融合蛋白会被细菌酶类药物水解吗

蛋白质被酶水解和酶被水解有什么区别为什么?酶被水解能成氨基酸而蛋白质被酶水解成多肽.酶不就是蛋白质吗?为什么这两个问题答案不一样?还有“酶被水解”这句话是酶被什么水解?
国安必胜zoP1
这个问题我们讨论一下吧.① 大部分酶都是蛋白质,还有一些是RNA.② 酶被水解能成氨基酸而蛋白质被酶水解成多肽:这句话应该是在不同的语境下,一般如果单独说水解一般指的是强酸或者强碱条件下的降解;而蛋白质被酶水解成多肽,一般蛋白水解酶只能将蛋白质降解成短多肽,因为蛋白酶一般都有特定的酶切位点,所以很难将20种氨基酸组成的蛋白质充分酶解成氨基酸.③ 还有“酶被水解”这句话是酶被什么水酶因为是蛋白,所以可能被其他蛋白水解酶降解,也可以在强酸强碱中被水解成氨基酸;如果是RNA,则会被RNA酶降解.百度教育团队【海纳百川团】为您解答.
你好,请问强酸或者强碱条件下的降解会使酶变成氨基酸吗》如果不在前面的条件下就不会成为氨基酸吗?而在被其他蛋白水解的条件下就只能变成多肽吗?总结的说是水解分为两种情况一种是强酸或者强碱条件另一种是被其他蛋白水解的条件下而第一种条件往往在只给出水解这两个字的语境中而第二种条件它会在语境中特别指出是被蛋白酶水解对吗?
强酸强碱也需要一定的时间并且需要沸煮的情况下才能将蛋白完全水解成氨基酸。
要将一个蛋白完全水解成氨基酸,需要多种蛋白酶共同作用。
总结的说是水解分为两种情况一种是强酸或者强碱条件另一种是被其他蛋白水解的条件下而第一种条件往往在只给出水解这两个字的语境中而第二种条件它会在语境中特别指出是被蛋白酶水解对吗:这个其实不用考虑这么多的,你只需要明白,蛋白质水解的最终产物是氨基酸就OK。
但是题目中没说最终产物是什么只是问水解后会得到什么?我该怎样回答
如果只是这样的话,那就回答氨基酸吧。
高中问题应该不会考虑的这么复杂。
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扫描下载二维码蛋白酶是蛋白质结构,那么它会不会把自身水解掉?
胃蛋白酶在对蛋白质或多肽进行水解时,具有一定的氨基酸序列特异性,倾向于水解氨基端或羧基端为芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)或亮氨酸的肽键.蛋白质通过多肽链的盘绕折叠形成其特定的空间结构时,有些氨基酸残基在蛋白质的表面,而有些氨基酸残基隐藏在蛋白质的内部.其规律往往是疏水性氨基酸残基在蛋白质内部,亲水性氨基酸残基在蛋白质表面.而苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸和亮氨酸就属于疏水性氨基酸.这些氨基酸残基形成特定的空间结构时都隐藏在胃蛋白酶内部了,所以胃蛋白酶不能将自身水解.
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不会,酶具有特异性,水解对象需要有特殊的高级结构
扫描下载二维码rna水解酶的本质是什么?酶都能被蛋白酶水解而失去活性吗?
酶的化学本质是RNA,这样的酶不被蛋白酶水解、对于化学本质是蛋白质的酶,蛋白质也不一定能全部水解!
DNA水解酶的本质又是什么呢?
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扫描下载二维码细菌的生物化学试验 - 实验交流 - 生物秀
标题: 细菌的生物化学试验
摘要: [细菌的生物化学试验]各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,主要有以下几类。一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验
(1)原理:不同种类细菌含有发酵不同糖(醇…… [关键词:细菌 发酵 葡萄糖 培养基 孵育 生物化学 乳糖]……
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,主要有以下几类。一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验
(1)原理:不同种类细菌含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶,因而对各种糖(醇、苷)类的代谢能力也有所不同,即使能分解某种糖(醇、苷)类,其代谢产物可因菌种而异。检查细菌对培养基中所含糖(醇、苷)降解后产酸或产酸产气的能力,可用以鉴定细菌种类。
(2)方法:在基础培养基中(如酚红肉汤基础培养基pH7.4)加入0.5~1.0%(w/v)的特定糖(醇、苷)类。所使用的糖(醇、苷)类有很多种,根据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等,见表6-4-1。将待鉴定的纯培养细菌接种入试验培养基中,置35℃孵育箱内孵育数小时到两周(视方法及菌种而定)后,观察结果。若用微量发酵管,或要求培养时间较长时,应注意保持其周围的湿度,以免培养基干燥。
(3)结果:能分解糖(醇、苷)产酸的细菌,培养基中的指示剂呈酸性反应(如酚红变为黄色),产气的细菌可在小倒管(Durham小管)中产生气泡,固体培养基则产生裂隙。不分解糖则无变化。
(4)应用:糖(醇、苷)类发酵试验,是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验,不同细菌可发酵不同的糖(醇、苷)类,如沙门菌可发酵葡萄糖,但不能发酵乳糖,大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖。即便是两种细菌均可发酵同一种糖类,其发酵结果也不尽相同,如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖,但前者仅产酸,而后者则产酸、产气,故可利用此试验鉴别细菌。表6-4-1 常用于细菌糖发酵试验的糖、醇类 单糖 四碳糖:赤藓糖 , 五碳糖:核糖核酮糖 木糖 阿拉伯糖, 六碳糖:葡萄糖 果糖 半乳糖 甘露糖双糖 蔗糖(葡萄糖+果糖) 乳糖(葡萄糖+半乳糖)麦芽糖(两分子葡萄糖)三糖 棉子糖(葡萄糖+果糖+半乳糖)多糖 菊糖(多分子果糖) 淀粉醇类 侧金盏花醇 卫茅醇 甘露醇 山梨醇非糖类 肌醇 2.葡萄糖代谢类型鉴别试验
(1)原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加的,称为氧化型;能进行无氧降解的为发酵型;不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖,而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵(O/F或Hugh-Leifson,HL)试验,可用于区别细菌的代谢类型。
(2)方法:挑取少许纯培养物(不要从选择性平板中挑取)接种2支HL培养管中,在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气(作为密封管),另一管不加(作为开放管)。置35℃孵箱孵育48h以上。
(3)结果: 两管培养基均不产酸(颜色不变)为阴性;两管都产酸(变黄)为发酵型;加液体石蜡管不产酸,不加液体石蜡管产酸为氧化型。
(4)应用:主要用于肠杆菌科与其它非发酵菌的鉴别。肠杆菌科、弧菌科细菌为发酵型,非发酵菌为氧化型或产碱型。也可用于鉴别葡萄球菌(发酵型)与微球菌(氧化型)。 3.甲基红(MR)试验
(1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等,使培养基pH下降至4.5以下时,加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其它物质(如醇、醛、酮、气体和水),培养基pH在 5.4以上,加入甲基红指示剂呈桔黄色。
(2)方法:将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中,35℃孵育48h~96h后,于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂,立即观察结果。
(3)结果判定:呈现红色者为阳性,桔黄色为阴性,桔红色为弱阳性。
(4)应用:常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别,如大肠埃希菌和产气肠杆菌,前者为阳性,后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性,而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。 4.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)
(1)原理:乳糖发酵过程中需要乳糖通透酶和β-半乳糖苷酶才能快速分解。有些细菌只有半乳糖苷酶,因而只能迟缓发酵乳糖,所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻硝基酚-β-D-半乳糖苷(O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG)而生成黄色的邻硝基酚。用于枸橼酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别。
(2)方法:将待试菌接种于ONPG肉汤中,35℃水浴或孵箱孵育18~24h,观察结果。
(3)结果:呈现亮黄色为阳性,无色为阴性。
(4)应用:可用于迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定,本法对于迅速及迟缓分解乳糖的细菌均可短时间内呈现阳性。埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、哈夫尼亚菌属、沙雷菌属和肠杆菌属等均为试验阳性,而沙门菌属、变形杆菌属和普罗威登斯菌属等为阴性。 5.VP试验
(1)原理:测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。某些细菌如产气肠杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性条件下,乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰,进而与培养基中的精氨酸等含胍基的物质结合形成红色化合物。即V-P试验阳性。
(2)方法:将待检菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中,35℃孵育24~48h,加入50g/Lα-萘酚(95%乙醇溶液)0.6ml,轻轻振摇试管,然后加0.2ml 400g/L KOH,轻轻振摇试管30s至1min,然后静置观察结果。
(3)结果:红色者为阳性,黄色或类似铜色为阴性。
(4)应用:主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。本试验常与MR试验一起使用,一般情况下,前者为阳性的细菌,后者常为阴性,反之亦然。但肠杆菌科细菌不一定都这样规律,如蜂房哈夫尼亚菌和奇异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。 6.胆汁七叶苷水解试验 (1)原理:在10%~40%胆汁存在下,测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶素,七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子发生反应形成黑色化合物。
(2)方法:将被检菌接种于胆汁七叶苷培养基中,35℃孵育18~24h后,观察结果。
(3)结果:培养基完全变黑为阳性,不变黑为阴性。 (4)应用:主要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别,以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌(如脆弱拟杆菌等)的初步鉴别。D群链球菌本试验为阳性。 7.淀粉水解试验
(1)原理:产生淀粉酶的细菌能将淀粉水解为糖类,在培养基上滴加碘液时,可在菌落周围出现透明区。
(2)方法:将被检菌划线接种于淀粉琼脂平板或试管中,35℃孵育18~24h,加入革兰碘液数滴,立即观察结果。
(3)结果:阳性反应,菌落周围有无色透明区,其它地方蓝色;阴性反应,培养基全部为蓝色。 (4)应用:用于白喉棒状杆菌生物型的分型,重型淀粉水解试验阳性,轻、中型阴性;芽胞杆菌属菌种和厌氧菌某些种的鉴定。 8.甘油复红试验
(1)原理:甘油可被细菌分解生成丙酮酸,丙酮酸脱去羧基为乙醛,乙醛与无色的复红生成醌式化合物,呈深紫红色。 (2)方法:取被检菌接种于甘油复红肉汤培养基中,于35℃孵育,观察2~8d。应同时做阴性对照。
(3)结果:紫红色为阳性,与对照管颜色相同为阴性。
(4)应用:主要用于沙门菌属内各菌种间的鉴别。伤寒沙门菌、甲(丙)型副伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、孔道夫沙门菌和仙台沙门菌本试验为阴性,乙型副伤寒沙门菌结果不定,其它不常见沙门菌多数为阳性。 9.葡萄糖酸氧化试验
(1)原理:某些细菌可氧化葡萄糖酸钾,生成α-酮基葡萄糖酸。α-酮基葡萄糖酸是一种还原性物质,可与班氏起反应,出现棕色或砖红色的氧化亚铜沉淀。
(2)方法:将待检菌接种于葡萄糖酸盐培养基中(1ml),置35℃孵育48h,加入班氏1ml,于中煮沸10min并迅速冷却,观察结果。
(3)结果:出现黄到砖红色沉淀为阳性。不变或仍为蓝色为阴性。
(4)应用:主要用于假单胞菌的鉴定和肠杆菌科菌分群。
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电话:021-cA-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的高效功能性表达--《现代食品科技》2015年12期
cA-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的高效功能性表达
【摘要】:为了实现乳酸乳球菌锚定蛋白cA在大肠杆菌中可溶表达以及直观检测其生物学活性,以乳酸乳球菌MG1363为模板,扩增N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶AcmA基因,将其C末端序列与GFP基因融合,连接至大肠杆菌表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-cA-GFP,转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),通过低温诱导表达重组蛋白cA-GFP。工程菌超声破碎后的上清液与经热酸处理的乳酸乳球菌常温孵育,经SDS-PAGE和荧光显微镜检测。结果表明,工程菌可以表达分子量约53ku的目的融合蛋白质,与预期大小相符。cA-GFP通过锚定蛋白cA的引导回向锚定,成功将GFP展示在乳酸乳球菌表面,目的蛋白cA-GFP在乳酸乳球菌表面展示量为121mg/g干重菌体。GFP锚定至乳酸乳球菌后于4℃保存,连续6d测定其荧光强度,荧光强度仍可达82.2%,证明其稳定性较好。成功获得了具有生物学功能的cA-GFP可溶性蛋白,为进一步展示功能性外源蛋白奠定了坚实的基础。
【作者单位】:
【关键词】:
【基金】:
【分类号】:Q78【正文快照】:
GEM(Gram positive enhancer matrix)颗粒表面展示系统是近十年发展起来的新表面展示技术。GEM是将革兰氏阳性菌经热酸处理、除去细菌表面的磷壁酸和蛋白质等大分子物质后获得的细胞壁肽聚糖骨架,能与细菌细胞壁肽聚糖水解酶(N-Acetylmuraminidase,Acm A)的C端结构域(C-termin
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【参考文献】
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黄新凤;李小华;李林;;[J];微生物学通报;2010年07期
【共引文献】
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【二级参考文献】
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李小华;黄新凤;邵小虎;李林;;[J];生物工程学报;2009年01期
邵小虎;李林;;[J];生物技术通讯;2008年06期
黄新凤;江梦天;邵小虎;李小华;李林;;[J];微生物学通报;2009年09期
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