 ｕ Ｏ 滴 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ 　 ５ Ｏ０　 ／ 　 ｕ Ｏ 滴 ．５ ｇｍＬ Ｃ Ｓ加 热　 加 热　 加 热　 加 热　 加 热颜 色 变 化　 砖 红 色　 不 产 生 砖 红 色　 砖 红 色　 砖 红 色白 萝 汁 产生 的砖红 色冷却 后变 成酱红 色 。２实 验 得 出 的 结 论试 剂 并 加 热 ， 实 能 产 生砖 红 色 沉 淀 。原 因是 ． 缩脲　 确 双① ２种 试 剂 在 实 验 中 加 入 的 顺 序 没 有 严 格 要 求 ，不会 影 响 实 验 效 果 。试 剂 Ａ与 双 缩脲 试 剂 Ｂ混 合 生 成 Ｃ （ Ｈ）Ｃ （ Ｈ）会　 ｕＯ 　 ｕＯ 　 ， 被 葡 萄 糖 还 原 成 氧 化 亚 铜 （ ｕ０ ， 验 可 以 得 到 此 现　 Ｃ ２）实象 。所 以 ， 项 也 能 得 出 题 干 中所需 的结 果 。 Ｄ② ２种 试 剂 在 实 验 中 可 以互 用 ． 只是 保 证 量 的使用要求 。例 ３ 下 列 关 于 教 材 中实 验 一 操 作 步 骤 的叙 述 中 。 ．正 确 的是 （ 　 ）　 。③ ２种 试 剂 必 须 在碱 性 环 境 下 ，才 能 达 到 实验 的预期 效 果 ，蛋 白质 的鉴 定 实 验 对 碱 性 环 境 的 要 求 更　 且高一 些 。Ａ． 于 鉴 定 可 溶 性 还 原 糖 的 斐 林 试 剂 甲 液 和 乙　 用 液 ． 直接 用 于 蛋 白质 的鉴 定　 可 Ｂ 脂 肪 的鉴 定 需 要 用 显 微镜 才 能 看 到被 染 成 橘 黄　 ．色 的 脂 肪滴　 Ｃ 鉴 定 可溶 性 还 原 糖 时 。 加 入 斐 林 试 剂 甲液 摇　 ． 要 匀 后 ． 加 入 乙液　 再 Ｄ． 于鉴 定 蛋 白质 的双缩 脲 试 剂 Ａ液 与 Ｂ液 要 混　 用④还 原糖 的实验 材料要 求不 高 ， 甘 蔗 、 萝 卜 像 白和红 薯 等 都 能用 。 但是 ， 好 的材 料 还 是 苹 果 和 梨 。 最 一　 般 不 宜 用 甘 蔗 和 红 薯 。 为 甘 蔗 含 蔗 糖 较 多 、 薯 含　 因 红 淀粉较多， 蔗糖 和 淀粉 都 是 非 还 原 糖 。 白萝 卜 糖 量 低　 含 也 不 宜用 。 马铃 薯 不 能 用 。 　 ３ 现 实 的 情 况　 教材 和教 师 教 学用 书上 对 此 实 验 的操 作 要 求 提 得　 很严 格 。 以在教 学实 践 中 和大 量 的教 辅 资料 上 就 出现　 所 了类似 的要 求 ．并 以此 编 出 了 大 量 的相 关 例 题 和 练 习　 题 ， 至 高考 试 卷 中也 出 现 了相 关 的试 题 。 这 些 题 目 甚 而 　 的答 案大 都是经 不 起 实验 的检 验 的 。现列举 几 例 如下 。 　 例 １ （ ０ ５年 广 东 高 考 卷 第 １ ．２ ０ ３小 题 ） 物组 织 中 生 　 还原 糖 、 肪 和 蛋 白质 ３种 有 机 物 的鉴 定 实验 中， 下　 脂 以 操作 错 误 的是 （生砖 红 色 沉 淀　 Ｂ 只有 脂 肪 的 鉴 定需 要 使 用 显 微 镜　 ． Ｃ 用 双 缩脲 试 剂 检测 蛋 白质不 需 要 加 热　 ． Ｄ 使 用 斐 林 试 剂 和 双 缩 脲 试 剂 最 好 是 现 配 现 用　 ．合均 匀后 ， 加入 含 样 品 的试 管 中 。 必 需现 混现 用　 再 且 原 题 给 出 的答 案 为 Ｂ。如 果 按 照 此 题 去做 实验 ，　 ４ 个 答 案 都 是 正 确 的 ， 题 只 能 改 成 多 选 题 。Ａ 选 项 中 此只 要 是 按 照 鉴 定 还 原 糖 的 比例 用 斐 林 试 剂 去 鉴 定 蛋白质 同样 会 产 生 紫 色 。此 题 是 有 要 学 生 死 记 硬 背 教 材　 的 实验 内容 之 嫌 。 　 例 ４ 在 用 双 缩 脲 试 剂 鉴 定 蛋 白质 实 验 时 ， 确 的　 ． 正 操作是 （ 　 ）　 。Ａ． ｍＬ蛋 白稀 释 液 ， 加 ０ １ｇｍＬ的 Ｎ Ｏ 再 加　 ２ 　 再 ． ／ 　 ａ Ｈ，３ ４滴 ００　 ／ ～ ．１ｇｍＬ的 Ｃ Ｓ 　 ｕＯ）　 。Ａ． 溶 性 还 原 糖 的 鉴 定 ， 用 酒 精 灯 直 接 加 热 产　 可 可Ｂ ２ ｍＬ蛋 白 稀 释 液 ，再 加 ３ ４滴 ００　 ／ ．　 ～ ． １ｇｍＬ的　 Ｃ Ｓ ４再 加 ０ １ｇｍ ｕ Ｏ， ． ／ Ｌ的 Ｎ Ｏ 　 　 ａＨＣ２ｍ． Ｌ蛋 白稀 释 液 ， 时加 入 ０ １ｇｍ 　 同 ． ／ Ｌ的 Ｎ Ｏ 　 　 ａＨ和 ００　 ／ Ｌ的 Ｃ Ｓ 　 合 液　 ．１ｇｍ ｕＯ 混 Ｄ ．在 Ｎ ０ 和 Ｃ Ｓ 　 合 液 中加 入 ２ ｍ ａＨ ｕＯ 混 　 Ｌ的 蛋 白稀 释 液原 题 的 解 析 ： 案 为 Ａ。选 项 Ｂ、 Ｄ 正 确 ， 择　 答 Ｃ、 选Ａ， 可溶 性 还 原 糖 的 鉴 定 ， 该 是 水 浴 煮 沸 加 热 。 应笔 者 通 过 实 验 证 明 ， 溶 性 还 原 糖 的 鉴 定 可 用 酒　 可 精 灯 直 接 加 热 产 生 砖 红 色沉 淀 。 样 效 果 明 显 操 作 简　 这 单并能节约时间。 ３个 小 实验 一 节课 做 完 时 间很 紧 ， 稍　 不 注 意 就 完不 成 ， 酒 精 灯 直 接 加 热 就 能 保 证 时 间 ， 用 而　 且 效果 明显 。 学 做 实 验 往 往 都 是 直 接 加 热 ， 大 以前 医 院　 检 测糖 尿 时也 是 采 取 加 热 的方 式 。 　 例 ２ 下 列 实验 中 能生 成 砖 红 色 沉 淀 的是 （ ． 　 Ａ． 萄 糖 ＋ 缩 脲 试 剂　 葡 双Ｂ果 糖 ＋ 林 试 剂　 ． 斐此 题 给 出 的答 案 是 Ａ ，但 每 一 个 选 项 在 实 验 时都　 能 达 到 实 验 预 期 的 结果 ， 只是 Ｄ答 案 定 量 更 严 密 。 　 例 ５在鉴 定还原糖 的实验 中 ， 入 斐林试 剂时 ， ． 加 　 必 须要 （ 　 ）　 。 Ａ． 加 斐 林 试 剂 甲液 ， 加 斐 林 试 剂 乙 液　 先 后 Ｂ 先加 斐林 试 剂 乙液 ． 加 斐 林 试 剂 甲液　 ． 后 Ｃ 将 斐林 试 剂 甲 液 和 乙液 混 合 后 加 入　 ． Ｄ． Ｂ、 Ａ、 Ｃ都 正确　 此 题 给 出 的答 案 为 Ｃ， 但是 通 过 实 验验 证 答 案应 选取 Ｄ。）　 。Ｃ 葡萄 糖 ＋ 林 试 剂 并 加 热　 ． 斐 Ｄ 葡 萄 糖 ＋ 缩 脲 试 剂 并加 热　 ． 双 原题 给 出 的答 案 为 Ｃ。 葡萄 糖 溶 液 中加 入 双 缩脲例 ６鉴 定 黄豆 组织 中存 在蛋 白质 时 ． 向试 管 内注　 ． 先入 ２ｍ 　 Ｌ黄 豆组 织 样 液 ：然 后 向试 管 内加 入 ２ｍ 　 Ｌ双 缩维普资讯 ４　 ８生物学通报２０ ０ ７年 第 ４ ２卷 第 ７ 期高 中生物学新课 改教 学 的“ ＂ “ ＂ 实 与 活朱 禾 勤　（ 省 市 江苏 丹阳 第五中 　江 学 苏丹阳 １ ０） 　２ ３ 　 ２０摘 要　 课 堂教 学 的 关键 问题 是 效 益 ， 新课 改教 学要 正 确 处理 “ ” “ 活 与 实” 关 系 ， 现教 学 目标 的　 的 体 导 向性 、 学 内容 的 选择 性 、 师讲 解 的启 发 性 和 学 生 自主 学 习的 有 效性 。 教 教关 键 词　 新课 程　 教 学效 益　 活 动性　 实 效性课 堂 教学 的关 键 问题 是 效 益 。如何 确立 效 益 优 先　 的课 堂 教 学观 ， 正 让 学 生 “ ”来 、 活 ” 来 ， 充　 真 动 起 “ 起 既学生“ 解题 ” 否 达到 “ 是 下笔 如有 神 ” 的境 界 。这种 以“ 求　 实” “ 、 求稳 ” 主要 特 征 的教学 目标 ， 明显 的不 足就 在　 为 其于学 生学得 太 “ ” 太 封 闭 。新课 改 教学 的 出发 点和 最　 死 ，分 发 挥 教 师 的 主 导 作 用 ，又 充 分 体 现 学 生 的 主 体 地　 位 。 而 达 到 教 与 学 的优 化 匹 配 ， 是 新 课 改 教 学 的　 从 这生 命 之 所 在 。如 果 忽 视 了教 学 的 目标 性 和 实效 性 ， 形　 式 上 热 热 闹 闹 ， 际上 乱 哄 哄 ， 讲 的没 有 讲 清 楚 ， 实 该 该　 听 的 没 有 听 清 楚 ， 样 的课 堂 就 难 以达 到 新 课 改 的 教　 这 学 目标 了 。 此 ， 何 正 确 处 理好 “ ” “ ” 关 系 ， 因 如 实 与 活 的 　 真正体现 课堂教学 的灵活 性 、 效性 ， 实 已成 为 新 课 改教 学 中不 可 忽 视 的 一个 问题 。 　 １ 准 确 定 位 ． 现 教 学 目标 的 导 向性　 　 体终 目标 都 是 “ 生 对 知识 的掌 握 程 度 和 能力 发 展 的 程　 学 度” 。因此 ， 堂教学 不 仅要 看 教 师讲 得好 不好 、 动 多　 课 活 不 多 ．更重 要 的是要 看 学生 学 到 了什 么或 学得 好不 好 。 　 这 就在 于是 否 真正做 到 尊重 学 生 的主 体地 位 ， 促进 学生　 各项 潜 能 的发展 。 　 “ 胞 的 增 殖 ” 一 节 主要 是 让 学 生 掌 握植 物 细 胞　 细 这 有 丝 分裂 的相 关 知识 。过 去 ，教师 运 用 的 教学 方 法 很教学 目标是 教学 活动 的 出发点 和归 宿 。 教学 活 动 中多 ， ： 师讲解 、 型演示 、 媒体课件动态展示等 ， 如 教 模 多 　 但 教 学效 果 并 不理 想 。分 析 这种 现象 ， 主要 原 因是没 有从 学 生 的 角度 去 研 究 问题 ， 生 的 主动 性 调 动不 够 ， 学 对　 微 观 细胞 缺 乏感 性认 识 ， 分 裂过 程 缺乏 知识 梳理 。针　 对 对 这 种 现 象 在 新 课 改 教 学 中教 师 首 先 应 指 导 学 生 自 　 学 。 显微 镜 观 察有 丝 分 裂 装 片 ， 用 多媒 体 课 件 把 动　 用 并 态 的分 裂过 程 展 现 出 来 ，让 学 生 对植 物细 胞 的有 丝 分?． ．． ?‘ ． ?●．‘ ‘学 生学 到什 么 、 到 什 么 ， 是 任何 教 学 都 必须 追 问和　 得 这考 虑 的问题 。 同样 ， 这也 是新课 改 背景下 ， 物学 课堂 教　 生学必 须研 究 的 问题 。在传 统 的教学 观 念 中 ， 学 目标 主　 教 要 是 追求 “ 基 ” 双 的落 实 ， 主要看 教 师对 知 识 的讲解 是 否到位 、 透彻 ， 堂容 量 是 否 足够 大 、 息 量 是否 足 够 多 ， 课 信●?． ． ‘ ●．ｔ ‘ ． ? … ．ｔ． ． ． ．．． ．●．．? ．‘‘ ．．１．．．??．＿●． ‘ ●ｔ ．?‘．●ｔ ＿ ●… ．● ． ＿●． ??．‘●… ?●．．． ●… ??．‘●．‘? ＿＿．?Ｉ１●．．－?．． ? ● ? … ．．‘??．１ ? ??． －?… ●．‘ ? ? ? ‘． ? ‘ ? ．．?．｜●．．??… ??．＿ ?．‘●?．??‘‘●? －’．‘．?＿??． ．? ．?．‘ ｔ ●．＿? ．． ?．? ? ? ?… ．? ．?．１ ? ． ● ● ? ● ． ． ●脲试 剂 Ａ． 匀 ： 向试 管 内加入 ３ ４滴 双 缩 脲试 剂 Ｂ　 摇 再 — ， 摇 匀 。为什么 只加 入 ３ ４滴双 缩脲 试剂 Ｂ不 能过 量 ？ ～ 答写试题考学生。案 ： 入过 量 双缩脲 试剂 Ｂ， ｕ Ｏ 在 碱性 溶液 中生 成大　 加 Ｃ Ｓ三 是 编 题 与 实验 脱 节 。有 的 教 师 、 的编 题 者 ， 有 没　 有 亲 自做 实 验 ， 只在 书 本 上 和 黑 板 上 做 实 验 ， 到 题　 拿量 蓝 色的 Ｃ （ Ｈ）沉 淀 ， 遮 蔽所 产 生的紫 色 。 ｕＯ 　 会此 题 的 答 案 是 不 科 学 的 ， 入 过 量 的 双 缩 脲 试 剂　 加目就 让 学 生练 。 编者 不 断 传 抄 试 题 ， 播 广 泛 。 传５ 思 考Ｂ， 是 因 为 生 成 了 大 量 的 蓝 色 的 Ｃ （Ｈ） 蔽 了 所　 不 ｕＯ 　遮 产 生 的 紫 色， 而是 不 能 产 生 紫 色 。 色 是 Ｃ 　 蛋 白质　 紫 ｕ与 （ 健 ） 成 络 合 物 而 产 生 的 颜 色 ， ｕ Ｏ 　 难 溶 的　 肽 形 Ｃ （ Ｈ） 是蓝 色沉 淀 物 ， 碱性 条件 下 ， ｕ Ｏ ） 因 与 蛋 白质 形 成　 在 Ｃ （ Ｈ　 络 合 物 不 断 被 溶 解 不 再 呈 蓝 色 ，而 显 紫 色 。 过 多 的Ｃ Ｓ 　 要 是使 环 境 的 碱性 程度 降低 ，从 而不 能 形 成　 ｕＯ 主 络 合 物 ， 以无 紫 色 出现 ， 见 蓝 色 。 所 只求新 、 异 、 变是 一 个 创 新 人 才 必 备 的 品 质 。在　 求 求 教 学 中 ， 师 应 该 教 育学 生 严 格 按 照 实验 要 求 和 操 作　 教 程 序 去 做 ， 养 学 生 良好 的 品 质 。如 ， “ 证 酶 的催　 培 在 验化 作 用 受 温 度 和 酸 碱 度 影 响 ” 实 验 时 ， 先 加 入 淀　 的 首粉 溶 液 ， 加 酸 或碱 ， 造 酸 性 或碱 性 的 环 境 ， 后 加　 再 创 然 酶 ， 与 酸 碱 绝 不能 颠 倒 秩 序 。 是 ， 是 所 有 的 实 验　 酶 但 不笔 者 在 书 刊 市 场 看 到 的 高 中 生 物 学 教 辅 资 料 和高 考 复 习 资 料 中经常 有 类 似 的试 题 出 现 。 　 ４ 问题 产 生 的 原 由 　 　 是 教学 的程 序 化 。教 师 严 格 按 照教 材 和 教 师 教一都 得 按 照 教 材 上 的操 作 程 序 严 格 不 能 动 。如 果都 是严　 格 照 本 宣 科 ， 格 按 照 书本 上 的 实 验 要 求 和 实 验 操 作　 严程 序 去做 就 不利 于培 养 创 造 型 人 才 。 　 笔 者 带领 学 生 利用 科 技 活 动 时 间 ， “ 对 斐林 试 剂 和　 双缩 脲 试 剂 的 应用 ” 行 了 ３年 的实 验探 究 ， 出 了一　 进 得 些实 验结 果 。希望 在此 与广 大 生物 学教 师共 同探讨 。 　 主 要 参考 文 献Ｉ 李 华 ， 八 生 ．对 斐 林 试 剂 和 双 缩 脲 试 剂 应 用 的 探 究 ． 物 学 通　 　 许 生学 用 书 的 要 求 进 行 实 验 与 教 学 ， 教 育 学 生 要遵 照 实　 并验 的科 学性 和 严 密 性 ， 格 规 范操 作 程 序 ， 能 越 轨 ， 严 不 　 书上 要 求 如 此 ． 不 能非 此 。 就二 是 缺 乏 创 造 性 实 验 能力 的培 养 。教 师 没 有 充 分　 去 进 行 创 造 性 的实 验 ， 有 去探 究 每 个 实 验 的 本 质 ， 没 凭　 着 自己 的思 维 惯 性 和逻 辑 惯 性 去 进 行 实 验 教 学 ， 编　 去报 ，０ ５７：７ ４ ． ２ｏ （） — ８　 ４（ ｍａｌ ｌ ｕ ５ ７ ６ ．ｏ 　 Ｅ— ｉ：ｉ ａ ８ ＠１ ３ｔ ｍ） ｈ（ Ｚ） Ｂ阅读详情：
范文七：对斐林试剂和双缩脲试剂应用的探究２００５年第４０卷第７期生物学通报４７对斐林试剂和双缩脲试剂应用的探究李华１许八生２（１岳阳市第八中学湖南岳阳４１４０００２岳阳市第六中学湖南岳阳４１４０００）人教社新版高中第１册教材中有《生物》“实验一生物组织中可溶性还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定”的实验。可溶性还原糖用斐林试剂鉴定，蛋白质用双缩脲试剂鉴定。斐林试剂与双缩脲试剂都是由甲液（ＮａＯＨ）和乙液（ＣｕＳＯ４）组成，参加鉴定反应时，却是以不同的反应物身分出现。但是，它们是否可以互换？在使用时是否可以颠倒加入的顺序等？为此笔者做了实验探究，现简述如下供大家探讨。的探究“鉴定还原糖实验中斐林试剂的使用”１对验过程中，生物组织样液、甲液和乙液的加入顺序无严格要求。结论２：从６号￣８号试管的反应结果得出，利用斐林试剂鉴定还原糖的存在，关键是要有Ｃｕ（ＯＨ）２存在，还原糖在加热的条件下，与Ｃｕ（ＯＨ）２反应生成砖红色的Ｃｕ２Ｏ沉淀。并且，双缩脲试剂可以替代斐林试剂。结论３：从９号试管与其他试管的反应结果比较得出，反应的环境应是碱性环境，如果在酸性环境中，则会使Ｃｕ（ＯＨ）２溶解。表１第１次加入物第２次加入物第３次加入物加热颜色变化加热砖红色１．１使用斐林试剂鉴定还原糖实验的原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、试管果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团（游离１号醛基或游离酮基），因此叫做还原糖。用斐林试剂能检验生物组织中还原糖存在。斐林试剂由甲液（质量浓度为０．１ｇ／ｍＬ的ＮａＯＨ溶液）和乙液（质量浓度为０．０５ｇ／ｍＬ的ＣｕＳＯ４溶液）配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Ｃｕ（ＯＨ）２沉淀。Ｃｕ（ＯＨ）２与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Ｃｕ２Ｏ沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下：ＣＨ２ＯＨ—（ＣＨＯＨ）４—ＣＨＯ＋２Ｃｕ（ＯＨ）２→ＣＨ２ＯＨ—（ＣＨＯＨ）４—ＣＯＯＨ＋Ｃｕ２Ｏ↓＋２Ｈ２Ｏ２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ苹果汁２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ苹果汁２ｍＬ苹果汁２号２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ３号２ｍＬ苹果汁２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４加热砖红色２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４加热砖红色２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ加热砖红色２ｍＬ苹果汁加热砖红色４号２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４５号２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ６号７号８号＊２ｍＬ苹果汁２ｍＬ苹果汁２ｍＬ苹果汁２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ４滴０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４加热砖红色４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４加热砖红色用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）［１，２］。中介绍，“斐林试１．２问题的提出《教师教学用书》剂的配制：甲液：质量浓度为０．１ｇ／ｍＬ的ＮａＯＨ溶液。乙液：质量浓度为０．０５ｇ／ｍＬ的ＣｕＳＯ４溶液。使用时临时配制，将４￣５滴乙液滴入２ｍＬ甲液中，配完后立即使用。”教材中讲，“使用时‘必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用，切勿分别加入生物组织样液中进［３］行检测’”。２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ与２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４混合加热砖红色９号２ｍＬ苹果汁２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ＋２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＨＣｌ加热不变＊８号试管：将２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬ的ＮａＯＨ与２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬ的ＣｕＳＯ４混合，过夜后颜色变成黑色。分别在１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ、６０７２ｈ将其与苹果汁加热，都能产生砖红色沉淀。ｈ、２究对的探“鉴定蛋白质的实验中双缩脲试剂的使用”使用双缩脲试剂鉴定蛋白质的原理鉴定生物组２．１织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为０．１ｇ／ｍＬ的ＮａＯＨ溶液和质量浓度为０．０１ｇ／ｍＬ的ＣｕＳＯ４溶液。在碱性溶液（ＮａＯＨ）中，双缩脲（Ｈ２ＮＯＣ—ＮＨ—ＣＯＮＨ２）能与Ｃｕ２＋作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。双缩脲试剂的配制：试剂Ａ，质量浓度为０．１ｇ／ｍＬ的ＮａＯＨ溶液。试剂Ｂ，质量浓度为０．０１ｇ／ｍＬ的Ｃｕ－ＳＯ４溶液（蓝色）［４］。２．２问题的提出但是，在实验过程中，我们先加入苹果汁，再加入甲液，最后加入乙液，加热后产生砖红色沉淀。其颜色的变化是：深蓝色→橙黄色→砖红色（沉淀）。通过实验的操作和观察思考，我们对教科书中的产生了疑问。于是，笔者萌生了对“切勿分别加入”“斐林试剂使用”的探究的欲望。１．３探究的方法步骤笔者设计实验方案，对苹果汁、甲液、乙液等变化秩序分别进行实验，具体操作和结果如表１。实验结论通过实验探究，得出如下结论。结论１：从１号￣５号试管的反应结果得出，在实１．４４８表２试管第１次加入物第２次加入物生物学通报２００５年第４０卷第７期第３次加入物颜色变化１号２号２ｍＬ蛋白稀释液２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４紫色２ｍＬ蛋白稀释液４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ乳白变紫色乳白变紫色蛋白质稀释液、双缩脲试剂Ａ和Ｂ在实验过程中加入的秩序是否可以改变？问题２：双缩脲试剂能用斐林试剂代替吗？问题３：加入过多的硫酸铜溶液是不能产生紫色，还是紫色被蓝色覆盖了？２．３探究的方法步骤笔者对各种试剂的加入顺序、成分和量的变化，以及反应环境等诸多因素作了设计，并进行实验，具体操作和结果如下表２。２．４结论通过实验得出如下结论：结论１：从１号￣６号试管的实验结果得出，生物组织样液（蛋白稀释液）和双缩脲试剂的加入顺序没有严格的定式，是可以变化的。结论２：从７号试管的实验结果得出，斐林试剂可以替代双缩脲试剂，但使用时要注意，硫酸铜溶液不能加得太多。结论３：从８号￣９号试管的实验结果得出，紫色不是被蓝色覆盖。结论４：从１０号试管的反应结果得出，利用双缩脲试剂鉴定蛋白质，一定要在碱性环境中进行。参考文献１２３４人民教育出版社生物室．高中生物第１册教师用书．北京：人民教育出版社．２００３．人民教育出版社生物室．全国普通高级中学教科书生物１册．北京：人民教育出版社．２００３．贾文俊，王小凤．斐林试剂与双缩脲试剂的比较．中学生物教学，３号４号５号４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ蛋白稀释液２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ蛋白稀释液４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４紫色２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ蛋白稀释液浅蓝变紫色浅蓝变紫色浅蓝变紫色６号４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ蛋白稀释液７号２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ蛋白稀释液８号＊２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ蛋白稀释液浅蓝色９号＊＊２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ２ｍＬ０．０５ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４２ｍＬ蛋白稀释液浅蓝色１０号＊＊＊２ｍＬ蛋白稀释液２ｍＬ０．１ｇ／ｍＬＮａＯＨ４滴０．０１ｇ／ｍＬＣｕＳＯ４紫色＊８号试管：加入ＮａＯＨ至一定量时，颜色由蓝色变成紫色。＊＊９号试管：加水稀释，不能变成紫色，始终有蓝色沉淀物出现。＊＊＊１０号试管：加入ＨＣｌ，颜色由紫色变成乳白色，再加ＮａＯＨ又变成紫色。问题１：在实验过程中，先在含蛋白质的溶液中加入等体积的ＮａＯＨ溶液，混合均匀后，再滴几滴ＣｕＳＯ４溶液（量较少）。即先后加入ＮａＯＨ和ＣｕＳＯ４溶液。如果在ＮａＯＨ中滴几滴ＣｕＳＯ４溶液混合后，再加入到含蛋白质的溶液中，混合液中就没有Ｃｕ，显色反应就不会发生。２＋［４］２００４（１０）：３８．刘红伟．斐林试剂和双缩脲试剂能否混用的剖析．生物学教学，２００４（９）：４４—４５．（ＢＺ）!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!植物生物学特性研究获重要突破被认为是用来欺骗热带雨林下大量苍蝇为它传粉从而实现远者的传粉综合症群”。然而，对老虎须的传粉生物学和交配系统的研究却发现，近日，中科院西双版纳热带植物园的两项科研成果被国际著名的植物学杂志《美国植物学报》（ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｏｔａｎｙ）以封面文章形式发表。李庆军研究员与该园海外咨询专家、美国国家自然历史博物馆Ｗ．ＪｏｈｎＫｒｅｓｓ博士等合作完成的姜科（Ｚｉｎｇｉｂｅｒａｃｅａｅ）山姜属（Ａｌｐｉｎｉａ）植物的分子系统学研究比较全面地重建了这一姜科植物中最大、同时其属下的分类处理也是最为混乱的热带植物演化关系。该研究运用ＤＮＡ序列分析方法，对现有的形态学分类系统进行了比较，建立了一个新的山姜属植物分类系统。同时，结合花部形态和开花行为，初步探讨了花柱卷曲性异交机制的起源与演化，这一研究成果发表在今年第１期上。《美国植物学报》张玲副研究员等青年科技人员研究了箭根薯科（Ｔａｃｃａｃｅａｅ）植物老虎须（Ｔａｃｃａｃｈａｎｔｒｉｅｒｉ）的传粉生物学特性及其交配系统，对传统的理论（即不同的植物即便亲缘关系很远，但“传粉综合症”如果它们共享同一类群的传粉昆虫为其传粉，那么它们繁殖器官的形态特征就会趋于一致）提出了挑战。老虎须是热带丛林中的下层草本植物，具有非常独特的花和花序形态，包括紫色甚至近黑色的花及苞片，长而飘逸的胡须状小苞片（老虎须由此得名），但却不分泌花蜜，第１朵产生的花粉量很少而且不容易被访花昆虫获取。这些花部特征都交的目的，因而老虎须也被划分为“靠散发腐臭气味欺骗传粉与传统的假设相反，尽管老虎须在花的结构和展示上投入了大量的资源、具有夸张的形态结构，但它的有性生殖几乎不需要借助传粉动物，而是依靠自花授粉，而且很大程度上是自主完成的。因此，仅凭花的形态特征而不进行野外的传粉生物学观察和交配系统的研究，就来判断某植物或植物类群属于哪一传粉综合症群在很多时候是武断甚至错误的。这一研究成果发表在刚刚出版的《美国植物学报》２００５年第３期。摘自《科学时报》２００５年６月３日上海科学家在粳稻育种中实现超高产突破上海市农业科学院的科学家近日表示，已育成两种优质超高产晚粳新品种，最高６６６．６ｍ２产量高达７７０ｋｇ。据介绍，新品种米质优，分别有８～９项指标达到农业部颁布的优质食用米一级标准，其中决定稻米口感的直链淀粉含量、糊化温度、胶稠度等３项关键指标表现最为突出。已通过上海市作物品种审定委员会的审定。据统计，两个新品种在苏浙沪３地目前已累计推广近８．６７万ｈｍ２，共增产优质稻谷５６００多万ｋｇ。摘自《科学时报》２００５年６月２日阅读详情：
范文八：关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”使用规则的实验探究关于“斐林试剂”和“双缩脲试剂”替代使用的实验探究——以高中生物第一册教材实验一为例毛彬彬
(湖南省平江县第四中学
414511)高中生物（必修·人教版）第一册教材P.17中的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验中对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了如下要求：（1）用斐林试剂鉴定还原糖时，必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用，切勿分别加入生物组织样液中进行检测。（2）用双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先向蛋白稀释液中加入A液（2mL），摇荡均匀，再加B液3~4滴。从上述实验操作要求看，使用斐林试剂时必须先将甲液和乙液混合后加入组织样液中；而使用双缩脲试剂时必须先加A液（NaOH溶液）后加B液（CuSO4溶液）；两种试剂不能替代使用。而且，有的资料认为，在双缩脲反应中，先加CuSO4溶液后加NaOH溶液，产生的Cu(OH)2的蓝色会掩盖紫色反应。但是笔者在教学中发现，许多学生在未按上述操作要求的情况下也可以出现明显的颜色反应。针对此问题笔者在实验教学过程中，指导学生对以下3个问题进行了初步的探究：（1）斐林试剂分先后加入对结果是否有影响？（2）双缩脲试剂能否不分先后，或先混合后加入对结果是否有影响？（3）斐林试剂和双缩脲试剂能否相互替代使用？1实验探究实验目的：探究“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用实验材料：苹果组织样液
蛋清稀释液斐林试剂
甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)
乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)双缩脲试剂
A液(0.1g/mL的NaOH溶液)
B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)1.1 可溶性还原糖与斐林试剂和双缩脲试剂的反应1.1.1实验步骤：（1）取六只洁净试管分别加入2mL苹果组织样液，编号为①~⑥。（2）①号管加甲液和乙液的混合液；②号管先加甲液，后加乙液；③号管先加乙液，后加甲液；④号管加A液和B液的混合液；⑤号管先加A液，后加B液；⑥号管先加B液，后加A液（试剂用量标准：甲液、A液均为2mL；乙液、B液均为4滴。以下同）。（3）振荡试管，使溶液混合均匀，沸水浴2min，观察溶液颜色变化。1.1.2 实验结果及结论。6组实验现象基本相同，振荡后溶液呈蓝色，在煮沸过程中溶液逐渐变棕色，最后生成砖红色沉淀。④⑤⑥号管的蓝色较浅，与B液的浓度较低有关。从上述实验现象与结果可以看出：（1）双缩脲试剂用于还原糖的鉴定时与使用斐林试剂的现象相同；（2）NaOH溶液与CuSO4溶液的加入可不分先后，与混合后加入的最终效果一致。1. 2 蛋白质与双缩脲试剂和斐林试剂的反应1.2.1 实验步骤。（1）取6只洁净试管分别加入2mL蛋清稀释液，编号为①~⑥。（2）①号管先加A液，后加B液；②号管先加B液，后加A液；③号管加A液和B液的混合液；④号管先加甲液，后加乙液；⑤号管先加乙液，后加甲液；⑥号管加甲液和乙液的混合液。（3）振荡摇匀，观察溶液颜色的变化。1.2.2 实验结果及结论：①③④⑥号管现象相同，溶液变紫色；②⑤号管先出现乳白色沉淀，后沉淀消失，溶液变紫色。①②③管颜色较浅，与B液的浓度较低有关。从上述实验现象与结果可以看出：（1）斐林试剂用于蛋白质的鉴定时与使用双缩脲试剂的最终现象相同；（2）蛋白液中先加CuSO4溶液时出现乳白色沉淀，再加入NaOH溶液后溶液同样变紫色；（3）双缩脲试剂先混合后加入也同样能使蛋白液变紫色。2 实验结果分析为什么会出现上述结果呢？笔者认为可从以下几个方面来分析：2.1 从试剂的成分看斐林试剂和双缩脲试剂所含溶质成分相同（都含有NaOH和CuSO4），而且NaOH溶液的浓度相同；不同的是CuSO4溶液的浓度（斐林试剂中CuSO4浓度较高）。所以两套试剂替代使用不影响反应物的成分，且用斐林试剂比用双缩脲试剂时的颜色要深。2.2 从试剂的用量看上述实验中所用试剂用量参考教学参考资料，根据化学方程式2NaOH+CuSO4==Cu(OH)2↓+Na2SO4可以知道：斐林反应中，2mL甲液与4滴（约0.2mL）乙液反应，NaOH约过量0.195g；双缩脲反应中，2mLA液与4滴B液反应，NaOH约过量0.199g。两个反应都是在碱性条件下进行的。因此，两套试剂替代使用及先后加入都满足反应的条件（即碱性环境）。2.3 从实验原理看斐林反应的原理是：加热条件下，还原性糖在碱性溶液中能还原Cu(OH)2成Cu2O砖红色沉淀，本身被氧化成葡萄糖酸。因此，在斐林反应中，NaOH溶液和CuSO4两种试剂分先后加入不影响Cu(OH)2生成，也就不会影响Cu2O砖红色沉淀的出现。双缩脲反应的原理是：双缩脲是由两分子尿素缩合成的，在碱性溶液中能与Cu作用，形成紫色的络合物。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。在该反应中，蛋白质与Cu形成更稳定的络合物，促使形成的Cu(OH)2释放Cu2+转化为络合物。因此，NaOH溶液和CuSO4先混合生成的Cu(OH)2在加入蛋白液中后会转化成更稳定的紫色络合物。因此，两套试剂替代使用不影响反应最终产物的生成。2.4 从反应的过程看在蛋白质溶液中加入CuSO4出现乳白色沉淀，是蛋白质遇重金属盐的变性反应，但变性反应中只影响蛋白质的空间结构，不改变肽键的结构，在加入NaOH后形成的碱性环境中仍可发生络合反应。因此，先加CuSO4后加NaOH不影响反应中紫色络合物的最终生成。综上所述，笔者认为，在不改变实验条件和试剂用量的前提下，在鉴定可溶性还原糖和蛋白质时“斐林试剂”和“双缩脲试剂”可以替换使用，而且不需要考虑试剂的添加顺序。主要参考资料：1
人民教育出版社生物室编著.生物第一册.人民教育出版社,.2
人民教育出版社生物室编著.生物第一册教师教学用书.人民教育出版社,. 3
聂剑初.吴国利等合编.生物化学简明教程.第二版.北京:高等教育出版社,. 2+2+阅读详情：
范文九：双缩脲试剂配置(一) 方法学评价试验 双缩脲试剂配置摘要目的：掌握双缩脲法的试剂的配置，并熟悉和掌握分光光度计的使用方法
掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理与操作方法：标准管法测物质含量的方法、双缩脲法测定蛋白质含量的方法、双缩脲反应法结果：成功的配置双缩脲试剂，血清总蛋白的量是38.27g/l.结论：能够按照正确的方法配置双缩脲试剂，并测定出血清总蛋白量。英文翻译Abstract
Master configuration Biuret reagent，and
Familiar with and
master the use of the spectrophotometer。Master
the principle
and operation of the determination of
proteins by
Method。Methods
Standard tube method to measure the material content，Double deflation urea method for the determination of protein
content and Biuret reaction.Result
configuration of biuret reagent Successfully ,The serum total
protein amount of 38.27g/l.Conclusion We can use the correct way to configured Biuret reagent,
and we know determination of serum total protein.关键词： 双缩脲法
血清总蛋白前 言双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色 络合物，此反应即为双缩脲反应。含有两个或两个以上肽键的化合物都具有双缩脲 反应。蛋白质含有多个肽键，在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色化合物。其颜色深浅与蛋白质的浓度成正比，可以用比色法进行测定，这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。1.材料和方法1.1材料 硫酸铜（CuSO4·5H2O）、酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O）、KI固体
NoOH晶体 标准蛋白质溶液
可见光分光光度计、钥勺、试管、烧杯、
玻璃棒、旋涡混合器1.2 方法（操作过程）（1）6mol/L NaOH溶液25ml：用烧杯称取NaOH 6 g，量取蒸馏水25 ml加
入烧杯溶解NaOH，备用。（2）双缩脲试剂，称取以0.75克硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶于新鲜制备的500ml的蒸馏水，加入2.25克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），【用于结合Cu2+,用于防止CuO在碱性条件下沉淀】并加入KI 1.5g【防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu2O的离析】，等到完全溶解后，在搅拌下加入6g/lNaOH溶液25ml，并用水定容到250ml，放置塑料瓶中盖紧保存。（3）取三支试管按下表进行操作试管号
测定管T血清（mL） 0 0 0.06标准蛋白（mL） 0 0.06 0蒸馏水（mL） 0.06 0 0双缩脲试剂（mL） 3 3 3旋涡混合器摇匀，37℃水浴10分钟,后用分光光度计于540nm波长处比色，以空白管调零点，测得各管吸光度。2.结果标准管是0.185，待测管是0.118，
血清总蛋白（g/l）=Au/As x C标准（g/l）=0.118/0.185x60g/l=38.27g/l3、讨论3.1 实验结果讨论3.1.1 我的结果是：S / Abs. T=0.185/0.118=1.568/与参考范围接近，说明实验误差不是很大本次实验的结果参考范围应该是Abs. S≈0.140 – 0.160，Abs. T≈0.090 – 0.110， Abs. S / Abs. T≈ 1.5,对部分同学结果进行讨论：3.1.2 同学甲 Abs. S=0.259，Abs. T=0.211，此同学的结果偏大，原来是该同学加样的是误把蛋白质标准溶液加了0.1ml.把双缩脲试剂加5ml，做实验不够认真和细心。3.1.3 同学乙 Abs. S=0.088，Abs. T=0.061，这个同学的结果偏低，是他加样的时候，由于加样枪的枪头已经部分老化，封密性不够好，导致加的蛋白质标准溶 液不够0.6ml。以后做实验时候一定要注意实验仪器造成的误差。3.1.4同学丙 Abs. S=0.113，Abs. T=0.096,是由于此同学在操作加样枪的时候，按针筒的时候用力过度，导致每一次加样都是超过0.6ml，是操作不规范造成的实验误差。3.2
实验过程中的讨论3.2 .1 加试剂时候按不同的顺序会出现不同的溶液颜色的变化。实验中，加的试剂要先硫酸铜结晶（CuSO4·5H2O）溶于新鲜制备的蒸馏水，然后加酒石酸钾钠（NaKC4H4O6·4H2O，接着加KI，班上有同学是加了硫酸铜结晶CuSO4·5H2O）然后加KI，最后才加酒石酸钾钠（NaKC4H4O6·4H2O，结果颜色是咖啡色，变成咖啡带绿色，实验需要重新做，3.2 .2 加入的氢氧化钠是为了提供碱性环境，向试剂中加入碘化钾，是为了
延长试剂的使用。3.2 .3 蛋白质定量测量方法除双缩脲法外,还有如下几种测定方法：寿凯氏定氮
法、紫外吸收法、folin-酚试剂法、考马斯亮蓝法。 4.方法学评价双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物，在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。优点：双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质，操作简单、快捷。既适合手工操作，又适合自动化分析，重复性好、线性关系好， 双缩脲试剂可以长期保存（ 若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制）。缺点：灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。5.临床意义：
用双缩脲法测定蛋白质含量，假如血浆蛋白质浓度增高，临床上主要见于因各种原因引起的血浆浓缩；假如血浆蛋白浓度降低，临床上主要见严重肝病、肾病、营养不良、血液稀释等，对有关疾病的早期诊断预后观察具有一定的参考价值。参考文献[1] 叶应妩, 王毓三. 全国临床检验操作规程[M] . 第2 版. 南京: 东南大学出版社,～156.[2] 赵丽丽,等. 不受高脂血症影响的双缩脲试剂[ J].临床检验杂志, . [3] 刘新光，临床检验生物化学实验指导[M].第一版.高等教育出版社，3.阅读详情：
范文十：双缩脲试剂(AB液)北京雷根生物技术有限公司
双缩脲试剂(AB液)简介：双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法，双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色。所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例，可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。双缩脲试剂(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B组成，如组织里含有蛋白质或具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。该试剂是较为粗略的验证蛋白质存在的方法，多用于定性检测蛋白质。组成：操作步骤(仅供参考)：1、 先将Biuret Reagent A 3ml加入待测样品3ml，振荡均匀，以便产生碱性环境。2、 加入2~3滴Biuret Reagent B，振荡均匀，如果组织里含有蛋白质或具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。3、 如果想采用分光光度计或酶标仪测定，应于540nm波长处的吸光值，如无540nm，520～562nm之间的波长也可，根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。注意事项：1、 待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果发现检测效果不佳，，颜色会随着时间的延长不断加深。显色反应也会随温度升高而加快。2、 检测中发现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。阅读详情：